中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1.前言 | 第13-22页 |
1.1 病原学 | 第13-17页 |
1.1.1 禽流感的形态与结构 | 第13页 |
1.1.2 禽流感编码的蛋白及其功能 | 第13-17页 |
1.2 禽流感病毒的变异 | 第17页 |
1.3 禽流感病毒流行病学 | 第17-18页 |
1.3.1 H9N2亚型AIV流行状况 | 第17页 |
1.3.2 H9N2亚型AIV在水禽中流行现状 | 第17-18页 |
1.4 禽流感病毒的检测方法 | 第18页 |
1.5 实时荧光定量PCR研究进展 | 第18-21页 |
1.5.1 实时荧光定量PCR基本原理 | 第18-19页 |
1.5.2 实时荧光定量PCR的分类 | 第19-20页 |
1.5.3 荧光定量PCR的定量方法 | 第20-21页 |
1.5.4 荧光定量RT-PCR在畜牧生产中的应用 | 第21页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
2.材料与方法 | 第22-31页 |
2.1 材料 | 第22-23页 |
2.1.1 病毒与实验动物 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂及化学药品 | 第22页 |
2.1.3 主要仪器 | 第22-23页 |
2.2 方法 | 第23-31页 |
2.2.1 H9N2亚型AIV的分离鉴定 | 第23页 |
2.2.2 H9N2亚型AIV的生物学特性分析 | 第23-24页 |
2.2.3 H9N2亚型AIV的全基因组测序 | 第24-28页 |
2.2.4 SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测H9N2亚型AIV(JN1株)HA基因方法的建立 | 第28-30页 |
2.2.5 H9N2亚型AIV感染樱桃谷雏鸭后排毒规律及各组织病毒载量 | 第30-31页 |
3.结果 | 第31-46页 |
3.1 H9N2亚型AIV的分离鉴定 | 第31页 |
3.2 生物学特性分析 | 第31-32页 |
3.2.1 鸡胚半数感染量(EID_(50))测定结果 | 第31-32页 |
3.2.2 鸡胚平均致死时间(MDT)测定结果 | 第32页 |
3.2.3 静脉致病指数(IVPI) 测定结果 | 第32页 |
3.2.4 抗原差异性分析 | 第32页 |
3.3 全基因分析 | 第32-37页 |
3.3.1 分离毒株基因组PCR扩增结果 | 第32页 |
3.3.2 全基因核酸序列比较 | 第32-36页 |
3.3.3 HA基因上关键氨基酸位点分析 | 第36页 |
3.3.4 NA上关键氨基酸位点分析 | 第36-37页 |
3.3.5 PB2、PB1和PA基因的序列分析 | 第37页 |
3.3.6 M、NP、和NS基因的序列分析 | 第37页 |
3.4 H9N2亚型AIV荧光定量PCR检测方法的建立与应用 | 第37-42页 |
3.4.1 荧光定量PCR引物特异性 | 第37-38页 |
3.4.2 荧光定量反应条件的优化 | 第38页 |
3.4.3 荧光定量PCR检测HA基因标准曲线的建立 | 第38-39页 |
3.4.4 特异性试验结果 | 第39-40页 |
3.4.5 敏感性检测结果 | 第40-41页 |
3.4.6 重复性试验结果 | 第41页 |
3.4.7 动物实验样品的检测 | 第41-42页 |
3.5 H9N2亚型AIV(JN1株)感染樱桃谷雏鸭后排毒规律及各组织病毒载量 | 第42-46页 |
3.5.1 临床观察结果 | 第42页 |
3.5.2 樱桃谷雏鸭感染H9N2亚型AIV后的排毒规律 | 第42-43页 |
3.5.3 剖检病变 | 第43-44页 |
3.5.4 组织病理切片观察 | 第44页 |
3.5.5 雏鸭感染JN1株AIV病毒后各组织器官中病毒载量的变化 | 第44-45页 |
3.5.6 攻毒样品血清抗体水平检测 | 第45-46页 |
4.讨论 | 第46-49页 |
5.结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
硕士期间发表论文情况 | 第58页 |