摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 文献综述 | 第10-20页 |
1.1 Fox转录因子家族 | 第10-13页 |
1.1.1 Fox家族的由来与命名 | 第10页 |
1.1.2 Fox家族的调节机制 | 第10-12页 |
1.1.3 Fox基因家族的功能 | 第12-13页 |
1.2 FoxA2、FoxC2和FoxL2的研究进展 | 第13-18页 |
1.2.1 FoxA2概述 | 第13-15页 |
1.2.2 FoxC2概述 | 第15-16页 |
1.2.3 FoxL2概述 | 第16-18页 |
1.3 本研究的目的及意义 | 第18-20页 |
2 材料和方法 | 第20-33页 |
2.1 实验动物 | 第20页 |
2.2 试剂及主要试剂的配制 | 第20-21页 |
2.2.1 本研究所用的试剂及菌种 | 第20-21页 |
2.2.2 主要试剂的配制 | 第21页 |
2.3 实验仪器设备 | 第21-22页 |
2.4 模板制备 | 第22-25页 |
2.4.1 各组织总RNA的提取 | 第22页 |
2.4.2 cDNA第一链的合成 | 第22-23页 |
2.4.3 RACE模板的制备 | 第23-25页 |
2.5 引物设计 | 第25-26页 |
2.6 FoxC2、FoxL2基因全长序列及FoxA2基因中间片段获得 | 第26-28页 |
2.6.1 PCR扩增 | 第26-27页 |
2.6.2 PCR产物的回收 | 第27页 |
2.6.3 连接 | 第27-28页 |
2.6.4 转化 | 第28页 |
2.6.5 菌落PCR鉴定 | 第28页 |
2.7 FoxA2 cDNA末端序列快速扩增 | 第28-29页 |
2.7.1 3'-RACE扩增 | 第28-29页 |
2.7.2 5'-RACE扩增 | 第29页 |
2.8 序列分析 | 第29-30页 |
2.9 荧光定量PCR检测中国大鲵FoxA2、FoxC2和FoxL2基因在各组织中的表达 | 第30-33页 |
2.9.1 荧光定量PCR引物设计 | 第30-31页 |
2.9.2 最适退火温度的选择 | 第31页 |
2.9.3 标准曲线的制作 | 第31-32页 |
2.9.4 各组织中FoxA2、FoxC2和FoxL2基因的表达检测 | 第32页 |
2.9.5 数据分析 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-53页 |
3.1 DNA与RNA提取结果 | 第33页 |
3.2 PCR扩增结果 | 第33-35页 |
3.2.1 FoxC2、FoxL2基因全长及FoxA2中间片段 | 第33-34页 |
3.2.2 FoxA2 RACE扩增 | 第34-35页 |
3.3 FoxA2、FoxC2和FoxL2基因核苷酸序列分析 | 第35-38页 |
3.4 FoxA2、FoxC2和FoxL2基因蛋白质序列分析 | 第38-49页 |
3.4.1 FoxA2、FoxC2和FoxL2基因蛋白质序列基本性质 | 第38-40页 |
3.4.2 FoxA2、FoxC2和FoxL2基因序列相似性分析 | 第40-42页 |
3.4.3 FoxA2、FoxC2和FoxL2基因蛋白质序列比对 | 第42-46页 |
3.4.4 FoxA2、FoxC2和FoxL2基因蛋白质序列系统进化树构建 | 第46-48页 |
3.4.5 Fox基因家族进化 | 第48-49页 |
3.5 FoxA2、FoxC2和FoxL2基因在大鲵各组织的表达 | 第49-53页 |
3.5.1 实时荧光定量PCR标准曲线 | 第49-50页 |
3.5.2 中国大鲵FoxA2、FoxC2和FoxL2基因各组织的差异表达 | 第50-53页 |
4 讨论 | 第53-57页 |
4.1 FoxA2基因的序列分析 | 第53页 |
4.2 FoxC2基因的序列分析 | 第53-54页 |
4.3 FoxL2基因的序列分析 | 第54-55页 |
4.4 Fox基因家族进化分析 | 第55页 |
4.5 FoxA2、FoxC2和FoxL2基因的组织表达分析 | 第55-57页 |
5 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
在学期间发表文章 | 第64页 |