| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-36页 |
| 第一章 对虾的两种病毒的研究进展 | 第12-28页 |
| 1 简介 | 第12-15页 |
| 1.1 背景与分布 | 第12-13页 |
| 1.2 宿主与传播途径 | 第13-14页 |
| 1.3 临床症状 | 第14-15页 |
| 2 分子生物学特征 | 第15-18页 |
| 2.1 结构特征 | 第15-17页 |
| 2.2 基因组结构 | 第17页 |
| 2.3 基因多样性 | 第17-18页 |
| 3 诊断方法 | 第18-21页 |
| 3.1 组织病理学方法 | 第18-19页 |
| 3.2 分子生物学方法 | 第19-21页 |
| 3.3 免疫学方法 | 第21页 |
| 4 小结 | 第21-23页 |
| 参考文献 | 第23-28页 |
| 第二章 酶联免疫吸附试验的研究进展 | 第28-36页 |
| 1 基本原理 | 第28页 |
| 2 分类 | 第28-31页 |
| 2.1 直接ELISA法 | 第29-30页 |
| 2.2 间接ELISA法 | 第30页 |
| 2.3 夹心ELISA法 | 第30-31页 |
| 2.4 竞争ELISA法 | 第31页 |
| 3 应用 | 第31-32页 |
| 4 小结 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-36页 |
| 第二篇 试验研究 | 第36-88页 |
| 第一章 对虾病毒性疾病的流行病学调查及生物信息学分析 | 第36-54页 |
| 1 材料 | 第37-38页 |
| 1.1 实验样品 | 第37页 |
| 1.2 主要试剂 | 第37页 |
| 1.3 主要仪器 | 第37-38页 |
| 1.4 引物设计与合成 | 第38页 |
| 2 方法 | 第38-42页 |
| 2.1 样品处理 | 第38-39页 |
| 2.2 病毒基因组的提取 | 第39页 |
| 2.3 病毒基因序列的扩增 | 第39页 |
| 2.4 目的片段的回收 | 第39-41页 |
| 2.5 回收产物的连接 | 第41页 |
| 2.6 连接产物的转化 | 第41-42页 |
| 2.7 基因序列的生物信息学分析 | 第42页 |
| 3 结果 | 第42-49页 |
| 3.1 对虾采样情况统计 | 第42-43页 |
| 3.2 病毒基因序列扩增结果 | 第43-46页 |
| 3.3 WSSV ORF14/15基因序列分析 | 第46-47页 |
| 3.4 IHHNV ORF3生物信息学分析 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 第二章 PET32a-ORF3重组载体的构建与诱导蛋白的表达 | 第54-66页 |
| 1 材料 | 第54-55页 |
| 1.1 菌株 | 第54-55页 |
| 1.2 主要试剂 | 第55页 |
| 1.3 主要仪器 | 第55页 |
| 2 方法 | 第55-59页 |
| 2.1 质粒DNA的提取 | 第55-56页 |
| 2.2 质粒DNA双酶切 | 第56页 |
| 2.3 回收产物的连接 | 第56页 |
| 2.4 酶连产物的转化 | 第56-57页 |
| 2.5 重组质粒pET32a-ORF3的双酶切鉴定 | 第57页 |
| 2.6 重组质粒pET32a-ORF3诱导表达条件的优化 | 第57-58页 |
| 2.7 SDS-PAGE鉴定 | 第58页 |
| 2.8 pET32a-ORF3融合蛋白的大量诱导表达 | 第58-59页 |
| 2.9 上清的纯化 | 第59页 |
| 3 结果 | 第59-62页 |
| 3.1 重组质粒pET32a-ORF3的双酶切鉴定 | 第59-60页 |
| 3.2 重组质粒pET32a-ORF3的诱导表达 | 第60-62页 |
| 3.3 融合蛋白的鉴定 | 第62页 |
| 4 讨论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-66页 |
| 第三章 多克隆抗体的制备与纯化 | 第66-78页 |
| 1 材料 | 第66-67页 |
| 1.1 菌株 | 第66-67页 |
| 1.2 实验动物 | 第67页 |
| 1.3 主要试剂 | 第67页 |
| 1.4 主要仪器 | 第67页 |
| 2 方法 | 第67-70页 |
| 2.1 实验动物的免疫接种 | 第67-68页 |
| 2.2 采血及分离血清 | 第68页 |
| 2.3 多克隆抗体效价的测定 | 第68-69页 |
| 2.4 多克隆抗体的纯化 | 第69页 |
| 2.5 Western blot鉴定 | 第69-70页 |
| 3 结果 | 第70-75页 |
| 3.1 多克隆抗体效价的测定 | 第70-74页 |
| 3.2 纯化多克隆抗体的SDS-PAGE分析 | 第74页 |
| 3.3 多克隆抗体的Western blot分析 | 第74-75页 |
| 4 讨论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-78页 |
| 第四章 双抗夹心ELISA检测方法的初步研究 | 第78-88页 |
| 1 材料 | 第78-79页 |
| 1.1 主要试剂 | 第78-79页 |
| 1.2 主要仪器 | 第79页 |
| 2 方法 | 第79-80页 |
| 2.1 捕捉抗体和检测抗体的选择 | 第79-80页 |
| 2.2 包被条件的优化 | 第80页 |
| 2.3 封闭条件的优化 | 第80页 |
| 2.4 抗原作用时间的优化 | 第80页 |
| 2.5 捕捉抗体作用时间的优化 | 第80页 |
| 3 结果 | 第80-84页 |
| 3.1 捕捉抗体和检测抗体的选择 | 第80-81页 |
| 3.2 包被条件的优化 | 第81-82页 |
| 3.3 封闭条件的优化 | 第82-83页 |
| 3.4 抗原作用时间的优化 | 第83页 |
| 3.5 捕捉抗体作用时间的优化 | 第83-84页 |
| 4 讨论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-88页 |
| 全文总结 | 第88-90页 |
| 附录 实验所需试剂配方 | 第90-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
