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基于CRISPR/Cas9敲除小梁细胞Atg7后细胞外基质的改变及Melatonin对睫状体上皮CT流的影响

致谢第5-6页
中文摘要第6-9页
ABSTRACT第9-12页
缩略词表第13-17页
绪论第17-25页
第一部分 利用CRISPR/CAS9对HTM细胞进行ATG7基因敲除第25-52页
    1 引言第25-31页
        1.1 自噬与其调节机制第25-27页
        1.2 CRISPR/Cas9系统第27-31页
    2 材料及方法第31-42页
        2.1 材料第31-34页
        2.2 实验方法第34-42页
    3 实验结果第42-47页
        3.1 重组质粒PCR鉴定结果第42-43页
        3.2 重组质粒测序结果第43-45页
        3.3 转染pmaxGFP的HTM荧光显微镜结果第45-46页
        3.4 Western Blot鉴定Atg7基因敲除结果第46页
        3.5 Western Blot检测自噬标志蛋白第46-47页
    4 讨论第47-51页
        4.1 CRISPR/Cas9系统进行基因编辑的可行性第47-49页
        4.2 CRISPR/Cas9完全敲除HTM中Atg7基因第49-51页
    5 小结第51-52页
第二部分 氧化应激与ATG7基因对小梁细胞株细胞外基质的影响第52-73页
    1 引言第52-54页
        1.1 氧化应激与自噬在青光眼发病中的作用第52-53页
        1.2 细胞外基质在青光眼发病机制中的作用第53-54页
    2 材料及方法第54-57页
        2.1 材料第54-55页
        2.2 实验方法第55-57页
        2.3 统计学处理第57页
    3 实验结果第57-65页
        3.1 MTS法检测H_2O_2对小梁细胞活性的影响第57-58页
        3.2 氧化应激后Western Blot检测细胞外基质及变化第58-60页
        3.3 氧化应激后Western Blot检测相关信号通路的变化第60-64页
        3.4 免疫荧光显微镜下观察LC3染色第64-65页
    4 讨论第65-72页
        4.1 H_2O_2刺激小梁细胞建立氧化损伤模型的可行性第65-67页
        4.2 Atg7~(-/-)HTM细胞外基质的改变第67-68页
        4.3 氧化应激对细胞外基质及自噬相关信号通路的影响第68-72页
    5 小结第72-73页
第三部分 MELATONIN对离体猪眼睫状体上皮中CL~-离子流的影响第73-96页
    1 引言第73-76页
        1.1 房水中的主要离子转运第73-75页
        1.2 cAMP对房水生成的调控第75页
        1.3 Melatonin对眼压的影响第75-76页
    2 材料及方法第76-86页
        2.1 材料第76-79页
        2.2 实验方法第79-86页
        2.3 统计学处理第86页
    3 实验结果第86-90页
        3.1 猪眼睫状体上皮PD基础水平第86页
        3.2 Melatonin及NFA对PD的影响第86-89页
        3.3 Melatonin对猪眼睫状体上皮细胞内cAMP的影响第89-90页
    4 讨论第90-95页
        4.1 猪眼睫状体上皮基础电参数第90-91页
        4.2 Melatonin、NFA及Ouabain对猪眼睫状体上皮电参数的影响第91-93页
        4.3 Melatonin对猪眼睫状体上皮cAMP的影响第93-94页
        4.4 物种间的差异第94-95页
    5 小结第95-96页
参考文献第96-113页
综述第113-127页
    参考文献第121-127页
作者简历及在读期间所取得的科研成果第127-128页

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