中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
常用缩写词中英文对照表 | 第11-13页 |
前言 | 第13-17页 |
第一部分 基于CRISPR/Cas9系统构建精准调控Wnt信号通路的表达载体及其验证效果 | 第17-31页 |
1 材料试剂与主要仪器设备 | 第17-19页 |
1.1 主要实验仪器和设备 | 第17-18页 |
1.2 主要试剂 | 第18-19页 |
2 实验方法 | 第19-21页 |
2.1 sgRNA表达质粒构建 | 第19页 |
2.2 转染 293T细胞 | 第19页 |
2.3 RNA提取 | 第19页 |
2.4 反转录 | 第19-20页 |
2.5 实时定量PCR | 第20页 |
2.6 统计学分析 | 第20-21页 |
3 结果 | 第21-29页 |
3.1 载体克隆 | 第21页 |
3.2 目的基因表达 | 第21-29页 |
4 讨论 | 第29-30页 |
5 结论 | 第30-31页 |
第二部分 基于CRISPR/Cas9的Wnt信号通路调控病毒系统对MSCs分化命运的影响 | 第31-49页 |
1 材料试剂与主要仪器设备 | 第31-34页 |
1.1 实验动物 | 第31页 |
1.2 主要实验仪器和设备 | 第31页 |
1.3 主要试剂及耗材 | 第31页 |
1.4 主要溶液配制 | 第31-34页 |
2 实验方法 | 第34-39页 |
2.1 3T3-L1前体脂肪干细胞的复苏 | 第34页 |
2.2 小鼠BMSCs的分离和体外培养 | 第34页 |
2.3 小鼠ADSCs的分离和体外培养 | 第34-35页 |
2.4 慢病毒包装 | 第35页 |
2.5 慢病毒感染MSCs | 第35-36页 |
2.6 BMSCs的抗生素筛选 | 第36页 |
2.7 实时定量PCR | 第36-37页 |
2.8 Western Blot检测 | 第37-38页 |
2.9 统计学分析 | 第38-39页 |
3 结果 | 第39-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
6 本文小结 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-52页 |
综述 | 第52-62页 |
参考文献 | 第57-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
个人简历 | 第63页 |