中文摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
缩略词表 | 第15-17页 |
前言 | 第17-21页 |
文献研究 | 第21-45页 |
1 三棱的研究概况 | 第21-25页 |
1.1 三棱的本草学认识 | 第21页 |
1.2 三棱的功效与临床运用 | 第21页 |
1.3 三棱的化学成分研究 | 第21-23页 |
1.4 三棱的药理作用研究 | 第23-25页 |
2 莪术的研究概况 | 第25-32页 |
2.1 莪术的本草学认识 | 第25-26页 |
2.2 義术及其某些成分的临床运用 | 第26-27页 |
2.3 莪术的化学成分研究 | 第27-28页 |
2.4 莪术的药理作用研究 | 第28-32页 |
3 莪术三棱药对的研究进展 | 第32-39页 |
3.1 莪术三棱药对的临床运用 | 第32-35页 |
3.2 莪术三棱药对的现代药理研究 | 第35-39页 |
4 银屑病的体外细胞实验研究 | 第39-43页 |
5 本课题的研究内容和技术路线 | 第43-45页 |
实验研究 | 第45-83页 |
第一部分 优选莪术和三棱抑制HaCaT细胞增殖的有效成分 | 第45-58页 |
1 材料与方法 | 第45-51页 |
1.1 实验材料和试剂 | 第45-46页 |
1.2 主要实验设备 | 第46-47页 |
1.3 实验方法 | 第47-51页 |
1.3.1 溶液的配制和贮存 | 第47页 |
1.3.2 HaCaT细胞的培养及传代 | 第47页 |
1.3.3 细胞冻存 | 第47-48页 |
1.3.4 细胞复苏 | 第48页 |
1.3.5 HaCaT细胞的计数 | 第48-49页 |
1.3.6 显微镜观察细胞形态 | 第49页 |
1.3.7 MTT法检测IFN-γ对HaCaT细胞增殖的影响 | 第49页 |
1.3.8 MTT法检测莪术中莪术油、异龙脑、吉马酮、姜黄素、龙脑、β-胡萝卜素、莪术二酮、莪术醇等有效成分对HaCaT细胞增殖的影响 | 第49-50页 |
1.3.9 MTT法检测三棱中琥珀酸、芦丁、香草醛、芒柄花素、亚油酸、山柰素、香草酸、棕榈酸等有效成分对HaCaT细胞增殖的影响 | 第50页 |
1.3.10 数据处理和统计分析 | 第50-51页 |
2 实验结果 | 第51-57页 |
2.1 MTT法检测结果 | 第51-57页 |
2.1.1 不同浓度IFN-γ作用24h、48h和72h下HaCaT细胞的增殖情况 | 第51页 |
2.1.2 在不同浓度不同时间莪术成分作用下的HaCaT细胞增殖情况 | 第51-54页 |
2.1.3 在不同浓度不同时间三棱成分作用下的HaCaT细胞增殖情况 | 第54-57页 |
3 结果 | 第57页 |
4 结论 | 第57-58页 |
第二部分 正交实验优选莪术三棱有效成分组合抑制HaCaT细胞增殖的最佳成分配伍组合 | 第58-64页 |
1 材料与方法 | 第58-61页 |
1.1 实验材料和试剂 | 第58-59页 |
1.2 主要实验设备 | 第59页 |
1.3 实验方法 | 第59-61页 |
1.3.1 正交实验设计 | 第60页 |
1.3.2 MTT法检测各组对HaCaT细胞增殖的影响 | 第60-61页 |
2 实验结果 | 第61-62页 |
3 结论 | 第62页 |
4 验证实验 | 第62-64页 |
第三部分 莪术三棱最佳成分组合抑制HaCaT细胞增殖的机理研究 | 第64-83页 |
实验一 ELISA检测HaCaT细胞分泌IL-2和TLR-2的含量 | 第64-71页 |
1 材料与方法 | 第64-68页 |
1.1 实验材料和试剂 | 第64-65页 |
1.2 主要仪器设备 | 第65-66页 |
1.3 实验方法 | 第66-68页 |
1.3.1 细胞培养上清收集 | 第66页 |
1.3.2 ELISA测定 | 第66-67页 |
1.3.3 统计学处理 | 第67-68页 |
2 实验结果 | 第68-71页 |
3 结论 | 第71页 |
实验二 蛋白印迹实验检测HaCaT细胞hedghog信号通道蛋白PTCH1的表达 | 第71-83页 |
1 材料与方法 | 第71-80页 |
1.1 实验材料和试剂 | 第72页 |
1.2 主要实验设备 | 第72-73页 |
1.3 主要溶液的配制 | 第73-75页 |
1.4 实验方法 | 第75-80页 |
2 实验结果 | 第80-82页 |
2.1 内参蛋白GAPDH的光密度值 | 第80-81页 |
2.2 目的蛋白PHCT1的光密度值 | 第81-82页 |
3 结论 | 第82-83页 |
讨论 | 第83-103页 |
1 西医对银屑病的认识 | 第83页 |
2 中医对银屑病的认识 | 第83-88页 |
2.1 古代医家对银屑病的认识 | 第83-84页 |
2.2 现代医家对银屑病病因病机的认识 | 第84-87页 |
2.3 中药三棱和莪术配伍治疗银屑病的病机分析 | 第87-88页 |
3 实验受试成分的选择及配制 | 第88-89页 |
3.1 莪术和三棱成分的选择 | 第88页 |
3.2 实验受试成分溶液的配制 | 第88-89页 |
4 实验观察指标选择的依据 | 第89-93页 |
4.1 IFN-γ的选择及浓度的确定 | 第89-90页 |
4.2 IL-2指标的选择 | 第90-91页 |
4.3 TLR-2指标的选择 | 第91-92页 |
4.4 hedghog信号通道蛋白PTCH1的选择 | 第92-93页 |
5 三棱莪术抑制HaCaT细胞增殖的最佳有效成分组合的优选 | 第93-98页 |
5.1 MTT实验对筛选三棱莪术中有效成分的影响 | 第93-96页 |
5.1.1 HaCaT细胞作为抗银屑病研究模型的选择 | 第93-94页 |
5.1.2 MTT比色法测定HaCaT细胞增殖的原理 | 第94-95页 |
5.1.3 MTT实验筛选莪术三棱抑制HaCaT细胞增殖的有效成分实验结果分析 | 第95-96页 |
5.2 正交实验优选莪术三棱最佳成分和剂量配伍的影响 | 第96-98页 |
5.2.1 正交实验的选择 | 第96-97页 |
5.2.2 正交实验结果分析 | 第97-98页 |
6 莪术三棱最佳有效成分组合抑制HaCaT细胞增殖的机制初探 | 第98-103页 |
6.1 莪术三棱药对最佳成分组合对HaCaT细胞分泌IL-2和TLR-2的影响 | 第98-100页 |
6.1.1 ELISA酶联免疫吸附实验原理 | 第98-99页 |
6.1.2 ELISA酶联免疫吸附实验检测IL-2和TLR-2的结果分析 | 第99-100页 |
6.2 莪术三棱药对最佳成分组合对HaCaT细胞hedghog信号通道蛋白PTCHI表达的影响 | 第100-103页 |
6.2.1 蛋白免疫印迹法(Western Blot)原理 | 第100页 |
6.2.2 蛋白免疫印迹法实验结果分析 | 第100-103页 |
结论 | 第103-105页 |
特色与创新 | 第105-106页 |
问题与展望 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-122页 |
附图 | 第122-127页 |
附录1:综述 三棱義术药对的研究进展 | 第127-137页 |
参考文献 | 第134-137页 |
附件2:在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果 | 第137-138页 |