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初步优选三棱莪术抑制HaCaT细胞增殖最佳成分剂量组合及其机理研究

中文摘要第3-6页
ABSTRACT第6-9页
缩略词表第15-17页
前言第17-21页
文献研究第21-45页
    1 三棱的研究概况第21-25页
        1.1 三棱的本草学认识第21页
        1.2 三棱的功效与临床运用第21页
        1.3 三棱的化学成分研究第21-23页
        1.4 三棱的药理作用研究第23-25页
    2 莪术的研究概况第25-32页
        2.1 莪术的本草学认识第25-26页
        2.2 義术及其某些成分的临床运用第26-27页
        2.3 莪术的化学成分研究第27-28页
        2.4 莪术的药理作用研究第28-32页
    3 莪术三棱药对的研究进展第32-39页
        3.1 莪术三棱药对的临床运用第32-35页
        3.2 莪术三棱药对的现代药理研究第35-39页
    4 银屑病的体外细胞实验研究第39-43页
    5 本课题的研究内容和技术路线第43-45页
实验研究第45-83页
    第一部分 优选莪术和三棱抑制HaCaT细胞增殖的有效成分第45-58页
        1 材料与方法第45-51页
            1.1 实验材料和试剂第45-46页
            1.2 主要实验设备第46-47页
            1.3 实验方法第47-51页
                1.3.1 溶液的配制和贮存第47页
                1.3.2 HaCaT细胞的培养及传代第47页
                1.3.3 细胞冻存第47-48页
                1.3.4 细胞复苏第48页
                1.3.5 HaCaT细胞的计数第48-49页
                1.3.6 显微镜观察细胞形态第49页
                1.3.7 MTT法检测IFN-γ对HaCaT细胞增殖的影响第49页
                1.3.8 MTT法检测莪术中莪术油、异龙脑、吉马酮、姜黄素、龙脑、β-胡萝卜素、莪术二酮、莪术醇等有效成分对HaCaT细胞增殖的影响第49-50页
                1.3.9 MTT法检测三棱中琥珀酸、芦丁、香草醛、芒柄花素、亚油酸、山柰素、香草酸、棕榈酸等有效成分对HaCaT细胞增殖的影响第50页
                1.3.10 数据处理和统计分析第50-51页
        2 实验结果第51-57页
            2.1 MTT法检测结果第51-57页
                2.1.1 不同浓度IFN-γ作用24h、48h和72h下HaCaT细胞的增殖情况第51页
                2.1.2 在不同浓度不同时间莪术成分作用下的HaCaT细胞增殖情况第51-54页
                2.1.3 在不同浓度不同时间三棱成分作用下的HaCaT细胞增殖情况第54-57页
        3 结果第57页
        4 结论第57-58页
    第二部分 正交实验优选莪术三棱有效成分组合抑制HaCaT细胞增殖的最佳成分配伍组合第58-64页
        1 材料与方法第58-61页
            1.1 实验材料和试剂第58-59页
            1.2 主要实验设备第59页
            1.3 实验方法第59-61页
                1.3.1 正交实验设计第60页
                1.3.2 MTT法检测各组对HaCaT细胞增殖的影响第60-61页
        2 实验结果第61-62页
        3 结论第62页
        4 验证实验第62-64页
    第三部分 莪术三棱最佳成分组合抑制HaCaT细胞增殖的机理研究第64-83页
        实验一 ELISA检测HaCaT细胞分泌IL-2和TLR-2的含量第64-71页
            1 材料与方法第64-68页
                1.1 实验材料和试剂第64-65页
                1.2 主要仪器设备第65-66页
                1.3 实验方法第66-68页
                    1.3.1 细胞培养上清收集第66页
                    1.3.2 ELISA测定第66-67页
                    1.3.3 统计学处理第67-68页
            2 实验结果第68-71页
            3 结论第71页
        实验二 蛋白印迹实验检测HaCaT细胞hedghog信号通道蛋白PTCH1的表达第71-83页
            1 材料与方法第71-80页
                1.1 实验材料和试剂第72页
                1.2 主要实验设备第72-73页
                1.3 主要溶液的配制第73-75页
                1.4 实验方法第75-80页
            2 实验结果第80-82页
                2.1 内参蛋白GAPDH的光密度值第80-81页
                2.2 目的蛋白PHCT1的光密度值第81-82页
            3 结论第82-83页
讨论第83-103页
    1 西医对银屑病的认识第83页
    2 中医对银屑病的认识第83-88页
        2.1 古代医家对银屑病的认识第83-84页
        2.2 现代医家对银屑病病因病机的认识第84-87页
        2.3 中药三棱和莪术配伍治疗银屑病的病机分析第87-88页
    3 实验受试成分的选择及配制第88-89页
        3.1 莪术和三棱成分的选择第88页
        3.2 实验受试成分溶液的配制第88-89页
    4 实验观察指标选择的依据第89-93页
        4.1 IFN-γ的选择及浓度的确定第89-90页
        4.2 IL-2指标的选择第90-91页
        4.3 TLR-2指标的选择第91-92页
        4.4 hedghog信号通道蛋白PTCH1的选择第92-93页
    5 三棱莪术抑制HaCaT细胞增殖的最佳有效成分组合的优选第93-98页
        5.1 MTT实验对筛选三棱莪术中有效成分的影响第93-96页
            5.1.1 HaCaT细胞作为抗银屑病研究模型的选择第93-94页
            5.1.2 MTT比色法测定HaCaT细胞增殖的原理第94-95页
            5.1.3 MTT实验筛选莪术三棱抑制HaCaT细胞增殖的有效成分实验结果分析第95-96页
        5.2 正交实验优选莪术三棱最佳成分和剂量配伍的影响第96-98页
            5.2.1 正交实验的选择第96-97页
            5.2.2 正交实验结果分析第97-98页
    6 莪术三棱最佳有效成分组合抑制HaCaT细胞增殖的机制初探第98-103页
        6.1 莪术三棱药对最佳成分组合对HaCaT细胞分泌IL-2和TLR-2的影响第98-100页
            6.1.1 ELISA酶联免疫吸附实验原理第98-99页
            6.1.2 ELISA酶联免疫吸附实验检测IL-2和TLR-2的结果分析第99-100页
        6.2 莪术三棱药对最佳成分组合对HaCaT细胞hedghog信号通道蛋白PTCHI表达的影响第100-103页
            6.2.1 蛋白免疫印迹法(Western Blot)原理第100页
            6.2.2 蛋白免疫印迹法实验结果分析第100-103页
结论第103-105页
特色与创新第105-106页
问题与展望第106-107页
参考文献第107-122页
附图第122-127页
附录1:综述 三棱義术药对的研究进展第127-137页
    参考文献第134-137页
附件2:在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果第137-138页

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