| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 甜菜碱与渗透调节研究 | 第11-13页 |
| 1.2 甜菜碱醛脱氢酶与植物抗逆研究 | 第13-15页 |
| 1.3 分子模拟研究进展 | 第15-18页 |
| 1.3.1 蛋白质同源建模软件及原理 | 第15-17页 |
| 1.3.2 分子对接软件 | 第17-18页 |
| 1.3.3 分子动力学 | 第18页 |
| 1.4 分离纯化方法研究进展 | 第18-19页 |
| 1.5 本论文研究目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 干旱胁迫条件下川芎叶片中甘氨酸甜菜碱含量的测定 | 第21-31页 |
| 2.1 材料 | 第21页 |
| 2.2 实验仪器与试剂 | 第21-22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-23页 |
| 2.3.1 川芎干旱胁迫方案 | 第22页 |
| 2.3.2 甘氨酸甜菜碱提取方案 | 第22页 |
| 2.3.3 标准曲线测定方案 | 第22-23页 |
| 2.4 结果与分析 | 第23-30页 |
| 2.4.1 提取工艺的确定 | 第23页 |
| 2.4.2 除杂剂的确定 | 第23-25页 |
| 2.4.3 最适流动相的确定 | 第25-27页 |
| 2.4.4 甘氨酸甜菜碱标准曲线测定结果 | 第27-28页 |
| 2.4.5 样品的含量测定 | 第28-29页 |
| 2.4.6 加样回收率、精密度、稳定性、重复性实验 | 第29-30页 |
| 2.5 讨论 | 第30-31页 |
| 第三章 不同胁迫条件下川芎甜菜碱醛脱氢酶基因表达水平的测定 | 第31-37页 |
| 3.1 实验材料 | 第31页 |
| 3.2 实验试剂和仪器 | 第31-32页 |
| 3.3 实验方法 | 第32-34页 |
| 3.3.1 总RNA的提取 | 第32-33页 |
| 3.3.2 总RNA纯度的计算 | 第33页 |
| 3.3.3 反转录及PCR扩增 | 第33-34页 |
| 3.4 结果与分析 | 第34-35页 |
| 3.4.1 总RNA的纯度及川芎甜菜碱醛脱氢酶基因的表达水平 | 第34-35页 |
| 3.4.2 PCR结果 | 第35页 |
| 3.5 讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 川芎甜菜碱醛脱氢酶基因的克隆、真核表达载体构建及烟草转化 | 第37-47页 |
| 4.1 实验材料 | 第37页 |
| 4.2 实验仪器与试剂 | 第37-38页 |
| 4.3 实验方法 | 第38-42页 |
| 4.3.1 常用培养基的准备 | 第38页 |
| 4.3.2 克隆与测序 | 第38-39页 |
| 4.3.3 表达载体的准备 | 第39-40页 |
| 4.3.4 转化受体的准备 | 第40页 |
| 4.3.5 转化 | 第40页 |
| 4.3.6 烟草基因组DNA提取方法 | 第40-41页 |
| 4.3.7 质粒DNA的提取方法 | 第41页 |
| 4.3.8 转化植株的PCR鉴定 | 第41-42页 |
| 4.4 结果与分析 | 第42-45页 |
| 4.4.1 克隆与测序 | 第42-43页 |
| 4.4.2 转化植株的培育 | 第43-44页 |
| 4.4.3 转基因植株的PCR检测 | 第44-45页 |
| 4.5 讨论 | 第45-47页 |
| 第五章 川芎甜菜碱醛脱氢酶的同源建模与催化特异性研究 | 第47-60页 |
| 5.1 材料与方法 | 第47-50页 |
| 5.1.1 序列比对与同源建模 | 第47-48页 |
| 5.1.2 模型合理性评价 | 第48页 |
| 5.1.3 分子对接 | 第48-49页 |
| 5.1.4 动力学模拟 | 第49-50页 |
| 5.2 结果与分析 | 第50-58页 |
| 5.2.1 同源建模与模型评价 | 第50-52页 |
| 5.2.2 催化特异性分析 | 第52-54页 |
| 5.2.3 分子对接分析 | 第54-57页 |
| 5.2.4 川芎甜菜碱醛脱氢酶的可能催化机制 | 第57-58页 |
| 5.3 讨论 | 第58-60页 |
| 第六章 决明子蛋白营养价值分析及提取工艺研究 | 第60-67页 |
| 6.1 实验材料 | 第60页 |
| 6.2 实验仪器与试剂 | 第60-61页 |
| 6.3 实验方法 | 第61-63页 |
| 6.3.1 决明子蛋白质提取方法 | 第61页 |
| 6.3.2 氨基酸测定方法 | 第61页 |
| 6.3.3 营养价值分析方法 | 第61-62页 |
| 6.3.4 蛋白标准曲线的制作 | 第62页 |
| 6.3.5 蛋白质提取工艺实验设计 | 第62-63页 |
| 6.4 结果与分析 | 第63-65页 |
| 6.4.1 决明子营养价值 | 第63页 |
| 6.4.2 决明子蛋白质提取单因素分析及正交优化方案 | 第63-65页 |
| 6.5 讨论 | 第65-67页 |
| 总结 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-73页 |
| 攻读学位期间发表的论文及参加的科研课题 | 第73页 |
