| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-20页 |
| 1.1 蓖麻凝集素 | 第8-11页 |
| 1.1.1 RCA的结构与性质 | 第8-9页 |
| 1.1.2 RCA的应用 | 第9-11页 |
| 1.2 蛋白质固定化 | 第11-14页 |
| 1.2.1 蛋白质固定化的方法 | 第11-13页 |
| 1.2.2 蛋白质之间的相互作用 | 第13-14页 |
| 1.3 酶的化学修饰 | 第14-17页 |
| 1.3.1 酶的表面化学修饰 | 第14-16页 |
| 1.3.2 酶分子的内部修饰 | 第16页 |
| 1.3.3 结合定点突变的化学修饰 | 第16-17页 |
| 1.4 本研究的内容、目的和意义 | 第17-19页 |
| 1.5 研究的技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 蓖麻凝集素的提取纯化 | 第20-27页 |
| 2.1 实验用品 | 第20-22页 |
| 2.1.1 实验试剂与材料 | 第20-21页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第21页 |
| 2.1.3 主要实验试剂配制 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法和步骤 | 第22-24页 |
| 2.2.1 RCA粗提液的制备 | 第22-23页 |
| 2.2.2 RCA的纯化 | 第23页 |
| 2.2.3 SDS-PAGE检测鉴定纯化的RCA | 第23-24页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第24-27页 |
| 2.3.1 RCA的提取纯化结果 | 第24-25页 |
| 2.3.2 RCA的SDS-PAGE检测鉴定结果 | 第25-26页 |
| 2.3.3 讨论 | 第26-27页 |
| 第三章 蓖麻凝集素的固定 | 第27-31页 |
| 3.1 实验用品 | 第27-28页 |
| 3.1.1 实验试剂与材料 | 第27页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第27-28页 |
| 3.1.3 主要实验试剂配制 | 第28页 |
| 3.2 实验方法与步骤 | 第28-29页 |
| 3.2.1 载体Sepharose 4B的活化 | 第28页 |
| 3.2.2 RCA与Sepharose 4B的偶联 | 第28页 |
| 3.2.3 RCA-Sepharose 4B的偶联率 | 第28-29页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第29-31页 |
| 3.3.1 RCA-Sepharose 4B的偶联率 | 第29-30页 |
| 3.3.2 讨论 | 第30-31页 |
| 第四章 RCA-Sepharose 4B的应用 | 第31-54页 |
| 第一节 RCA-Sepharose 4B应用于分离兔血浆中的相关蛋白 | 第31-39页 |
| 4.1 实验用品 | 第31-32页 |
| 4.1.1 实验试剂与材料 | 第31-32页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第32页 |
| 4.1.3 主要实验试剂配制 | 第32页 |
| 4.2 实验方法与步骤 | 第32-34页 |
| 4.2.1 兔血浆的制备 | 第32-33页 |
| 4.2.2 RCA-Sepharose 4B分离兔血浆中的相关蛋白 | 第33页 |
| 4.2.3 SDS-PAGE检测鉴定 | 第33页 |
| 4.2.4 洗脱蛋白与RCA体外反应前后的紫外扫描 | 第33页 |
| 4.2.5 洗脱蛋白中含糖的判定 | 第33-34页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第34-39页 |
| 4.3.1 亲和层析柱分离兔血浆中的相关蛋白结果 | 第34-35页 |
| 4.3.2 SDS-PAGE检测鉴定结果 | 第35-36页 |
| 4.3.3 洗脱蛋白与RCA体外反应前后的紫外扫描结果 | 第36-37页 |
| 4.3.4 洗脱蛋白中含糖的判定结果 | 第37-38页 |
| 4.3.5 讨论 | 第38-39页 |
| 第二节 RCA-Sepharose 4B应用于分离半乳糖苷化的蛋清溶菌酶 | 第39-54页 |
| 4.4 实验用品 | 第39-41页 |
| 4.4.1 实验试剂与材料 | 第39-40页 |
| 4.4.2 实验仪器 | 第40-41页 |
| 4.4.3 实验试剂配制 | 第41页 |
| 4.5 实验方法和步骤 | 第41-45页 |
| 4.5.1 724阳离子树脂提取纯化蛋清溶菌酶 | 第41-44页 |
| 4.5.2 蛋清溶菌酶的半乳糖苷化 | 第44页 |
| 4.5.3 RCA-Sepharose 4B分离Gal-LYZ和LYZ | 第44页 |
| 4.5.4 Gal-LYZ分离后SDS-PAGE检测鉴定 | 第44页 |
| 4.5.5 Gal-LYZ中糖和蛋白质的浓度测定 | 第44页 |
| 4.5.6 Gal-LYZ和LYZ的光学检测 | 第44-45页 |
| 4.5.7 LYZ和Gal-LYZ酶学性质比较 | 第45页 |
| 4.6 实验结果与讨论 | 第45-54页 |
| 4.6.1 蛋清溶菌酶的SDS-PAGE检测鉴定结果 | 第45-46页 |
| 4.6.2 蛋清溶菌酶的酶的含量及酶得率 | 第46页 |
| 4.6.3 蛋清溶菌酶酶比活力测定结果 | 第46-47页 |
| 4.6.4 RCA-Sepharose 4B分离Gal-LYZ和LYZ结果 | 第47页 |
| 4.6.5 SDS-PAGE检测鉴定Gal-LYZ和LYZ结果 | 第47-48页 |
| 4.6.6 Gal-LYZ中糖和蛋白质的浓度 | 第48页 |
| 4.6.7 Gal-LYZ和LYZ的光学检测结果 | 第48-50页 |
| 4.6.8 Gal-LYZ和LYZ酶学性质比较 | 第50-53页 |
| 4.6.9 讨论 | 第53-54页 |
| 第五章 结论与展望 | 第54-57页 |
| 5.1 结论 | 第54-55页 |
| 5.2 创新点 | 第55页 |
| 5.3 展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
