摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
文献综述 | 第12-34页 |
第一章 卵母细胞质量评价研究进展 | 第12-24页 |
1.1 从形态学上来预测卵母细胞的潜能 | 第12-16页 |
1.1.1 卵丘卵母细胞复合体 | 第12-13页 |
1.1.2 透明带 | 第13页 |
1.1.3 卵周隙 | 第13-14页 |
1.1.4 第一极体的形态 | 第14页 |
1.1.5 卵母细胞的形状 | 第14页 |
1.1.6 卵母细胞胞质外观 | 第14-15页 |
1.1.7 液泡以及胞质内含物 | 第15页 |
1.1.8 减数分裂过程中纺锤体 | 第15-16页 |
1.1.9 辅助生殖临床上的分析方法 | 第16页 |
1.2 卵母细胞质量的分子评价 | 第16-24页 |
1.2.1 基于颗粒细胞的评价方法 | 第16-17页 |
1.2.2 mRNA的检测 | 第17-19页 |
1.2.3 蛋白质的检测 | 第19页 |
1.2.4 卵泡液物质 | 第19-22页 |
1.2.5 基于卵母细胞的评价方法 | 第22-24页 |
第二章 哺乳动物卵母细胞中的DNA损伤应答 | 第24-34页 |
2.1 DNA损伤应答 | 第24-26页 |
2.2 卵母细胞的前期阻滞 | 第26页 |
2.3 减数分裂重组检查点 | 第26-27页 |
2.4 TAp63依赖性信号通路 | 第27-29页 |
2.5 卵子从前期到MI期的转换 | 第29-31页 |
2.6 减数分裂中期的DNA损伤应答机制 | 第31-34页 |
试验研究 | 第34-54页 |
第三章 P21真核表达载体的鉴定和P21对牛卵母细胞成熟的影响 | 第34-41页 |
3.1 材料与方法 | 第34-37页 |
3.1.1 仪器设备 | 第34页 |
3.1.2 材料和试剂 | 第34-35页 |
3.1.3 pVenus-P21真核表达载体的扩增和基因序列鉴定 | 第35页 |
3.1.4 pVenus-P21转染Hela细胞 | 第35页 |
3.1.5 牛卵母细胞的收集 | 第35页 |
3.1.6 牛卵母细胞的体外成熟培养 | 第35-36页 |
3.1.7 体外转录及c RNA显微注射 | 第36页 |
3.1.8 GV期超表达与干扰P21 | 第36-37页 |
3.2 结果与分析 | 第37-40页 |
3.2.1 pVenus-P21真核表达载体的双酶切和PCR鉴定 | 第37页 |
3.2.2 荧光显微镜观察重组质粒pVenus-P21在Hela细胞中的表达与定位 | 第37页 |
3.2.3 体外转录产物分析 | 第37-38页 |
3.2.4 荧光显微镜下观察 | 第38-40页 |
3.3 讨论 | 第40页 |
3.4 小结 | 第40-41页 |
第四章 DNA双链损伤试验 | 第41-54页 |
4.1 材料与方法 | 第41-44页 |
4.1.1 仪器设备 | 第41-42页 |
4.1.2 材料和试剂 | 第42页 |
4.1.3 Hela细胞的DNA双链损伤后的增值活性测定 | 第42页 |
4.1.4 牛卵母细胞上DNA双链损伤免疫荧光鉴定试验 | 第42-43页 |
4.1.5 牛卵母细胞上DNA双链损伤与成熟率的研究及双链损伤修复基因与P21的相关性探究 | 第43页 |
4.1.6 减数第一次分裂期颗粒细胞对卵丘卵母细胞复合体应对DNA双链损伤的作用 | 第43-44页 |
4.1.7 ATM抑制剂对牛卵母细胞成熟率的影响及P21与卵母细胞质量评价基因的联系探究 | 第44页 |
4.2 结果与分析 | 第44-52页 |
4.2.1 Hela细胞的DNA双链损伤后的增值活性测定 | 第44-45页 |
4.2.2 牛卵母细胞上DNA双链损伤免疫荧光鉴定试验 | 第45页 |
4.2.3 牛卵母细胞上DNA双链损伤与成熟率的研究及双链损伤修复基因与P21的相关性探究 | 第45-49页 |
4.2.4 减数第一次分裂期颗粒细胞对卵丘卵母细胞复合体应对DNA双链损伤的作用 | 第49-51页 |
4.2.5 ATM特异性抑制剂对牛卵母细胞成熟率的影响及ATM被抑制的情况下P21与卵母细胞质量评价基因的相关性探索 | 第51-52页 |
4.3 讨论 | 第52-53页 |
4.4 小结 | 第53-54页 |
结论 | 第54-55页 |
创新 点 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简介 | 第64页 |