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柞蚕空胴病病原菌基因组、侵染后柞蚕蛋白质组及柞蚕免疫Toll通路研究

摘要第12-15页
Abstract第15-19页
第一章 柞蚕空胴病及柞蚕免疫的研究现状及进展第20-35页
    1.1 柞蚕空胴病的研究进展第22-27页
        1.1.1 病原物鉴定及重新分类第23-24页
        1.1.2 外部病症及组织病变第24页
        1.1.3 致病机理第24页
        1.1.4 传染规律第24-25页
        1.1.5 柞蚕空胴病防治研究第25-26页
        1.1.6 柞蚕空胴病病原菌的研究展望第26-27页
    1.2 昆虫先天免疫Toll通路研究现状及柞蚕免疫研究进展第27-33页
        1.2.1 昆虫先天免疫研究现状第27-29页
        1.2.2 昆虫先天免疫Toll通路研究进展第29-31页
        1.2.3 柞蚕免疫研究进展第31-33页
    1.3 本论文的目的及意义第33-34页
    1.4 本论文的技术路线第34-35页
第二章 柞蚕空胴病病原菌基因组测序及分析第35-64页
    2.1 材料第35-37页
        2.1.1 试验材料第35-36页
        2.1.2 主要试剂及药品第36页
        2.1.3 主要仪器设备第36-37页
    2.2 试验方法第37-40页
        2.2.1 柞蚕空胴病病原菌基因组DNA的提取及检测第37页
        2.2.2 柞蚕空胴病病原菌基因组测序第37页
        2.2.3 柞蚕空胴病病原菌基因组生物信息学分析第37-40页
    2.3 结果与分析第40-61页
        2.3.1 柞蚕空胴病病原菌基因组DNA的提取及检测第40-41页
        2.3.2 柞蚕空胴病病原菌基因组测序数据概况第41-42页
        2.3.3 柞蚕空胴病病原菌基因组大小估计第42-43页
        2.3.4 柞蚕空胴病病原菌基因组组装分析第43-44页
        2.3.5 柞蚕空胴病病原菌基因组组分分析第44-49页
        2.3.6 柞蚕空胴病病原菌基因组编码基因功能注释第49-53页
        2.3.7 柞蚕空胴病病原菌全基因组图谱第53-54页
        2.3.8 比较基因组学分析第54-61页
    2.4 讨论第61-64页
第三章 柞蚕肠球菌侵染后柞蚕血淋巴蛋白质组学研究第64-95页
    3.1 材料第65-66页
        3.1.1 试验材料第65页
        3.1.2 主要试剂及药品第65页
        3.1.3 主要仪器设备第65-66页
    3.2 试验方法第66-68页
        3.2.1 蛋白质提取第66页
        3.2.2 蛋白质定量第66页
        3.2.3 SDS-PAGE电泳检测第66页
        3.2.4 蛋白质酶解第66页
        3.2.5 iTRAQ标记第66-67页
        3.2.6 反相色谱法分离肽段第67页
        3.2.7 高效液相色谱-电喷雾串联质谱法第67页
        3.2.8 信息分析第67-68页
    3.3 结果与分析第68-92页
        3.3.1 柞蚕血淋巴蛋白质提取及质量检测第68-70页
        3.3.2 柞蚕血淋巴蛋白质鉴定第70-72页
        3.3.3 鉴定蛋白质的功能注释第72-81页
        3.3.4 柞蚕蛋白质定量分析第81-82页
        3.3.5 柞蚕差异蛋白质的GO富集分析第82-88页
        3.3.6 柞蚕差异蛋白质的Pathway富集分析第88-92页
    3.4 讨论第92-95页
第四章 柞蚕Spatzle基因克隆、原核表达载体构建及其抗体制备第95-114页
    4.1 材料第95-97页
        4.1.1 试验材料第95页
        4.1.2 主要试剂及药品第95-96页
        4.1.3 主要仪器设备第96-97页
    4.2 试验方法第97-102页
        4.2.1 柞蚕总RNA的提取第97页
        4.2.2 柞蚕cDNA第一条链的合成第97页
        4.2.3 柞蚕Spatzle基因PCR扩增第97-98页
        4.2.4 柞蚕Spatzle基因RACE第98-99页
        4.2.5 柞蚕Spatzle基因的生物信息学分析第99-100页
        4.2.6 柞蚕Spatzle基因原核表达载体的构建第100页
        4.2.7 柞蚕Spatzle重组蛋白表达和纯化第100-101页
        4.2.8 柞蚕Spatzle重组蛋白抗体制备第101-102页
        4.2.9 Western blot检测第102页
    4.3 结果与分析第102-111页
        4.3.1 柞蚕总RNA的提取第102-103页
        4.3.2 柞蚕Spatzle基因的克隆及序列分析第103-105页
        4.3.3 柞蚕Spatzle蛋白与其他Spatzle蛋白序列比对分析第105-106页
        4.3.4 柞蚕Spatzle蛋白与其他Spatzle蛋白聚类分析第106-108页
        4.3.5 柞蚕Spatzle基因原核表达载体的构建第108页
        4.3.6 柞蚕Spatzle重组蛋白表达与纯化第108-110页
        4.3.7 抗血清制备及Western-blot检测第110-111页
    4.4 讨论第111-114页
第五章 Toll通路在柞蚕免疫不同外源微生物过程中的作用第114-128页
    5.1 材料第114-115页
        5.1.1 试验材料第114-115页
        5.1.2 主要试剂及药品第115页
        5.1.3 主要仪器设备第115页
    5.2 试验方法第115-117页
        5.2.1 材料准备第115-116页
        5.2.2 柞蚕总RNA的提取及定量第116页
        5.2.3 cDNA第一条链的合成第116页
        5.2.4 RT-PCR第116-117页
        5.2.5 qRT-PCR第117页
    5.3 结果与分析第117-125页
        5.3.1 Toll通路基因时空表达谱第117-121页
        5.3.2 Toll通路基因对外源微生物诱导的响应第121-125页
    5.4 讨论第125-128页
第六章 结论第128-132页
参考文献第132-144页
附录第144-152页
致谢第152-153页
攻读学位期间发表论文情况第153页

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