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基于外切酶和纳米材料信号放大技术的核酸修饰酶活性检测新方法研究

中文摘要第3-5页
Abstract第5-7页
第一章 绪论第11-43页
    1.1 引言第11页
    1.2 荧光和荧光偏振在生物传感分析中的应用第11-16页
        1.2.1 荧光传感分析第11-14页
        1.2.2 荧光偏振在生物传感分析中的应用第14-16页
    1.3 核酸信号放大技术在生物传感中的应用第16-25页
        1.3.1 基于工具酶的信号放大方法第17-21页
        1.3.2 无酶信号放大方法第21-25页
    1.4 石墨烯及类石墨烯二维层状纳米材料在光学生物传感分析中的应用第25-27页
        1.4.1 石墨烯在光学生物传感中的应用第25-26页
        1.4.2 类石墨烯二维层状纳米材料在光学生物传感中的应用第26-27页
    1.5 本论文的立意及主要研究工作第27-28页
    参考文献第28-43页
第二章 基于氧化石墨烯和T7核酸外切酶信号放大技术的DNA甲基转移酶活性检测方法研究第43-58页
    2.1 引言第43-44页
    2.2 实验部分第44-45页
        2.2.1 主要仪器与试剂第44页
        2.2.2 溶液配制第44-45页
        2.2.3 Dam甲基转移酶活性测定第45页
        2.2.4 抑制剂制定第45页
        2.2.5 凝胶电泳实验第45页
    2.3 结果与讨论第45-54页
        2.3.1 方法设计及实验原理第45-46页
        2.3.2 方法可行性验证第46-47页
        2.3.3 凝胶电泳表征第47-48页
        2.3.4 实验条件的优化第48-51页
            2.3.4.1 氧化石墨烯用量的优化第48页
            2.3.4.2 HP探针与DP探针摩尔比的优化第48-49页
            2.3.4.3 DpnI内切酶用量的优化第49-50页
            2.3.4.4 T7 Exo用量及酶催化循环放大时间的优化第50-51页
        2.3.5 Dam甲基转移酶活性的定量分析第51-52页
        2.3.6 特异性考察第52页
        2.3.7 Dam甲基转移酶活性的抑制试验第52-54页
            2.3.7.1 药物对T7 Exo活性的影响研究第53页
            2.3.7.2 药物对Dam甲基转移酶活性抑制作用研究第53-54页
    2.4 结论第54页
    参考文献第54-58页
第三章 二硫化钨纳米片和核酸外切酶Ⅲ共辅助信号增强策略用于DNA糖基化酶活性的高灵敏荧光偏振检测第58-80页
    3.1 引言第58-59页
    3.2 实验部分第59-61页
        3.2.1 主要仪器与试剂第59-60页
        3.2.2 溶液配制第60页
        3.2.3 糖基化酶活性分析第60页
        3.2.4 UDG抑制剂测定第60页
        3.2.5 荧光偏振值的测量第60-61页
        3.2.6 凝胶电泳分析第61页
        3.2.7 HeLa细胞裂解液的提取第61页
    3.3 结果与讨论第61-75页
        3.3.1 WS_2纳米片的表征第61-63页
        3.3.2 WS_2纳米片对单链DNA的吸附剂荧光偏振增强研究第63-64页
        3.3.3 实验原理第64-65页
        3.3.4 可行性实验第65-67页
        3.3.5 实验条件的优化第67-69页
            3.3.5.1 WS_2纳米片浓度优化第67-68页
            3.3.5.2 Exo Ⅲ用量和酶催化放大时间的优化第68-69页
        3.3.6 UDG活性检测第69-71页
        3.3.7 选择性研究第71-72页
        3.3.8 细胞裂解液分析第72-73页
        3.3.9 UGI抑制试验第73-74页
        3.3.10 hOGG1活性检测第74-75页
    3.4 结论第75页
    参考文献第75-80页
第四章 基于核酸外切酶Ⅰ信号放大免标记荧光法检测尿嘧啶糖基化酶活性第80-93页
    4.1 引言第80-81页
    4.2 实验部分第81-82页
        4.2.1 试剂与仪器第81页
        4.2.2 溶液配制第81页
        4.2.3 UDG活性测定第81页
        4.2.4 凝胶电泳实验第81-82页
        4.2.5 细胞裂解液的提取第82页
        4.2.6 UDG抑制试验第82页
    4.3 结果与讨论第82-89页
        4.3.1 原理设计第82-83页
        4.3.2 可行性研究第83-84页
        4.3.3 实验条件的优化第84-85页
            4.3.3.1 Exo Ⅰ用量的优化第84-85页
            4.3.3.2 反应时间的优化第85页
        4.3.4 UDG活性检测第85-87页
        4.3.5 特异性分析第87-88页
        4.3.6 复杂样品中分析第88页
        4.3.7 抑制剂实验第88-89页
            4.3.7.1 药物对Exo Ⅰ活性的影响研究第88-89页
            4.3.7.2 药物对UDG活性的抑制研究第89页
    4.4 结论第89-90页
    参考文献第90-93页
攻读硕士学位期间已发表的论文第93-94页
致谢第94-95页

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