| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-23页 |
| 1.1 磷脂酶的简介 | 第12-15页 |
| 1.1.1 磷脂酶D的反应机理 | 第12-13页 |
| 1.1.2 磷脂酶D的分布和结构 | 第13-14页 |
| 1.1.3 磷脂酶D活力检测方法 | 第14页 |
| 1.1.4 磷脂酶D催化反应的影响因素 | 第14-15页 |
| 1.1.5 磷脂酶D在食品、医药工业中的应用 | 第15页 |
| 1.2 链霉菌的选育方法 | 第15-21页 |
| 1.2.1 物理因素诱变育种 | 第15-17页 |
| 1.2.2 化学因素诱变育种 | 第17页 |
| 1.2.3 复合诱变育种 | 第17页 |
| 1.2.4 原生质体融合育种 | 第17-21页 |
| 1.3 本课题研究的内容和意义 | 第21-23页 |
| 1.3.1 本课题的研究意义及可行性 | 第21-22页 |
| 1.3.2 本课题的主要研究内容 | 第22-23页 |
| 第二章 链霉菌原生质体的制备和再生 | 第23-38页 |
| 2.1 前言 | 第23页 |
| 2.2 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.2.1 试验菌株 | 第23页 |
| 2.2.2 培养基及溶液 | 第23-24页 |
| 2.2.3 主要药品及试剂 | 第24-25页 |
| 2.2.4 主要仪器及设备 | 第25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-26页 |
| 2.3.1 链霉菌LD0501的活化 | 第25页 |
| 2.3.2 链霉菌LD0501生长规律的测定 | 第25页 |
| 2.3.3 原生质体的制备与再生 | 第25-26页 |
| 2.3.4 原生质体的计数方法 | 第26页 |
| 2.3.5 原生质体的稳定性考察 | 第26页 |
| 2.4 实验结果 | 第26-37页 |
| 2.4.1 链霉菌生长规律的测定 | 第26-27页 |
| 2.4.2 链霉菌原生质体形成条件的优化 | 第27-36页 |
| 2.4.3 原生质体的保存稳定性 | 第36-37页 |
| 2.5 本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 原生质体紫外诱变选育磷脂酶D高产菌株 | 第38-50页 |
| 3.1 前言 | 第38页 |
| 3.2 实验材料 | 第38-39页 |
| 3.2.1 试验菌株 | 第38页 |
| 3.2.2 培养基及溶液 | 第38页 |
| 3.2.3 主要药品及试剂 | 第38-39页 |
| 3.2.4 主要仪器及设备 | 第39页 |
| 3.3 实验方法 | 第39-41页 |
| 3.3.1 单孢子及原生质体的紫外诱变选育 | 第39页 |
| 3.3.2 摇瓶筛选 | 第39页 |
| 3.3.3 酶活力测定方法 | 第39-40页 |
| 3.3.4 生长速度的测定 | 第40页 |
| 3.3.5 链霉菌LD0501形态学特征 | 第40-41页 |
| 3.3.6 高产菌株和原始菌株的产饱能力比较 | 第41页 |
| 3.4 实验结果 | 第41-49页 |
| 3.4.1 通过原生质体的制备与再生对出发菌株产酶的影响结果 | 第41-42页 |
| 3.4.2 单孢子和原生质体的紫外剂量的确定 | 第42-43页 |
| 3.4.3 孢子悬液紫外诱变后高产菌株的筛选 | 第43-45页 |
| 3.4.4 原生质体紫外诱变后的菌株摇瓶初筛 | 第45-46页 |
| 3.4.5 原生质体紫外诱变后的菌株摇瓶复筛 | 第46-47页 |
| 3.4.6 不同方法选育磷脂酶D高产菌株的比较 | 第47-48页 |
| 3.4.7 高产菌株与出发菌株的形态差异 | 第48页 |
| 3.4.8 高产菌株与出发菌株菌丝生长量和孢子产量比较 | 第48-49页 |
| 3.5 讨论 | 第49页 |
| 3.6 本章小结 | 第49-50页 |
| 第四章 亲本原生质体融合筛选磷脂酶D高产菌株 | 第50-66页 |
| 4.1 前言 | 第50页 |
| 4.2 材料与方法 | 第50-51页 |
| 4.2.1 试验菌株 | 第50页 |
| 4.2.2 培养基与溶液 | 第50页 |
| 4.2.3 主要药品与试剂 | 第50页 |
| 4.2.4 主要仪器与设备 | 第50-51页 |
| 4.3 实验方法 | 第51-53页 |
| 4.3.1 原生质体的非对称灭活 | 第51页 |
| 4.3.2 原生质体融合 | 第51-52页 |
| 4.3.3 融合菌株的获得与筛选 | 第52页 |
| 4.3.4 融合菌株的遗传稳定性研究 | 第52-53页 |
| 4.4 实验结果 | 第53-64页 |
| 4.4.1 原生质体的非对称灭活 | 第53-54页 |
| 4.4.2 双亲原生质体的融合 | 第54-58页 |
| 4.4.3 双亲灭活原生质体 | 第58-59页 |
| 4.4.4 融合菌株的形态学描述 | 第59页 |
| 4.4.5 融合菌株的筛选 | 第59-63页 |
| 4.4.6 融合菌株与双亲菌株产孢能力的比较 | 第63页 |
| 4.4.7 融合菌株的遗传稳定性 | 第63-64页 |
| 4.5 讨论 | 第64-65页 |
| 4.6 本章小结 | 第65-66页 |
| 第五章 融合菌株的代谢特征及发酵培养基的优化 | 第66-78页 |
| 5.1 前言 | 第66页 |
| 5.2 实验材料 | 第66页 |
| 5.2.1 试验菌株 | 第66页 |
| 5.2.2 培养基与溶液 | 第66页 |
| 5.2.3 主要药品与试剂 | 第66页 |
| 5.2.4 主要仪器与设备 | 第66页 |
| 5.3 实验方法 | 第66-68页 |
| 5.3.1 菌株生长曲线测定 | 第66-67页 |
| 5.3.2 PLD水解活力的测定 | 第67页 |
| 5.3.3 葡萄糖消耗量的测定 | 第67-68页 |
| 5.3.4 融合菌株的碳源优化 | 第68页 |
| 5.3.5 融合菌株的氮源优化 | 第68页 |
| 5.4 结果与分析 | 第68-76页 |
| 5.4.1 融合菌株与亲本菌株的代谢特征比较 | 第68-71页 |
| 5.4.2 融合菌株产酶的最佳碳源 | 第71页 |
| 5.4.3 融合菌株发酵产酶能力的最佳甘油、葡萄糖添加量 | 第71-73页 |
| 5.4.4 复合碳源对融合菌株产酶能力的影响 | 第73-74页 |
| 5.4.5 融合菌株产酶的最佳氮源 | 第74-75页 |
| 5.4.6 黄豆粉浓度对发酵能力的影响 | 第75-76页 |
| 5.5 讨论 | 第76-77页 |
| 5.6 本章小结 | 第77-78页 |
| 结论与展望 | 第78-81页 |
| 结论 | 第78-79页 |
| 展望 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-87页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
