| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第12-22页 |
| 1.1 降解木质纤维素的微生物 | 第12-14页 |
| 1.1.1 降解木质纤维素的细菌 | 第13页 |
| 1.1.2 降解微生物的真菌 | 第13-14页 |
| 1.2 天然生物质降解系统的研究进展 | 第14-17页 |
| 1.2.1 天然生物质降解系统研究中的宏基因组学 | 第14页 |
| 1.2.2 天然生物质高效降解系统研究进展 | 第14-17页 |
| 1.3 疏棉状嗜热丝孢菌的降解酶系研究概述 | 第17-19页 |
| 1.3.1 疏棉状嗜热丝孢菌的降解酶系 | 第17-18页 |
| 1.3.2 LC-MS技术鉴定真菌分泌组研究进展 | 第18-19页 |
| 1.4 立项依据 | 第19-22页 |
| 第二章 堆肥生境微生物区系动态变化 | 第22-38页 |
| 2.1 引言 | 第22-23页 |
| 2.2 材料与方法 | 第23-24页 |
| 2.2.1 实验设备与试剂 | 第23页 |
| 2.2.2 三种堆肥原料与堆肥方法 | 第23页 |
| 2.2.3 样品采集与储存 | 第23-24页 |
| 2.2.4 样品DNA提取方法 | 第24页 |
| 2.2.5 理化性质检测 | 第24页 |
| 2.2.6 DNA高通量测序 | 第24页 |
| 2.3 结果与分析 | 第24-36页 |
| 2.3.1 蘑菇渣堆肥理化性质与细菌群落区系动态变化 | 第24-28页 |
| 2.3.2 鸡舍垫料稻壳堆肥理化性质与细菌群落区系动态变化 | 第28-31页 |
| 2.3.3 玉米秸秆堆肥细菌与真菌群落区系动态变化 | 第31-36页 |
| 2.4 本章小结与讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 玉米秸秆堆肥中优势丝状真菌的分离与鉴定 | 第38-44页 |
| 3.1 引言 | 第38页 |
| 3.2 材料与方法 | 第38-40页 |
| 3.2.1 样品来源 | 第38页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第38页 |
| 3.2.3 筛选培养基 | 第38页 |
| 3.2.4 筛选方法 | 第38页 |
| 3.2.5 ITS序列鉴定真菌菌种 | 第38-39页 |
| 3.2.6 不同温度培养条件下真菌的生长情况 | 第39页 |
| 3.2.7 菌种的保存 | 第39-40页 |
| 3.3 结果与分析 | 第40-42页 |
| 3.3.1 菌种分离 | 第40页 |
| 3.3.2 ITS鉴定丝状真菌 | 第40-42页 |
| 3.3.3 不同温度培养条件下T.lanuginosus的生长情况 | 第42页 |
| 3.4 本章小结 | 第42-44页 |
| 第四章 不同底物培养条件下疏棉状嗜热丝孢菌胞外酶系功能分析 | 第44-56页 |
| 4.1 引言 | 第44页 |
| 4.2 材料与方法 | 第44-48页 |
| 4.2.1 菌种 | 第44页 |
| 4.2.2 实验试剂与实验设备 | 第44页 |
| 4.2.3 培养基 | 第44页 |
| 4.2.4 接种与粗酶液浸取 | 第44-45页 |
| 4.2.5 粗酶液还原糖的测定 | 第45页 |
| 4.2.6 木聚糖酶活力测定 | 第45页 |
| 4.2.7 蛋白质含量测定 | 第45页 |
| 4.2.8 Native-PAGE检测木聚糖酶同工酶 | 第45页 |
| 4.2.9 明胶蛋白酶酶谱电泳 | 第45-46页 |
| 4.2.10 SDS-PAGE电泳检测粗酶液中的蛋白质条带 | 第46页 |
| 4.2.11 荧光辅助糖电泳分析还原糖生成情况 | 第46-47页 |
| 4.2.12 蛋白质组质谱样品制备 | 第47-48页 |
| 4.3 结果与分析 | 第48-55页 |
| 4.3.1 三种单糖为碳源液体培养条件下T. lanuginosus培养产胞外蛋白质动态酶谱分析 | 第48-51页 |
| 4.3.2 天然复杂底物为碳源固体发酵培养条件下T. lanuginosus培养产胞外蛋白质动态酶谱分析 | 第51-53页 |
| 4.3.3 不同碳源条件下粗酶液中的蛋白质组分析 | 第53-55页 |
| 4.4 本章小结与讨论 | 第55-56页 |
| 第五章 木聚糖酶基因xynA在毕赤酵母中的表达与其酶学性质 | 第56-66页 |
| 5.1 引言 | 第56页 |
| 5.2 材料与方法 | 第56-62页 |
| 5.2.1 菌株与载体质粒 | 第56页 |
| 5.2.2 实验试剂 | 第56-57页 |
| 5.2.3 培养基 | 第57页 |
| 5.2.4 引物设计 | 第57页 |
| 5.2.5 RNA的提取与反转录 | 第57-58页 |
| 5.2.6 重组质粒pPIC-9K-xynA的构建与扩增以及xynA的测序 | 第58-60页 |
| 5.2.7 在毕赤酵母GS115中表达目的基因 | 第60-61页 |
| 5.2.8 目的蛋白的获得与分离纯化 | 第61页 |
| 5.2.9 XYNA木聚糖酶酶学性质研究 | 第61-62页 |
| 5.3 结果与分析 | 第62-64页 |
| 5.3.1 PCR扩增xynA | 第62页 |
| 5.3.2 重组质粒与质粒验证 | 第62页 |
| 5.3.3 连接有目的基因xynA的重组质粒测序结果 | 第62-63页 |
| 5.3.4 获得毕赤酵母GS115重组子 | 第63页 |
| 5.3.5 木聚糖酶XYNA酶学性质研究 | 第63-64页 |
| 5.4 本章小结 | 第64-66页 |
| 全文总结与展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 攻读学位期间发表的文章 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 附件 | 第75页 |
