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牛Akirin1基因对牛成肌细胞分化的影响研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 引言第11-25页
   ·肌肉分化相关基因研究进展第11-20页
     ·MRFs 家族研究进展第11-13页
     ·MEF2s 与肌肉形成第13-15页
     ·MSTN 与肌肉分化第15-16页
     ·IGFs 与肌肉分化第16-17页
     ·脂肪因子与肌肉分化第17-20页
   ·Akirin1 基因与肌肉发生第20-23页
     ·Akirin1 的结构与定位第20页
     ·Akirin1 的表达第20页
     ·Akirin1 与细胞周期第20-21页
     ·Akirin1 与肌肉分化第21-22页
     ·Akirin1 与肌肉再生第22-23页
     ·Akirin1 与细胞迁移第23页
   ·本研究的目的和意义第23-25页
2 材料与方法第25-39页
   ·牛Akirin1 基因CDS 区域的克隆与测序第25-29页
     ·实验材料第25-26页
     ·实验方法第26-29页
   ·真核表达载体pIRES2-EGFP-akirin1 的构建第29页
     ·实验材料第29页
     ·实验方法第29页
   ·成肌细胞的传代培养和转染第29-32页
     ·实验材料第29-31页
     ·实验方法第31-32页
   ·Real-time PCR 检测转染akirin1 后相关基因的表达变化第32-34页
     ·实验材料第32-33页
     ·实验方法第33-34页
   ·Western blot 检测转染akirin1 后MyoG 的表达变化第34-37页
     ·实验材料第34页
     ·实验方法第34-37页
   ·Akirin1 基因的生物信息学分析第37页
     ·实验材料第37页
     ·实验方法第37页
   ·Akirin1 基因对MyoG 启动子活性的影响研究第37-39页
     ·实验材料第37-38页
     ·实验方法第38-39页
3 结果第39-55页
   ·荷斯坦牛akirin1 基因的扩增第39-41页
   ·牛akirin1 基因真核表达载体的构建与鉴定第41-43页
   ·成肌细胞的培养与诱导分化第43-44页
   ·Akirin1 表达载体瞬时转染牛成肌细胞第44-46页
   ·Real-time PCR 检测akirin1 以及肌肉分化相关基因的表达变化第46-50页
     ·Akirin1 mRNA 表达量检测第46-48页
     ·myogenin mRNA 表达量检测第48-49页
     ·MCK mRNA 表达量检测第49-50页
   ·Western blot 检测MyoG 蛋白水平的变化第50页
   ·牛Akirin1 基因的生物信息学分析第50-53页
     ·基因产物与已知蛋白质的序列比对第50-52页
     ·牛akirin1 保守结构域的预测第52-53页
     ·牛myogenin 启动子区域转录因子结合位点的分析第53页
   ·牛Akirin1 对myogenin 启动子活性的影响研究第53-55页
4 讨论第55-59页
   ·转染试剂的选择第55页
   ·成肌细胞转染和诱导分化的细节第55-56页
   ·Akirin1 基因对成肌细胞分化的影响第56-57页
   ·Akirin1 基因的生物信息学分析第57-58页
     ·Akirin1 基因同源性的分析第57页
     ·Akirin1 保守结构域的分析第57页
     ·myogenin 基因启动子转录因子结合位点的分析第57-58页
   ·Akirin1 对myogenin 启动子活性的影响研究第58页
   ·对后续工作的展望第58-59页
5 结论第59-60页
致谢第60-61页
参考文献第61-64页
附录 Akirin1 的测序结果第64-66页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第66页

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