| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第1章 绪论 | 第9-19页 |
| 1.1 烟曲霉的生物学特性 | 第9页 |
| 1.2 烟曲霉的致病性 | 第9-11页 |
| 1.3 真菌耐药的研究 | 第11-15页 |
| 1.3.1 常见的抗真菌药物 | 第11-13页 |
| 1.3.2 真菌耐药机制的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3.3 烟曲霉中的耐药机制 | 第14-15页 |
| 1.4 Cross-pathway control调控网络研究进展 | 第15-16页 |
| 1.5 G蛋白信号通路的功能研究概况 | 第16-19页 |
| 1.5.1 G蛋白功能概述 | 第16-17页 |
| 1.5.2 烟曲霉Gβ-like CpcB蛋白的功能介绍 | 第17-19页 |
| 第2章 Cross pathway control调控网络蛋白功能研究 | 第19-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 本部分所用的菌株与培养基配方 | 第19-20页 |
| 2.1.2 试剂与仪器 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20页 |
| 2.2.1 点菌实验 | 第20页 |
| 2.3 实验结果 | 第20-24页 |
| 2.3.1 ΔcpcA对氨基酸饥饿的响应 | 第20-21页 |
| 2.3.2 ΔcapB对氨基酸饥饿的响应 | 第21-23页 |
| 2.3.3 ΔcpcC对氨基酸饥饿的响应 | 第23-24页 |
| 2.4 讨论 | 第24-26页 |
| 第3章 WD40蛋白CpcB分子特征研究 | 第26-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第26-28页 |
| 3.1.1 本部分所用的菌株、质粒与培养基配方 | 第26-27页 |
| 3.1.2 试剂与仪器 | 第27-28页 |
| 3.2 实验方法 | 第28-34页 |
| 3.2.1 蛋白质模型的构建 | 第28页 |
| 3.2.2 蛋白质二级结构的展示 | 第28页 |
| 3.2.3 菌株的构建 | 第28-32页 |
| 3.2.3.1 GFP标记的WD repeat缺失菌株的构建 | 第31-32页 |
| 3.2.4 DNA的小量提取 | 第32-33页 |
| 3.2.5 Western blotting | 第33-34页 |
| 3.3 实验结果 | 第34-43页 |
| 3.3.1 CpcB的结构特征研究 | 第34-35页 |
| 3.3.2 CpcB蛋白WD repeats的功能研究 | 第35-39页 |
| 3.3.3 WD repeats中G-H和W-D residues功能的研究 | 第39-43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-45页 |
| 第4章 cpcB突变株药物敏感性研究 | 第45-62页 |
| 4.1 实验材料 | 第45页 |
| 4.1.1 本部分所用的菌株和培养基配方 | 第45页 |
| 4.1.2 试剂与仪器 | 第45页 |
| 4.2 实验方法 | 第45-49页 |
| 4.2.1 抗真菌药物固体培养基的配制和点菌实验 | 第45-46页 |
| 4.2.2 曲霉菌株在液体加药培养基中菌丝生长的显微观察 | 第46页 |
| 4.2.3 曲霉菌株体外抗真菌药物敏感性实验(MIC试验) | 第46-47页 |
| 4.2.4 总麦角固醇的提取 | 第47页 |
| 4.2.5 利用流式细胞仪进行R6G吸收和外排的测定 | 第47-49页 |
| 4.3 实验结果 | 第49-57页 |
| 4.3.1 cpcB突变菌株药物敏感性测试 | 第49-52页 |
| 4.3.2 HPLC分析cpcB突变菌株麦角固醇含量变化 | 第52-55页 |
| 4.3.3 cpcB突变菌株药泵活力变化的测定 | 第55-57页 |
| 4.4 讨论 | 第57-62页 |
| 第5章 cpcB突变株毒力分析研究 | 第62-67页 |
| 5.1 实验材料 | 第62页 |
| 5.1.1 本部分所用的菌株和培养基配方 | 第62页 |
| 5.1.2 试剂与仪器 | 第62页 |
| 5.2 实验方法 | 第62-64页 |
| 5.2.1 曲霉感染实验孢子的收集 | 第62页 |
| 5.2.2 小鼠模型的构建 | 第62-63页 |
| 5.2.3 小鼠切片的病理诊断 | 第63-64页 |
| 5.3 实验结果 | 第64-65页 |
| 5.3.1 免疫小鼠模型测试1 G-H突变株毒力 | 第64页 |
| 5.3.2 肺切片染色观察分析1 G-H突变株毒力下降的原因 | 第64-65页 |
| 5.4 讨论 | 第65-67页 |
| 第6章 全文结论 | 第67-68页 |
| 附录 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 在读期间发表学术论文与研究成果 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
