| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第9-16页 |
| 一、Nanog的研究进展 | 第9-11页 |
| (一) Nanog的发现及分子结构 | 第9页 |
| (二) Nanog的表达特征 | 第9-10页 |
| (三) Nanog的生物学功能 | 第10-11页 |
| 二、干细胞的研究进展 | 第11-15页 |
| (一) 干细胞的调控 | 第11-12页 |
| (二) Nanog与干细胞的转录调控网络 | 第12-13页 |
| (三) 干细胞的应用 | 第13-14页 |
| (四) 干细胞与小分子化合物筛选 | 第14-15页 |
| 三、本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 第一部分 材料和方法 | 第16-25页 |
| 一、实验材料 | 第16-18页 |
| (一) 仪器与设备 | 第16页 |
| (二) 菌株、细胞株和质粒 | 第16页 |
| (三) 实验试剂 | 第16-17页 |
| (四) 实验的中药化合物 | 第17页 |
| (五) 主要试剂的配制 | 第17-18页 |
| 二、实验方法 | 第18-25页 |
| (一) pcDNA3-Nanog质粒的构建与鉴定 | 第18-20页 |
| (二) pGL3-NanogP质粒的构建与鉴定 | 第20-22页 |
| (三) 细胞培养方法 | 第22-23页 |
| (四) 荧光素酶报告基因法测定Nanog启动子活性 | 第23页 |
| (五) Nanog基因表达调节剂的筛选 | 第23-24页 |
| (六) 免疫印迹分析 | 第24-25页 |
| 第二部分 实验结果 | 第25-40页 |
| 一、人Nanog基因的克隆及其真核表达载体的构建 | 第25-27页 |
| (一) Nanog基因的PCR扩增及构建TA克隆质粒 | 第25-26页 |
| (二) Nanog基因真核表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 二、Nanog启动子荧光素酶报告载体的构建及启动子活性分析 | 第27-28页 |
| (一) Nanog启动子荧光素酶报告载体的构建 | 第27-28页 |
| (二) pGL3-NanogP启动子的活性分析 | 第28页 |
| 三、基于Nanog启动子活性的化合物筛选 | 第28-36页 |
| (一) Nanog转录调节剂的初步筛选 | 第28-35页 |
| (二) Nanog转录调节剂的复筛 | 第35-36页 |
| 四、目标化合物对Nanog基因表达的调节 | 第36-37页 |
| (一) 目标化合物对Nanog mRNA表达的影响 | 第36页 |
| (二) 目标化合物对Nanog蛋白表达的影响 | 第36-37页 |
| 五、目标化合物调节Nanog基因表达的分子机制探究 | 第37-40页 |
| (一) NA202和NI125对细胞内相关信号通路的影响 | 第37-38页 |
| (二) NA202对NF-κB信号通路的影响 | 第38页 |
| (三) NI125对NF-κB及ERK/MAPK信号通路的影响 | 第38-40页 |
| 第三部分 讨论 | 第40-43页 |
| 第四部分 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 附录 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |
