| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第13-27页 |
| 1.1 D-塔格糖概述 | 第13-17页 |
| 1.1.1 D-塔格糖理化特性 | 第13页 |
| 1.1.2 D-塔格糖的生理功能 | 第13-14页 |
| 1.1.3 D-塔格糖的代谢途径 | 第14-15页 |
| 1.1.4 D-塔格糖的生产方法 | 第15-17页 |
| 1.2 L-阿拉伯糖异构酶 | 第17-20页 |
| 1.2.1 L-AI的性质特点 | 第17-18页 |
| 1.2.2 L-AI的微生物来源 | 第18页 |
| 1.2.3 L-AI与D-塔格糖生产 | 第18-20页 |
| 1.3 枯草芽孢杆菌芽孢表面展示系统 | 第20-24页 |
| 1.3.1 枯草芽孢杆菌基因工程菌 | 第20-21页 |
| 1.3.2 B.subtilis芽孢表面展示系统 | 第21-23页 |
| 1.3.3 B.subtilis芽孢表面展示系统的研究进展 | 第23-24页 |
| 1.4 本课题的研究目的和意义 | 第24-25页 |
| 1.5 本课题的研究内容和技术路线 | 第25-27页 |
| 第二章 产D-塔格糖乳酸菌的筛选及鉴定 | 第27-36页 |
| 2.1 引言 | 第27-28页 |
| 2.2 实验材料 | 第28-30页 |
| 2.2.1 样品及主要试剂 | 第28页 |
| 2.2.2 培养基、试剂的配制 | 第28-29页 |
| 2.2.3 仪器设备 | 第29-30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-32页 |
| 2.3.1 菌种富集及分离纯化 | 第30页 |
| 2.3.2 菌种初筛 | 第30-31页 |
| 2.3.3 菌种复筛 | 第31页 |
| 2.3.4 菌种的分类与鉴定 | 第31-32页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第32-35页 |
| 2.4.1 初筛结果 | 第32-33页 |
| 2.4.2 TLC复筛结果 | 第33页 |
| 2.4.3 产D-塔格糖菌株的分离及鉴定结果 | 第33-35页 |
| 2.5 本章小结 | 第35-36页 |
| 第三章 L-阿拉伯糖异构酶基因在大肠杆菌中的克隆与表达 | 第36-50页 |
| 3.1 引言 | 第36页 |
| 3.2 实验材料 | 第36-38页 |
| 3.2.1 菌株和质粒 | 第36页 |
| 3.2.2 主要酶和试剂 | 第36-37页 |
| 3.2.3 培养基、试剂的配制 | 第37-38页 |
| 3.2.4 仪器设备 | 第38页 |
| 3.3 实验方法 | 第38-45页 |
| 3.3.1 目的基因的提取及鉴定 | 第38-39页 |
| 3.3.2 重组质粒的构建与转化 | 第39-41页 |
| 3.3.3 L-阿拉伯糖异构酶的表达 | 第41-43页 |
| 3.3.4 重组菌的L-阿拉伯糖异构酶活力测定 | 第43-44页 |
| 3.3.5 重组酶的酶学性质测定 | 第44-45页 |
| 3.3.6 D-半乳糖的转化研究 | 第45页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第45-49页 |
| 3.4.1 重组质粒p SE-ara A的构建 | 第45-46页 |
| 3.4.2 短乳杆菌L-AI编码基因的序列分析 | 第46-47页 |
| 3.4.3 表达产物的SDS-PAGE分析 | 第47页 |
| 3.4.4 酶学性质测定 | 第47-49页 |
| 3.4.5 D-半乳糖的转化研究 | 第49页 |
| 3.5 本章小结 | 第49-50页 |
| 第四章 枯草芽孢杆菌芽孢表面展示系统的构建及分析 | 第50-64页 |
| 4.1 引言 | 第50页 |
| 4.2 实验材料 | 第50-52页 |
| 4.2.1 菌株和质粒 | 第50页 |
| 4.2.2 主要酶和试剂 | 第50页 |
| 4.2.3 培养基、试剂的配制 | 第50-52页 |
| 4.2.4 仪器设备 | 第52页 |
| 4.3 实验方法 | 第52-58页 |
| 4.3.1 枯草芽孢杆菌168基因组提取 | 第52-53页 |
| 4.3.2 p HS-cot G-ara A融合质粒构建与验证 | 第53-55页 |
| 4.3.3 重组枯草芽孢杆菌菌株的制备与验证 | 第55-56页 |
| 4.3.4 诱导重组芽孢制备菌悬液 | 第56页 |
| 4.3.5 SDS-PAGE及Western Blot验证蛋白表达 | 第56-57页 |
| 4.3.6 表面展示L-AI酶学性质测定 | 第57页 |
| 4.3.7 D-半乳糖的转化研究 | 第57-58页 |
| 4.3.8 重组芽孢的回收利用 | 第58页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第58-63页 |
| 4.4.1 融合质粒p HS-cot G-ara A的构建与验证 | 第58-59页 |
| 4.4.2 重组芽孢的表达分析 | 第59-60页 |
| 4.4.3 酶学性质测定 | 第60-62页 |
| 4.4.4 D-半乳糖的转化研究 | 第62页 |
| 4.4.5 重组芽孢的回收利用 | 第62-63页 |
| 4.5 本章小结 | 第63-64页 |
| 第五章 全文总结与展望 | 第64-66页 |
| 5.1 主要结论 | 第64页 |
| 5.2 展望 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 在学期间发表的学术论文及其他科研成果 | 第73-74页 |
| 附录 | 第74-75页 |
