| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第18-30页 |
| 1.1 丙烯酰胺及聚丙烯酰胺简介 | 第18-21页 |
| 1.1.1 丙烯酰胺生产方法 | 第19-20页 |
| 1.1.2 丙烯酰胺毒性研究 | 第20-21页 |
| 1.2 聚丙烯酰胺凝胶特性的研究 | 第21-22页 |
| 1.3 变性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳简介 | 第22-24页 |
| 1.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳液缓冲体系和凝胶浓度的选择 | 第24-25页 |
| 1.4.1 电泳缓冲液的选择 | 第24页 |
| 1.4.1.1 pH值的选择 | 第24页 |
| 1.4.1.2 离子强度的选择 | 第24页 |
| 1.4.2 凝胶浓度的选择 | 第24-25页 |
| 1.5 影响丙烯酰胺聚合的因素 | 第25-26页 |
| 1.5.1 单体与交联剂的浓度和配比 | 第25页 |
| 1.5.2 引发剂与增速剂的选择与加入量 | 第25-26页 |
| 1.5.3 分子氧 | 第26页 |
| 1.5.4 环境温度 | 第26页 |
| 1.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳后检测方法 | 第26-28页 |
| 1.6.1 银染法 | 第27页 |
| 1.6.2 考马斯亮蓝染色法 | 第27-28页 |
| 1.6.3 荧光染色法 | 第28页 |
| 1.7 本论文的研究目的及意义 | 第28-30页 |
| 第二章 对SDS-PAGE聚合过程的研究 | 第30-38页 |
| 2.1 引言 | 第30页 |
| 2.2 实验材料与设备 | 第30-32页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 2.2.2 实验设备 | 第31-32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-35页 |
| 2.3.1 利用EP管内的微缩反应监测聚合反应体系的温度变化 | 第32-33页 |
| 2.3.2 采用凝胶制备试剂盒制胶并电泳 | 第33-34页 |
| 2.3.2.1 蛋白BSA标准液的配制及变性 | 第33页 |
| 2.3.2.2 配制电泳缓冲液 | 第33页 |
| 2.3.2.3 聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第33-34页 |
| 2.3.2.4 准备电泳槽 | 第34页 |
| 2.3.2.5 电泳 | 第34页 |
| 2.3.3 染色与结果记录 | 第34-35页 |
| 2.4 结果讨论 | 第35-36页 |
| 2.5 本章小结 | 第36-38页 |
| 第三章 N,N-二甲基丙烯酰胺聚合条件的优化 | 第38-48页 |
| 3.1 引言 | 第38页 |
| 3.2 实验材料与设备 | 第38-39页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 3.2.2 实验设备 | 第39页 |
| 3.3 实验方法 | 第39-45页 |
| 3.3.1 TEMED加入量对DMA-Bis聚合反应体系温度变化的影响 | 第39-44页 |
| 3.3.1.1 TEMED加入量对DMA：Bis=29：0.6聚合反应体系温度变化的影响 | 第40-41页 |
| 3.3.1.2 TEMED加入量对DMA：Bis=29：0.8聚合反应体系温度变化的影响 | 第41-42页 |
| 3.3.1.3 TEMED加入量对DMA.Bis=29：1.0聚合反应体系温度变化的影响 | 第42-44页 |
| 3.3.2 N,N-二甲基丙烯酰胺与N,N-甲叉丙烯酰胺的配比对电泳结果的影响 | 第44-45页 |
| 3.4 结果讨论 | 第45-46页 |
| 3.5 本章小结 | 第46-48页 |
| 第四章 N-(2-羟乙基)丙烯酰胺聚合条件的优化 | 第48-58页 |
| 4.1 引言 | 第48页 |
| 4.2 实验材料与设备 | 第48-49页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第48-49页 |
| 4.2.2 实验设备 | 第49页 |
| 4.3 实验方法 | 第49-55页 |
| 4.3.1 TEMED加入量对HEA-Bis聚合反应体系温度变化的影响 | 第49-53页 |
| 4.3.1.1 TEMED加入量对HEA：Bis=29：0.6聚合反应体系温度变化的影响 | 第49-51页 |
| 4.3.1.2 TEMED加入量对HEA：Bis=29：0.8聚合反应体系温度变化的影响 | 第51-52页 |
| 4.3.1.3 TEMED加入量对HEA：Bis=29：1.0聚合反应体系温度变化的影响 | 第52-53页 |
| 4.3.2 N-(2-羟乙基)丙烯酰胺与N,N-甲叉丙烯酰胺的配比对电泳结果的影响 | 第53-55页 |
| 4.4 结果讨论 | 第55页 |
| 4.5 本章小结 | 第55-58页 |
| 第五章 聚丙烯酰胺凝胶与丙烯酰胺替代品所制凝胶在Western Blot技术中的对比试验 | 第58-64页 |
| 5.1 引言 | 第58页 |
| 5.2 实验材料与设备 | 第58-59页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第58-59页 |
| 5.2.2 实验设备 | 第59页 |
| 5.3 实验方法 | 第59-62页 |
| 5.3.1 制胶与电泳过程 | 第59页 |
| 5.3.2 转膜(湿转法) | 第59-60页 |
| 5.3.2.1 配制转膜缓冲液 | 第59-60页 |
| 5.3.2.2 切胶与剪膜 | 第60页 |
| 5.3.2.3 装配转移装置 | 第60页 |
| 5.3.2.4 恒压转膜 | 第60页 |
| 5.3.3 脱脂奶粉封闭 | 第60-61页 |
| 5.3.3.1 配制TBST溶液 | 第60页 |
| 5.3.3.2 配制封闭用脱脂奶粉液 | 第60页 |
| 5.3.3.3 封闭 | 第60-61页 |
| 5.3.4 一抗孵育 | 第61页 |
| 5.3.5 二抗孵育 | 第61页 |
| 5.3.6 蛋白曝光检测 | 第61-62页 |
| 5.3.6.1 显影液与定影液的配制 | 第61页 |
| 5.3.6.2 发光液的配制 | 第61页 |
| 5.3.6.3 曝光检测 | 第61-62页 |
| 5.4 结果讨论 | 第62页 |
| 5.5 本章小结 | 第62-64页 |
| 第六章 利用自动化设备制备梯度电泳凝胶 | 第64-72页 |
| 6.1 引言 | 第64页 |
| 6.2 实验材料与设备 | 第64-65页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第64-65页 |
| 6.2.2 实验设备 | 第65页 |
| 6.3 实验方法 | 第65-70页 |
| 6.3.1 确定凝胶中丙烯酰胺的浓度 | 第65-66页 |
| 6.3.2 确定流速在5mL·min~(-1)每个蠕动泵的转速 | 第66页 |
| 6.3.3 确定每个蠕动泵泵出内容及管路连接方式 | 第66-68页 |
| 6.3.4 确定每个蠕动泵的流速与时间 | 第68页 |
| 6.3.5 确定每个蠕动泵的转速与时间 | 第68-69页 |
| 6.3.6 梯度凝胶与非梯度凝胶分别电泳 | 第69-70页 |
| 6.4 结果讨论 | 第70页 |
| 6.5 本章小结 | 第70-72页 |
| 第七章 结论与展望 | 第72-74页 |
| 7.1 本论文研究结果 | 第72页 |
| 7.2 展望 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第80-82页 |
| 导师与作者简介 | 第82-83页 |
| 附件 | 第83-84页 |
