辽宁省养殖鱼类中病原微生物的调查及部分弧菌属病原菌的快速鉴定
| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第14-23页 |
| 0.1 辽宁省水产概况 | 第14页 |
| 0.2 水产品中常见病原微生物 | 第14-18页 |
| 0.2.1 弧菌属 | 第15-16页 |
| 0.2.2 气单胞菌属 | 第16-17页 |
| 0.2.3 其他病原微生物 | 第17-18页 |
| 0.3 水产品养殖中常用疾病检测技术 | 第18-20页 |
| 0.3.1 选择性培养基分离法 | 第18页 |
| 0.3.2 细菌鉴定系统 | 第18页 |
| 0.3.3 免疫学检测法 | 第18-19页 |
| 0.3.4 环介导等温扩增技术 | 第19页 |
| 0.3.5 聚合酶链式反应技术 | 第19页 |
| 0.3.6 多重PCR技术 | 第19页 |
| 0.3.7 荧光定量PCR技术 | 第19-20页 |
| 0.4 常见病原微生物特异性基因 | 第20-21页 |
| 0.4.1 toxR基因 | 第20页 |
| 0.4.2 recA基因 | 第20页 |
| 0.4.3 recB基因 | 第20页 |
| 0.4.4 pyrH基因 | 第20-21页 |
| 0.4.5 topA基因 | 第21页 |
| 0.4.6 rpoD基因 | 第21页 |
| 0.5 研究目的与意义 | 第21-23页 |
| 第1章 辽宁省养殖鱼类中病原微生物的调查 | 第23-44页 |
| 1.1 样本采集地点 | 第23-25页 |
| 1.2 采集到的样本 | 第25-28页 |
| 1.2.1 鱼类烂鳃病 | 第25页 |
| 1.2.2 鱼类细菌性肠炎 | 第25-26页 |
| 1.2.3 鱼类体表溃烂症 | 第26-27页 |
| 1.2.4 鱼类突眼病 | 第27-28页 |
| 1.3 病原微生物的分离和培养 | 第28页 |
| 1.4 细菌 16S rRNA鉴定 | 第28-34页 |
| 1.4.1 病原微生物DNA提取 | 第28-29页 |
| 1.4.2 细菌 16S rRNA实验过程 | 第29-30页 |
| 1.4.3 16S rRNA序列分析 | 第30-34页 |
| 1.5 人工感染实验 | 第34-38页 |
| 1.5.1 实验材料 | 第34页 |
| 1.5.2 感染病原菌来源及感染方式 | 第34页 |
| 1.5.3 引物实际检测能力验证 | 第34-35页 |
| 1.5.4 人工感染实验的结果 | 第35-38页 |
| 1.5.5 小结 | 第38页 |
| 1.6 16S rRNA微生物多样性分析 | 第38-44页 |
| 第2章 四种常见弧菌属病原菌的快速检测方法建立 | 第44-85页 |
| 2.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 2.2 实验方法 | 第45-53页 |
| 2.2.1 目的基因的选择及引物的设计与筛选 | 第45-49页 |
| 2.2.2 引物特异性的验证 | 第49-50页 |
| 2.2.3 引物最佳退火温度的探索 | 第50-51页 |
| 2.2.4 特异性验证 | 第51页 |
| 2.2.5 灵敏性验证 | 第51-52页 |
| 2.2.6 引物模拟实际检测能力的验证 | 第52-53页 |
| 2.3 结果与分析 | 第53-84页 |
| 2.3.1 pyrH-Vp | 第54-57页 |
| 2.3.2 recB-Vp | 第57-60页 |
| 2.3.3 recA-Vv | 第60-63页 |
| 2.3.4 rpoD-Vv | 第63-66页 |
| 2.3.5 topA-Vv | 第66-69页 |
| 2.3.6 toxR-Vv | 第69-72页 |
| 2.3.7 toxR-Va-1 | 第72-75页 |
| 2.3.8 toxR-Va-2 | 第75-78页 |
| 2.3.9 topA-Va | 第78-81页 |
| 2.3.10 recA-Vm | 第81-84页 |
| 2.4 小结 | 第84-85页 |
| 第3章 结论与展望 | 第85-87页 |
| 3.1 结论 | 第85页 |
| 3.2 展望 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-91页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况 | 第91-92页 |
