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流产衣原体MIP蛋白的双抗原夹心ELISA诊断方法建立及单克隆抗体制备

附件第3-6页
摘要第6-7页
Abstract第7页
英文缩略表第11-13页
第一章 引言第13-19页
    1.1 衣原体概述第13页
    1.2 衣原体的诊断研究进展第13-17页
        1.2.1 病原学诊断第13-16页
        1.2.2 衣原体血清学诊断方法第16-17页
    1.3 MIP蛋白的研究进展第17-18页
    1.4 本研究目的和意义第18-19页
第二章 流产衣原体MIP基因的克隆与表达第19-37页
    2.1 引言第19页
    2.2 材料与方法第19-31页
        2.2.1 材料第19-21页
        2.2.2 方法第21-31页
    2.3 结果与分析第31-35页
        2.3.1 mip目的基因的扩增结果第31页
        2.3.2 pMD18-T simple-mip重组克隆质粒的鉴定第31-32页
        2.3.3 重组表达质粒pET-mip的鉴定第32-33页
        2.3.4 表达MIP蛋白的SDS-PAGE第33页
        2.3.5 表达MIP蛋白Western-blot鉴定第33-34页
        2.3.6 表达蛋白MIP的大量诱导纯化第34-35页
    2.4 讨论第35-37页
第三章 流产衣原体MIP蛋白双抗原夹心ELISA诊断方法的建立第37-51页
    3.1 引言第37页
    3.2 材料与方法第37-40页
        3.2.1 材料第37-38页
        3.2.2 方法第38-40页
    3.3 结果与分析第40-49页
        3.3.1 抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释度的确定第40-41页
        3.3.2 最佳包被条件的确定第41-42页
        3.3.3 最佳封闭液及封闭时间的确定第42-43页
        3.3.4 酶标抗原最佳稀释度及孵育时间的确定第43页
        3.3.5 血清最佳作用时间的确定第43-44页
        3.3.6 底物缓冲液最佳作用时间的确定第44-45页
        3.3.7 双抗原夹心ELISA诊断方法临界值的确定第45-46页
        3.3.8 特异性试验第46-48页
        3.3.9 敏感性试验第48页
        3.3.10 重复性试验第48-49页
        3.3.11 符合率试验第49页
        3.3.12 稳定性试验第49页
    3.4 讨论第49-51页
第四章 MIP蛋白单克隆抗体的制备第51-61页
    4.1 引言第51页
    4.2 材料与方法第51-56页
        4.2.1 材料第51-52页
        4.2.2 方法第52-56页
    4.3 结果与分析第56-60页
        4.3.1 杂交瘤细胞株的建立第56页
        4.3.2 单克隆抗体效价及亚类鉴定第56-57页
        4.3.3 单克隆抗体相对亲和力鉴定第57页
        4.3.4 抗体特异性鉴定第57-58页
        4.3.5 杂交瘤细胞系染色体分析第58页
        4.3.6 杂交瘤细胞株分泌单克隆抗体稳定性试验第58-59页
        4.3.7 流产衣原体中和试验第59-60页
    4.4 讨论第60-61页
第五章 全文结论第61-62页
参考文献第62-68页
附录第68-69页
致谢第69-70页
作者简介第70页

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