摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
第一部分 实验研究 | 第11-52页 |
第一章 蛛丝蛋白八聚体转基因小鼠的制备及阳性鼠鉴定 | 第11-29页 |
1. 材料与仪器 | 第12-14页 |
1.1 仪器 | 第12-13页 |
1.2 试剂 | 第13页 |
1.3 试剂配制 | 第13-14页 |
1.4 试验动物 | 第14页 |
1.5 待转外源基因 | 第14页 |
2. 方法 | 第14-22页 |
2.1 待转目的基因的准备 | 第14-15页 |
2.2 结扎公鼠及假孕母鼠的准备 | 第15页 |
2.3 超数排卵 | 第15页 |
2.4 受精卵的采集 | 第15页 |
2.5 原核显微注射 | 第15-16页 |
2.6 假孕母鼠的胚胎移植 | 第16页 |
2.7 蛛丝蛋白转基因小鼠的PCR鉴定 | 第16-17页 |
2.8 蛛丝蛋白转基因小鼠Southern Blot鉴定 | 第17-22页 |
3 结果 | 第22-26页 |
3.1 显微注射结果 | 第22-23页 |
3.2 PCR鉴定结果 | 第23-24页 |
3.3 Southern Blot鉴定结果 | 第24-26页 |
4 讨论 | 第26-27页 |
参考文献 | 第27-29页 |
第二章 蛛丝蛋白转基因阳性小鼠表达水平的检测 | 第29-51页 |
1. 材料与仪器 | 第30-31页 |
1.1 仪器 | 第30页 |
1.2 试剂 | 第30-31页 |
1.3 试剂配制 | 第31页 |
1.4 材料 | 第31页 |
2. 方法 | 第31-41页 |
2.1 转基因阳性小鼠转录水平的检测 | 第31-36页 |
2.2 转基因阳性小鼠蛋白质水平的检测 | 第36-39页 |
2.3 免疫荧光染色法对转基因阳性小鼠皮肤蛋白表达量的检测 | 第39-40页 |
2.4 转基因小鼠拷贝数的检测 | 第40-41页 |
3. 结果 | 第41-48页 |
3.1 转录水平检测结果 | 第41-43页 |
3.2 蛋白质水平检测结果 | 第43-44页 |
3.3 免疫荧光染色对基因表达的检测结果 | 第44-45页 |
3.4 拷贝数检测结果 | 第45-48页 |
4 讨论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-51页 |
结论 | 第51-52页 |
第二部分 文献综述 | 第52-62页 |
一、天然蜘蛛丝的研究 | 第52-53页 |
1. 蜘蛛丝的种类与功能 | 第52页 |
2. 蜘蛛丝的结构 | 第52页 |
3. 蜘蛛丝的性能 | 第52-53页 |
二、重组蜘蛛丝的研究 | 第53-55页 |
1. 重组蜘蛛丝蛋白研究背景 | 第53页 |
2. 应用生物技术手段在不同的宿主中表达重组蜘蛛丝蛋白 | 第53页 |
3. 不同的宿主对重组蜘蛛丝蛋白表达的影响 | 第53-54页 |
4. 人工合成重组蜘蛛丝蛋白面临的问题 | 第54-55页 |
三、蜘蛛丝的应用前景 | 第55-57页 |
1. 军事及航天领域的应用 | 第55页 |
2. 医学领域的应用 | 第55-56页 |
3. 纺织领域的作用 | 第56页 |
4. 建筑领域的应用 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第63页 |