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人脐带间充质干细胞分泌的微囊通过AKT/mTOR信号通路诱导膀胱肿瘤自噬性增强的研究

摘要第2-4页
Abstract第4页
引言第7-9页
1 材料与试剂第9-13页
    1.1 实验材料第9页
    1.2 细胞培养试剂第9-10页
    1.3 主要抗体第10-11页
    1.4 实验耗材和仪器第11-13页
2 实验方法与步骤第13-19页
    2.1人脐带间充质干细胞的原代培养及鉴定分析第13页
    2.2 T24细胞复苏第13-14页
    2.3 细胞传代培养第14页
    2.4 细胞冻存第14-15页
    2.5 hWJMSC-MVs的制备第15页
    2.6 hWJMSC-MVs的电镜鉴定第15页
    2.7 膀胱肿瘤细胞自噬体变化的透视电镜检测第15-16页
    2.8 蛋白印迹法(Western blot)检测膀胱癌细胞株蛋白表达水平第16-18页
        2.8.1 蛋白抽提及蛋白浓度测定第16-17页
        2.8.2 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第17页
        2.8.3 免疫印迹第17-18页
    2.9 膀胱肿瘤细胞凋亡检测第18页
    2.10 统计学处理第18-19页
3 结果第19-23页
    3.1 hWJMSC-MVs分离及鉴定第19页
    3.2 hWJMSC-MVs明显诱导T24细胞自噬体生成第19-20页
    3.3 hWJMSC-MVs通过AKT/m TOR诱导T24细胞自噬及相关信号通路的变化第20页
    3.4 3-MA抑制T24细胞自噬后Western blot检测再次监测MVs作用的膀胱癌细胞内自噬相关基因的表达第20-21页
    3.5 3-MA抑制T24细胞的自噬的电镜变化第21-22页
    3.6 3-MA抑制T24细胞的自噬, hWJMSC-MVs对T24细胞凋亡的变化第22-23页
4 讨论第23-24页
5 结论第24-25页
References第25-28页
自噬介导的肿瘤细胞的生存和死亡(综述)第28-35页
    References第32-35页
攻读学位期间的研究成果第35-36页
致谢第36-37页

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