摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
1 绪论 | 第9-16页 |
·Fyn的发现 | 第9页 |
·Fyn的结构 | 第9-10页 |
·Fyn的膜定位方式 | 第10-11页 |
·Fyn的活化过程 | 第11-12页 |
·Fyn的主要功能 | 第12-15页 |
·Fyn对神经系统发育中的影响 | 第12-13页 |
·Fyn对T细胞发育的影响 | 第13-14页 |
·Fyn与T细胞受体的相互作用 | 第14-15页 |
·展望 | 第15-16页 |
2 日本七鳃鳗Fyn-like基因的分子克隆 | 第16-27页 |
·材料 | 第16页 |
·实验材料 | 第16页 |
·仪器设备 | 第16页 |
·实验试剂 | 第16页 |
·方法 | 第16-23页 |
·引物设计 | 第16-17页 |
·cDNA模板的制备 | 第17-19页 |
·PCR扩增 | 第19-21页 |
·目的片段切胶回收 | 第21页 |
·末端加A处理 | 第21-22页 |
·目的片段与载体连接 | 第22页 |
·转化 | 第22页 |
·检菌、接菌、质粒提取 | 第22-23页 |
·结果 | 第23-26页 |
·髓样小体总RNA的提取及模板检验 | 第23页 |
·基因克隆 | 第23-26页 |
·讨论 | 第26页 |
·小结 | 第26-27页 |
3 日本七鳃鳗Fyn-like基因生物信息学的分析 | 第27-34页 |
·所用到的在线网站及软件 | 第27页 |
·结果 | 第27-33页 |
·一级结构分析 | 第27页 |
·蛋白质二级结构的预测 | 第27-28页 |
·抗原表位及疏水性的分析 | 第28-29页 |
·同源序列比对 | 第29-31页 |
·系统发育分析 | 第31-33页 |
·讨论 | 第33页 |
·小结 | 第33-34页 |
4 日本七鳃鳗Fyn-like蛋白表达、纯化和抗体的检测 | 第34-41页 |
·材料与方法 | 第34-37页 |
·引物设计 | 第34页 |
·表达载体的构建 | 第34-35页 |
·阳性重组子的诱导 | 第35-36页 |
·融合蛋白的大量诱导表达 | 第36页 |
·重组蛋白的纯化 | 第36-37页 |
·结果 | 第37-40页 |
·Lj-Fyn-like表达载体的构建 | 第37-39页 |
·Lj-Fyn-like蛋白的表达、纯化和anti-Yes抗体的检测 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40页 |
·小结 | 第40-41页 |
5 Fyn-like在组织中的表达及相关免疫学研究 | 第41-55页 |
·应用qPCR方法检测日本七鳃鳗Fyn-like基因在成体组织中的表达; | 第41-43页 |
·材料和方法 | 第41页 |
·结果 | 第41-43页 |
·讨论 | 第43页 |
·小结 | 第43页 |
·应用免疫印迹技术检测Lj-Fyn-like蛋白在成体组织中的表达 | 第43-50页 |
·材料和方法 | 第43-47页 |
·结果 | 第47-49页 |
·讨论 | 第49页 |
·小结 | 第49-50页 |
·日本七鳃鳗Fyn-like蛋白在鳃组织和白细胞中的定位与分布 | 第50-52页 |
·材料和方法 | 第50页 |
·结果 | 第50-52页 |
·讨论 | 第52页 |
·小结 | 第52页 |
·日本七鳃鳗Fyn-like蛋白在鳃组织中的表达时效 | 第52-55页 |
·材料和方法 | 第52-53页 |
·结果 | 第53-54页 |
·讨论 | 第54页 |
·小结 | 第54-55页 |
6 结论 | 第55-56页 |
·主要结论 | 第55页 |
·创新点 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
附录A 不同物种的Fyn、Yes、Src的FASTA格式氨基酸序列 | 第60-69页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |