| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词 | 第11-17页 |
| 第一章 前言 | 第17-34页 |
| 1. NEK2激酶的研究介绍 | 第17-26页 |
| 1.1 NEK2激酶的结构及表达特点 | 第18页 |
| 1.2 NEK2的生物学功能 | 第18-20页 |
| 1.3 NEK2与肿瘤 | 第20-22页 |
| 1.3.1 NEK2过表达诱导肿瘤的发生 | 第20页 |
| 1.3.2 NEK2与耐药相关 | 第20-21页 |
| 1.3.3 NEK2与肿瘤进程和不良预后相关 | 第21-22页 |
| 1.4 NEK2相关信号通路 | 第22-24页 |
| 1.4.1 NEK2的主要上游调控因子 | 第22-23页 |
| 1.4.2 NEK2的主要下游效应分子 | 第23-24页 |
| 1.5 靶向NEK2的治疗 | 第24-26页 |
| 1.5.1 RNA干扰 | 第24-25页 |
| 1.5.2 阻断ATP结合位点 | 第25页 |
| 1.5.3 干扰蛋白-蛋白相互作用 | 第25-26页 |
| 2. KDM5B的研究介绍 | 第26-31页 |
| 2.1 KDM5B的结构 | 第27页 |
| 2.2 KDM5B与H3K4me3的联系及其生物学功能 | 第27-28页 |
| 2.3 KDM5B与人类肿瘤之间的联系 | 第28-30页 |
| 2.4 靶向KDM5B的肿瘤治疗 | 第30-31页 |
| 3. 研究目的 | 第31页 |
| 4. 研究内容 | 第31-34页 |
| 第二章 新型NEK2抑制剂MBM-17和MBM-55的体外抗肿瘤活性研究 | 第34-55页 |
| 1. 实验材料 | 第34-38页 |
| 1.1 实验试剂 | 第34-36页 |
| 1.2 实验耗材 | 第36页 |
| 1.3 实验仪器 | 第36-38页 |
| 1.4 化合物 | 第38页 |
| 2. 实验方法 | 第38-43页 |
| 2.1 Mobility shift法检测酶谱选择性 | 第38页 |
| 2.2 细胞培养 | 第38-39页 |
| 2.3 体外细胞生长活性检测 | 第39-40页 |
| 2.4 免疫印迹法(Western Blot) | 第40-41页 |
| 2.5 细胞周期检测 | 第41-42页 |
| 2.6 细胞凋亡检测 | 第42页 |
| 2.7 数据处理 | 第42-43页 |
| 3. 实验结果 | 第43-52页 |
| 3.1 MBM-17和MBM-55对NEK2激酶活性的抑制活性及酶谱选择性_ | 第43-44页 |
| 3.2 MBM-17和MBM-55对多种肿瘤细胞株均有较好的增殖抑制作用 | 第44-45页 |
| 3.3 MBM-17和MBM-55能够使细胞内的NEK2蛋白降低 | 第45-46页 |
| 3.4 MBM-17和MBM-55能够将细胞阻滞在G2/M期 | 第46-48页 |
| 3.5 MBM-17和MBM-55具有诱导细胞凋亡的作用 | 第48-52页 |
| 4. 讨论 | 第52-55页 |
| 第三章 新型NEK2抑制剂MBM-17和MBM-55的体内抗肿瘤活性研究 | 第55-67页 |
| 1. 实验材料 | 第55-56页 |
| 1.1 实验试剂 | 第55页 |
| 1.2 实验耗材 | 第55页 |
| 1.3 实验仪器 | 第55-56页 |
| 1.4 化合物 | 第56页 |
| 1.5 实验动物 | 第56页 |
| 2. 实验方法 | 第56-58页 |
| 2.1 MBM-17和MBM-55体内药代学实验 | 第56页 |
| 2.2 体内抗肿瘤活性研究 | 第56-58页 |
| 2.2.1 小鼠肿瘤细胞皮下接种 | 第56-57页 |
| 2.2.2 小鼠分组及给药 | 第57页 |
| 2.2.3 监测指标 | 第57-58页 |
| 2.3 数据处理 | 第58页 |
| 3. 实验结果 | 第58-65页 |
| 3.1 MBM-17S和MBM-55S的体内药物代谢动力学研究 | 第58-59页 |
| 3.2 MBM-17S和MBM-55S在HCT-116结肠癌异种移植瘤上的抗肿瘤活性 | 第59-63页 |
| 3.3 MBM-17S和MBM-55S对HCT-116异种移植瘤模型的毒性探究 | 第63-65页 |
| 4. 讨论 | 第65-67页 |
| 第四章 NEK2激酶调节KDM5B/H3K4me3的分子作用机制研究 | 第67-76页 |
| 1. 实验材料 | 第67-68页 |
| 1.1 实验试剂 | 第67-68页 |
| 1.2 实验耗材 | 第68页 |
| 1.3 实验仪器 | 第68页 |
| 2. 实验方法 | 第68-70页 |
| 2.1 免疫印迹法(Western Blot) | 第68页 |
| 2.2 转染 | 第68-69页 |
| 2.3 q-PCR(实时荧光定量PCR)实验 | 第69-70页 |
| 3. 实验结果 | 第70-74页 |
| 3.1 MBM-17和MBM-55使H3K4me3蛋白表达升高KDM5B蛋白表达降低 | 第70-71页 |
| 3.2 MDA-MB-468细胞高表达NEK2和KDM5B | 第71-72页 |
| 3.3 NEK2沉默后使KDM5B蛋白表达降低 | 第72-73页 |
| 3.4 NEK2沉默后不改变KDM5B的mRNA水平 | 第73-74页 |
| 4. 讨论 | 第74-76页 |
| 第五章 总结 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
| 附录 | 第82-85页 |
| 攻读硕士学位期间所发表文章 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
