摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 引言 | 第12-25页 |
1.1 长非编码RNA概述 | 第12-14页 |
1.1.1 长非编码RNA概念及分类 | 第12-13页 |
1.1.2 长非编码RNA功能 | 第13-14页 |
1.2 长非编码RNA的研究现状 | 第14-19页 |
1.2.1 长非编码RNA与着床前胚胎发育 | 第14-17页 |
1.2.2 长非编码RNA与ESCs多能性 | 第17-18页 |
1.2.3 长非编码RNA与疾病 | 第18-19页 |
1.3 长非编码RNA调控机制 | 第19-24页 |
1.3.1 长非编码RNA参与转录前调控 | 第20-23页 |
1.3.2 长非编码RNA参与转录调控 | 第23-24页 |
1.3.3 长非编码RNA参与转录后调控 | 第24页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-38页 |
2.1 实验材料 | 第25-30页 |
2.1.1 猪卵巢和精液 | 第25页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第25页 |
2.1.3 主要试剂及试剂盒 | 第25-26页 |
2.1.4 主要抗体 | 第26页 |
2.1.5 常用试剂及配制 | 第26-29页 |
2.1.6 主要生物分析软件及网站 | 第29-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-38页 |
2.2.1 成熟卵母细胞的获取 | 第30页 |
2.2.2 胚胎培养及显微操作 | 第30-32页 |
2.2.3 胚胎免疫荧光检测(IF) | 第32-33页 |
2.2.4 胚胎Ed U细胞增殖检测 | 第33页 |
2.2.5 胚胎Annexin-V早期凋亡检测 | 第33页 |
2.2.6 荧光定量PCR | 第33-36页 |
2.2.7 RNA干扰(RNAi) | 第36-38页 |
3 结果与分析 | 第38-57页 |
3.1 猪早期胚胎发育相关linc RNA的特征分析 | 第38-40页 |
3.1.1 未知linc RNA转录本的结构特征分析 | 第38页 |
3.1.2 未知linc RNA转录本的表达情况分析 | 第38-39页 |
3.1.3 未知linc RNA与基因对的表达相关性与距离分析 | 第39-40页 |
3.2 猪早期胚胎发育中特定linc RNA的表达模式分析 | 第40-47页 |
3.2.1 部分新linc RNA转录本在猪各组织中表达模式分析 | 第41-45页 |
3.2.2 部分新linc RNA转录本在猪早期胚胎中表达模式分析 | 第45-47页 |
3.3 猪早期胚胎发育相关Lnc-370 的功能研究 | 第47-57页 |
3.3.1 锁核酸干扰Lnc-370 对猪早期胚胎发育的影响 | 第47-48页 |
3.3.2 干扰Lnc-370 不影响原核形成 | 第48页 |
3.3.3 干扰Lnc-370 影响 1-cell阶段胚胎雌雄原核的融合 | 第48-50页 |
3.3.4 干扰Lnc-370 不影响DNA复制 | 第50页 |
3.3.5 干扰Lnc-370 影响纺锤体的形成 | 第50-52页 |
3.3.6 阻滞胚胎检测到DNA损伤和细胞凋亡信号 | 第52页 |
3.3.7 胚胎阻滞发生在有丝分裂中期之前 | 第52-54页 |
3.3.8 胚胎阻滞特异性的发生在第一次卵裂 | 第54-57页 |
4 讨论 | 第57-60页 |
4.1 Lnc RNA对早期胚胎发育的影响 | 第57页 |
4.2 猪lnc RNA在早期胚胎发育中的功能 | 第57-58页 |
4.3 Lnc-370 在猪早期胚胎发育中的功能 | 第58-59页 |
4.4 Lnc-370 的作用机制 | 第59-60页 |
5 结论 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第71页 |