| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 符号说明 | 第10-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-22页 |
| 1.1 骨骼肌形成概述 | 第13-14页 |
| 1.1.1 骨骼肌的生长发育过程 | 第13页 |
| 1.1.2 骨骼肌纤维分类 | 第13-14页 |
| 1.1.3 参与骨骼肌生长发育的转录因子 | 第14页 |
| 1.2 miRNA简述 | 第14-18页 |
| 1.2.1 miRNA的形成及调控机制 | 第15页 |
| 1.2.2 miRNA的鉴定及检测方法 | 第15-16页 |
| l 2.3 miRNA的靶基因预测及验证方法 | 第16-17页 |
| 1.2.4 miR-181a-5p研究现状 | 第17-18页 |
| 1.3 内质网应激 | 第18-19页 |
| 1.3.1 内质网应激主要的生物学通路 | 第18页 |
| 1.3.2 内质网应激在肌肉生长过程中的作用研究 | 第18-19页 |
| 1.4 miRNAs和内质网应激 | 第19-22页 |
| 1.4.1 miRNAs是内质网应激的调节器 | 第19-20页 |
| 1.4.2 miRNAs是内质网应激的效应器 | 第20-22页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-28页 |
| 2.1.1 质粒、菌株和细胞 | 第22-23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23-25页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第25-26页 |
| 2.1.4 常用试剂配制 | 第26-28页 |
| 2.1.5 主要分子生物学软件及数据库 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-36页 |
| 2.2.1 组织DNA提取 | 第28-29页 |
| 2.2.2 细胞总RNA提取 | 第29页 |
| 2.2.3 mRNA反转录 | 第29-30页 |
| 2.2.4 miRNA反转录 | 第30页 |
| 2.2.5 RT-qPCR | 第30-31页 |
| 2.2.6 猪GRP783’-UTR扩增及双荧光素酶载体构建 | 第31-33页 |
| 2.2.7 细胞培养及转染 | 第33-35页 |
| 2.2.8 细胞增殖和细胞活性检测 | 第35页 |
| 2.2.9 C2C12细胞HE染色 | 第35-36页 |
| 2.2.10 C2C12细胞和PMFs Hoechst 33342染色 | 第36页 |
| 2.2.11 细胞内质网应激 | 第36页 |
| 2.2.12 数据分析 | 第36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-49页 |
| 3.1 C2C12细胞分化模型建立 | 第36-37页 |
| 3.2 进化保守性分析以及成肌分化过程中miR-181a-5p的表达谱 | 第37-38页 |
| 3.3 miR-181a-5p对ERS介导的凋亡信号通路和成肌分化的影响 | 第38-41页 |
| 3.3.1 转染效率检测 | 第38-39页 |
| 3.3.2 过表达miR-181a-5p激活ERS介导的凋亡途径并促进成肌分化 | 第39页 |
| 3.3.3 抑制miR-181a-5p缓和ERS介导的凋亡途径并抑制成肌分化 | 第39-41页 |
| 3.4 miR-181a-5p对肌纤维类型组成的影响 | 第41-42页 |
| 3.5 miR-181a-5p对C2C12细胞增殖的影响 | 第42-43页 |
| 3.6 ERS对成肌分化和miR-181a-5p表达量的影响 | 第43-44页 |
| 3.7 miR-181a-5p调控ERS介导的细胞凋亡信号通路 | 第44-49页 |
| 3.7.1 miR-181a-5p通过ERS介导的细胞凋亡通路促进C2C12细胞凋亡 | 第44-46页 |
| 3.7.2 miR-181a-5p通过ERS介导的细胞凋亡通路促进PMFs细胞凋亡 | 第46-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| 4.1 miR-181a-5p在成肌分化过程中的调控作用 | 第49-50页 |
| 4.2 ERS在成肌分化过程中的调控作用 | 第50页 |
| 4.3 miR-181a-5p调控ERS介导的细胞凋亡信号通路 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第60页 |
