| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 主要符号表 | 第13-14页 |
| 1 绪论 | 第14-35页 |
| 1.1 黑素瘤发生的分子生物学基础 | 第14-24页 |
| 1.1.1 黑色素细胞与黑素瘤 | 第14-15页 |
| 1.1.2 黑素瘤的遗传学改变与靶向治疗 | 第15-24页 |
| 1.2 TGF-β 通路与肿瘤发生 | 第24-30页 |
| 1.2.1 TGF-β 信号通路 | 第24-27页 |
| 1.2.2 TGF-β 与EMT | 第27-30页 |
| 1.3 泛素蛋白酶体途径和Skp2 | 第30-35页 |
| 1.3.1 泛素-蛋白酶体途径 | 第30-32页 |
| 1.3.2 Skp2与肿瘤的发生 | 第32-35页 |
| 2 TGF-β1 在黑素瘤细胞中促进SKP2的表达并诱导细胞EMT的发生 | 第35-45页 |
| 2.1 实验材料和主要仪器 | 第35页 |
| 2.1.1 试剂和主要仪器 | 第35页 |
| 2.1.2 质粒、抗体、siRNA和细胞系 | 第35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-39页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第35页 |
| 2.2.2 TGF-β1 使用条件 | 第35-36页 |
| 2.2.3 细胞形态变化观察 | 第36页 |
| 2.2.4 实时定量PCR | 第36-37页 |
| 2.2.5 免疫印迹 | 第37-38页 |
| 2.2.6 荧光素酶报告基因 | 第38-39页 |
| 2.2.7 统计分析 | 第39页 |
| 2.3 实验结果 | 第39-44页 |
| 2.4 小结 | 第44-45页 |
| 3 TGF-β1 通过激活Akt信号通路诱导SKP2的表达 | 第45-56页 |
| 3.1 实验材料和主要仪器 | 第45-46页 |
| 3.1.1 试剂和主要仪器 | 第45页 |
| 3.1.2 质粒、抗体、siRNA和细胞系 | 第45-46页 |
| 3.2 实验方法 | 第46-49页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第46页 |
| 3.2.2 TGF-β1 诱导 | 第46页 |
| 3.2.3 细胞形态变化观察 | 第46页 |
| 3.2.4 免疫印迹 | 第46-47页 |
| 3.2.5 实时定量PCR | 第47-49页 |
| 3.2.6 荧光素酶报告基因 | 第49页 |
| 3.2.7 统计分析 | 第49页 |
| 3.3 实验结果 | 第49-54页 |
| 3.4 小结 | 第54-56页 |
| 4 c-Myc与SKP2在黑素瘤细胞中表达的相关性分析 | 第56-63页 |
| 4.1 实验材料和主要仪器 | 第56页 |
| 4.1.1 试剂和主要仪器 | 第56页 |
| 4.1.2 抗体和细胞系 | 第56页 |
| 4.2 实验方法实验方法 | 第56-57页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第56页 |
| 4.2.2 免疫印迹 | 第56-57页 |
| 4.2.3 基因统计分析 | 第57页 |
| 4.3 实验结果 | 第57-62页 |
| 4.4 小结 | 第62-63页 |
| 5 TGF-β1 通过转录因子c-Myc诱导SKP2转录和表达 | 第63-79页 |
| 5.1 实验材料和主要仪器 | 第63页 |
| 5.1.1 试剂和主要仪器 | 第63页 |
| 5.1.2 质粒、抗体、siRNA和细胞系 | 第63页 |
| 5.2 实验方法实验方法 | 第63-67页 |
| 5.2.1 细胞培养 | 第63页 |
| 5.2.2 TGF-β1 处理条件 | 第63-64页 |
| 5.2.3 细胞形态变化观察 | 第64页 |
| 5.2.4 免疫印迹 | 第64-65页 |
| 5.2.5 实时定量PCR | 第65-66页 |
| 5.2.6 荧光素酶报告基因 | 第66页 |
| 5.2.7 染色质免疫共沉淀实验 | 第66-67页 |
| 5.2.8 统计分析 | 第67页 |
| 5.3 实验结果 | 第67-77页 |
| 5.4 小结 | 第77-79页 |
| 6 c-Myc和SKP2在黑素瘤组织中的相关性分析 | 第79-84页 |
| 6.1 实验材料和主要仪器 | 第79页 |
| 6.1.1 试剂和主要仪器 | 第79页 |
| 6.1.2 抗体 | 第79页 |
| 6.1.3 人黑素瘤组织 | 第79页 |
| 6.2 实验方法 | 第79-80页 |
| 6.2.1 免疫组织化学 | 第79页 |
| 6.2.2 结果判定 | 第79-80页 |
| 6.2.3 统计学方法分析 | 第80页 |
| 6.3 实验结果 | 第80-82页 |
| 6.4 小结 | 第82-84页 |
| 7 结论与展望 | 第84-88页 |
| 7.1 结论 | 第84-86页 |
| 7.2 展望 | 第86-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-95页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第95-97页 |
