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Rli87基因缺失对LM环境应激及致病力的影响

中文摘要第1-8页
Abstract第8-13页
英文缩略词第13-14页
第一章 文献综述第14-24页
 1 病原学特征第14-15页
 2 侵染机制第15-16页
 3 LM致病岛第16-20页
 4 非编码RNA的研究第20-24页
第二章 试验研究第24-56页
 试验一 LM rli87基因缺失株的构建、鉴定及其生长特性研究第24-37页
  1 材料第25-26页
   ·菌株、载体及试剂第25页
   ·引物设计第25页
   ·仪器第25-26页
  2 方法第26-29页
   ·LM EGD-e基因组的提取第26页
   ·△ rli87基因缺失融合片段的构建第26页
   ·rli87基因缺失片段的克隆和测序第26-27页
   ·pKSV7-△ rli87穿梭质粒的构建第27页
   ·电转用LM EGD-e感受态细胞及电击杯的制备第27-28页
   ·LM-△ rli87缺失株的构建、筛选与鉴定第28页
   ·LM-△ rli87缺失株遗传稳定性的检测第28-29页
   ·LM-△ rli87和LM EGD-e在 37℃的生长特性第29页
  3 结果第29-35页
   ·上游同源臂和下游同源臂的扩增结果第29-30页
   ·基因重叠PCR扩增结果和测序鉴定结果第30页
   ·重组穿梭质粒pKSV7-△ RsbV鉴定结果第30-31页
   ·pKSV7-△ rli87质粒的鉴定第31页
   ·LM-△ rli87缺失株的PCR鉴定第31-32页
   ·LM-△ rli87缺失株遗传稳定性鉴定第32页
   ·LM -△ rli87重组菌的测序结果第32-35页
   ·重组菌在 37℃条件下生长曲线第35页
  4 讨论第35-37页
 试验二 ncRNARli87基因缺失对单核细胞增生李斯特菌环境应激的影响第37-46页
  1 材料第38-39页
   ·菌株第38页
   ·主要试剂第38页
   ·主要仪器第38页
   ·引物设计第38-39页
  2 方法第39-41页
   ·rli87基因缺失株不同温度条件下生长实验第39页
   ·不同pH值环境下的生存实验第39-40页
   ·高盐环境下的生存实验第40页
   ·氧化压力条件下的生存实验第40页
   ·RNA提取第40页
   ·应激相关基因表达量的检测第40-41页
  3 结果第41-44页
   ·不同温度条件下的生长曲线第41页
   ·不同pH值环境下的生存实验第41-42页
   ·不同压力环境条件下的生长曲线第42-44页
   ·应激相关基因转录水平的检测结果第44页
  4 讨论第44-46页
 试验三 ncRNArli87基因缺失对单核细胞增生李斯特菌致病力的影响第46-56页
  1 材料第47-48页
   ·菌株与实验动物第47页
   ·主要试剂第47页
   ·主要仪器第47页
   ·引物第47-48页
  2 方法第48-50页
   ·细胞黏附和侵袭试验第48-49页
   ·溶血实验第49页
   ·小鼠载菌量的测定第49页
   ·LD50的测定第49页
   ·毒力基因转录水平的检测(q RT-PCR)第49-50页
  3 结果第50-54页
   ·细胞黏附和侵袭试验第50-51页
   ·溶血实验第51页
   ·小鼠载菌量的测定第51-53页
   ·LD_(50)的测定第53-54页
   ·毒力基因转录水平的检测(q RT-PCR)第54页
  4 讨论第54-56页
全文结论第56-58页
参考文献第58-64页
附录第64-66页
致谢第66-67页
作者简介第67页
文章发表情况第67-68页
附件第68页

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