摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
引言 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-22页 |
1 生长抑制素及其作用 | 第13-22页 |
·生长抑制素 | 第13-14页 |
·生长抑制素受体 | 第14页 |
·生长抑制素的生理功能及作用机制 | 第14-15页 |
·生长抑制素基因表达的调控 | 第15-16页 |
·生长抑制素与动物促生长的研究 | 第16-22页 |
第二章 生长抑制素基因在p ET-32a载体表达系统中的串联构建 | 第22-36页 |
1 实验材料 | 第23-25页 |
·材料 | 第23页 |
·菌株及质粒 | 第23页 |
·主要分子生物学软件 | 第23页 |
·主要实验仪器及耗材 | 第23-24页 |
·常用溶液配方 | 第24-25页 |
2 实验方法 | 第25-34页 |
·生长抑制素基因的设计和退火 | 第25-28页 |
·p ET-32a-2SS28-SS14表达质粒的构建 | 第28-32页 |
·p ET-32a-3SS28表达质粒的构建 | 第32页 |
·PCR扩增目的片段 | 第32-34页 |
3 实验结果 | 第34-35页 |
·p ET-32a-SS28质粒的Eco RⅠ和HindⅢ双酶切的琼脂糖电泳及回收 | 第34-35页 |
·目的片段的pcr扩增 | 第35页 |
4.分析与讨论 | 第35-36页 |
第三章 重组到p ET-32a载体的生长抑制素基因在大肠杆菌中表达和纯化 | 第36-48页 |
1 实验材料 | 第36-39页 |
·材料 | 第36页 |
·菌株 | 第36-37页 |
·主要实验仪器 | 第37页 |
·常用溶液配方 | 第37-39页 |
2 实验方法 | 第39-43页 |
·重组质粒p ET-32a-2SS28-SS14的目的基因诱导表达纯化及Western-Blot分析 | 第39-43页 |
·重组质粒p ET-32a-3SS28的目的基因诱导表达纯化及Western-Blot分析 | 第43页 |
3 实验结果 | 第43-46页 |
·SS28-SS14和 3SS28目的蛋白在PET32a表达系统中的表达 | 第43-44页 |
·2SS28-SS14和 3SS28目的蛋白的可溶性分析 | 第44-45页 |
·2SS28-SS14和 3SS28目的蛋白的western blot分析 | 第45-46页 |
·2SS28-SS14和 3SS28目的蛋白的纯化 | 第46页 |
4.分析与讨论 | 第46-48页 |
第四章 生长抑制素亚单位疫苗的制备和对小白鼠生长的影响 | 第48-53页 |
1 实验材料 | 第48-49页 |
·材料 | 第48页 |
·实验仪器 | 第48-49页 |
2.实验方法 | 第49-52页 |
·蛋白浓度的测定与浓缩 | 第49页 |
·疫苗的制备 | 第49-50页 |
·动物免疫接种 | 第50页 |
·实验小鼠的体重测量 | 第50页 |
·数据分析 | 第50页 |
·实验分析 | 第50-52页 |
3 讨论 | 第52-53页 |
总结 | 第53-54页 |
研究展望 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
攻读硕士期间论文发表 | 第64页 |