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抗PSMA适配子介导的细胞自噬与促凋亡系统的构建及其抗前列腺癌功能的初步研究

缩略语表第6-8页
中文摘要第8-11页
英文摘要第11-13页
前言第14-15页
文献回顾第15-26页
第一部分 重组表达质粒pET 30a-SA-ECD的构建第26-41页
    引言第26页
    1 材料第26-28页
        1.1 载体第26-27页
        1.2 菌种第27页
        1.3 主要试剂及缓冲液第27页
        1.4 常用培养基、琼脂糖凝胶及其配制方法第27-28页
        1.5 主要仪器第28页
    2 方法第28-34页
        2.1 目的基因的设计第28-32页
        2.2 载体的准备第32-33页
        2.3 载体与目的基因连接第33页
        2.4 重组质粒鉴定第33-34页
    3 结果第34-39页
        3.1 目的基因鉴定第34-36页
        3.2 重组表达质粒的鉴定结果第36-39页
    4 讨论第39-41页
第二部分 融合蛋白SA-ECD的表达与纯化第41-51页
    引言第41页
    1 材料第41-42页
        1.1 菌种第41页
        1.2 主要试剂、缓冲液第41-42页
        1.3 常用试剂、缓冲液及培养基的配制方法第42页
        1.4 主要仪器第42页
    2 方法第42-46页
        2.1 融合蛋白的诱导表达及Western-blot初步鉴定第42-44页
        2.2 融合蛋白的大量诱导表达及其纯化、鉴定第44-45页
        2.3 Bradford法测定蛋白浓度第45-46页
    3 结果第46-49页
        3.1 成功表达并初步鉴定融合蛋白SA-ECD第46-47页
        3.2 成功纯化并鉴定融合蛋白SA-ECD第47-48页
        3.3 蛋白浓度测定第48-49页
    4 讨论第49-51页
第三部分 靶向系统的构建及其抗前列腺癌功能的初步研究第51-66页
    引言第51页
    1 材料第51-52页
        1.1 细胞第51页
        1.2 主要试剂第51-52页
        1.3 主要仪器第52页
    2 方法第52-56页
        2.1 靶向系统的构建第52-53页
        2.2 电泳迁移率试验(EMSA)第53-54页
        2.3 CCK-8 法检测细胞存活率第54页
        2.4 细胞凋亡检测第54页
        2.5 台盼兰染色法鉴定细胞活力第54-55页
        2.6 形态学观察第55页
        2.7 细胞自噬形态学观察第55页
        2.8 Western blot检测相关蛋白表达第55-56页
        2.9 统计学方法第56页
    3 结果第56-64页
        3.1 八聚精氨酸(R_8)能高效的穿过细胞膜第56-57页
        3.2 SA-ECD可特异性结合A10-biotin及biotin-NuBCP9R_8第57-58页
        3.3 靶向系统降低前列腺癌LNCaP细胞存活率第58页
        3.4 靶向系统促进前列腺癌LNCaP细胞凋亡第58-60页
        3.5 靶向系统降低PSMA(+)前列腺癌细胞活力第60页
        3.6 靶向系统破坏PSMA(+)前列腺癌细胞形态第60-61页
        3.7 靶向系统诱导前列腺癌LNCaP细胞发生自噬第61-62页
        3.8 靶向系统影响LNCaP细胞自噬及凋亡相关蛋白表达第62-64页
    4 讨论第64-66页
小结第66-67页
参考文献第67-77页
个人简历和研究成果第77-78页
致谢第78页

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