中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第一章 绪论 | 第11-43页 |
1.1 引言 | 第11页 |
1.2 荧光和荧光偏振在生物传感分析中的应用 | 第11-16页 |
1.2.1 荧光传感分析 | 第11-14页 |
1.2.2 荧光偏振在生物传感分析中的应用 | 第14-16页 |
1.3 核酸信号放大技术在生物传感中的应用 | 第16-25页 |
1.3.1 基于工具酶的信号放大方法 | 第17-21页 |
1.3.2 无酶信号放大方法 | 第21-25页 |
1.4 石墨烯及类石墨烯二维层状纳米材料在光学生物传感分析中的应用 | 第25-27页 |
1.4.1 石墨烯在光学生物传感中的应用 | 第25-26页 |
1.4.2 类石墨烯二维层状纳米材料在光学生物传感中的应用 | 第26-27页 |
1.5 本论文的立意及主要研究工作 | 第27-28页 |
参考文献 | 第28-43页 |
第二章 基于氧化石墨烯和T7核酸外切酶信号放大技术的DNA甲基转移酶活性检测方法研究 | 第43-58页 |
2.1 引言 | 第43-44页 |
2.2 实验部分 | 第44-45页 |
2.2.1 主要仪器与试剂 | 第44页 |
2.2.2 溶液配制 | 第44-45页 |
2.2.3 Dam甲基转移酶活性测定 | 第45页 |
2.2.4 抑制剂制定 | 第45页 |
2.2.5 凝胶电泳实验 | 第45页 |
2.3 结果与讨论 | 第45-54页 |
2.3.1 方法设计及实验原理 | 第45-46页 |
2.3.2 方法可行性验证 | 第46-47页 |
2.3.3 凝胶电泳表征 | 第47-48页 |
2.3.4 实验条件的优化 | 第48-51页 |
2.3.4.1 氧化石墨烯用量的优化 | 第48页 |
2.3.4.2 HP探针与DP探针摩尔比的优化 | 第48-49页 |
2.3.4.3 DpnI内切酶用量的优化 | 第49-50页 |
2.3.4.4 T7 Exo用量及酶催化循环放大时间的优化 | 第50-51页 |
2.3.5 Dam甲基转移酶活性的定量分析 | 第51-52页 |
2.3.6 特异性考察 | 第52页 |
2.3.7 Dam甲基转移酶活性的抑制试验 | 第52-54页 |
2.3.7.1 药物对T7 Exo活性的影响研究 | 第53页 |
2.3.7.2 药物对Dam甲基转移酶活性抑制作用研究 | 第53-54页 |
2.4 结论 | 第54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
第三章 二硫化钨纳米片和核酸外切酶Ⅲ共辅助信号增强策略用于DNA糖基化酶活性的高灵敏荧光偏振检测 | 第58-80页 |
3.1 引言 | 第58-59页 |
3.2 实验部分 | 第59-61页 |
3.2.1 主要仪器与试剂 | 第59-60页 |
3.2.2 溶液配制 | 第60页 |
3.2.3 糖基化酶活性分析 | 第60页 |
3.2.4 UDG抑制剂测定 | 第60页 |
3.2.5 荧光偏振值的测量 | 第60-61页 |
3.2.6 凝胶电泳分析 | 第61页 |
3.2.7 HeLa细胞裂解液的提取 | 第61页 |
3.3 结果与讨论 | 第61-75页 |
3.3.1 WS_2纳米片的表征 | 第61-63页 |
3.3.2 WS_2纳米片对单链DNA的吸附剂荧光偏振增强研究 | 第63-64页 |
3.3.3 实验原理 | 第64-65页 |
3.3.4 可行性实验 | 第65-67页 |
3.3.5 实验条件的优化 | 第67-69页 |
3.3.5.1 WS_2纳米片浓度优化 | 第67-68页 |
3.3.5.2 Exo Ⅲ用量和酶催化放大时间的优化 | 第68-69页 |
3.3.6 UDG活性检测 | 第69-71页 |
3.3.7 选择性研究 | 第71-72页 |
3.3.8 细胞裂解液分析 | 第72-73页 |
3.3.9 UGI抑制试验 | 第73-74页 |
3.3.10 hOGG1活性检测 | 第74-75页 |
3.4 结论 | 第75页 |
参考文献 | 第75-80页 |
第四章 基于核酸外切酶Ⅰ信号放大免标记荧光法检测尿嘧啶糖基化酶活性 | 第80-93页 |
4.1 引言 | 第80-81页 |
4.2 实验部分 | 第81-82页 |
4.2.1 试剂与仪器 | 第81页 |
4.2.2 溶液配制 | 第81页 |
4.2.3 UDG活性测定 | 第81页 |
4.2.4 凝胶电泳实验 | 第81-82页 |
4.2.5 细胞裂解液的提取 | 第82页 |
4.2.6 UDG抑制试验 | 第82页 |
4.3 结果与讨论 | 第82-89页 |
4.3.1 原理设计 | 第82-83页 |
4.3.2 可行性研究 | 第83-84页 |
4.3.3 实验条件的优化 | 第84-85页 |
4.3.3.1 Exo Ⅰ用量的优化 | 第84-85页 |
4.3.3.2 反应时间的优化 | 第85页 |
4.3.4 UDG活性检测 | 第85-87页 |
4.3.5 特异性分析 | 第87-88页 |
4.3.6 复杂样品中分析 | 第88页 |
4.3.7 抑制剂实验 | 第88-89页 |
4.3.7.1 药物对Exo Ⅰ活性的影响研究 | 第88-89页 |
4.3.7.2 药物对UDG活性的抑制研究 | 第89页 |
4.4 结论 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-93页 |
攻读硕士学位期间已发表的论文 | 第93-94页 |
致谢 | 第94-95页 |