致谢 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
缩略词表 | 第13-17页 |
绪论 | 第17-25页 |
第一部分 利用CRISPR/CAS9对HTM细胞进行ATG7基因敲除 | 第25-52页 |
1 引言 | 第25-31页 |
1.1 自噬与其调节机制 | 第25-27页 |
1.2 CRISPR/Cas9系统 | 第27-31页 |
2 材料及方法 | 第31-42页 |
2.1 材料 | 第31-34页 |
2.2 实验方法 | 第34-42页 |
3 实验结果 | 第42-47页 |
3.1 重组质粒PCR鉴定结果 | 第42-43页 |
3.2 重组质粒测序结果 | 第43-45页 |
3.3 转染pmaxGFP的HTM荧光显微镜结果 | 第45-46页 |
3.4 Western Blot鉴定Atg7基因敲除结果 | 第46页 |
3.5 Western Blot检测自噬标志蛋白 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-51页 |
4.1 CRISPR/Cas9系统进行基因编辑的可行性 | 第47-49页 |
4.2 CRISPR/Cas9完全敲除HTM中Atg7基因 | 第49-51页 |
5 小结 | 第51-52页 |
第二部分 氧化应激与ATG7基因对小梁细胞株细胞外基质的影响 | 第52-73页 |
1 引言 | 第52-54页 |
1.1 氧化应激与自噬在青光眼发病中的作用 | 第52-53页 |
1.2 细胞外基质在青光眼发病机制中的作用 | 第53-54页 |
2 材料及方法 | 第54-57页 |
2.1 材料 | 第54-55页 |
2.2 实验方法 | 第55-57页 |
2.3 统计学处理 | 第57页 |
3 实验结果 | 第57-65页 |
3.1 MTS法检测H_2O_2对小梁细胞活性的影响 | 第57-58页 |
3.2 氧化应激后Western Blot检测细胞外基质及变化 | 第58-60页 |
3.3 氧化应激后Western Blot检测相关信号通路的变化 | 第60-64页 |
3.4 免疫荧光显微镜下观察LC3染色 | 第64-65页 |
4 讨论 | 第65-72页 |
4.1 H_2O_2刺激小梁细胞建立氧化损伤模型的可行性 | 第65-67页 |
4.2 Atg7~(-/-)HTM细胞外基质的改变 | 第67-68页 |
4.3 氧化应激对细胞外基质及自噬相关信号通路的影响 | 第68-72页 |
5 小结 | 第72-73页 |
第三部分 MELATONIN对离体猪眼睫状体上皮中CL~-离子流的影响 | 第73-96页 |
1 引言 | 第73-76页 |
1.1 房水中的主要离子转运 | 第73-75页 |
1.2 cAMP对房水生成的调控 | 第75页 |
1.3 Melatonin对眼压的影响 | 第75-76页 |
2 材料及方法 | 第76-86页 |
2.1 材料 | 第76-79页 |
2.2 实验方法 | 第79-86页 |
2.3 统计学处理 | 第86页 |
3 实验结果 | 第86-90页 |
3.1 猪眼睫状体上皮PD基础水平 | 第86页 |
3.2 Melatonin及NFA对PD的影响 | 第86-89页 |
3.3 Melatonin对猪眼睫状体上皮细胞内cAMP的影响 | 第89-90页 |
4 讨论 | 第90-95页 |
4.1 猪眼睫状体上皮基础电参数 | 第90-91页 |
4.2 Melatonin、NFA及Ouabain对猪眼睫状体上皮电参数的影响 | 第91-93页 |
4.3 Melatonin对猪眼睫状体上皮cAMP的影响 | 第93-94页 |
4.4 物种间的差异 | 第94-95页 |
5 小结 | 第95-96页 |
参考文献 | 第96-113页 |
综述 | 第113-127页 |
参考文献 | 第121-127页 |
作者简历及在读期间所取得的科研成果 | 第127-128页 |