中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
1 引言 | 第11-25页 |
·肌肉分化相关基因研究进展 | 第11-20页 |
·MRFs 家族研究进展 | 第11-13页 |
·MEF2s 与肌肉形成 | 第13-15页 |
·MSTN 与肌肉分化 | 第15-16页 |
·IGFs 与肌肉分化 | 第16-17页 |
·脂肪因子与肌肉分化 | 第17-20页 |
·Akirin1 基因与肌肉发生 | 第20-23页 |
·Akirin1 的结构与定位 | 第20页 |
·Akirin1 的表达 | 第20页 |
·Akirin1 与细胞周期 | 第20-21页 |
·Akirin1 与肌肉分化 | 第21-22页 |
·Akirin1 与肌肉再生 | 第22-23页 |
·Akirin1 与细胞迁移 | 第23页 |
·本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
2 材料与方法 | 第25-39页 |
·牛Akirin1 基因CDS 区域的克隆与测序 | 第25-29页 |
·实验材料 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-29页 |
·真核表达载体pIRES2-EGFP-akirin1 的构建 | 第29页 |
·实验材料 | 第29页 |
·实验方法 | 第29页 |
·成肌细胞的传代培养和转染 | 第29-32页 |
·实验材料 | 第29-31页 |
·实验方法 | 第31-32页 |
·Real-time PCR 检测转染akirin1 后相关基因的表达变化 | 第32-34页 |
·实验材料 | 第32-33页 |
·实验方法 | 第33-34页 |
·Western blot 检测转染akirin1 后MyoG 的表达变化 | 第34-37页 |
·实验材料 | 第34页 |
·实验方法 | 第34-37页 |
·Akirin1 基因的生物信息学分析 | 第37页 |
·实验材料 | 第37页 |
·实验方法 | 第37页 |
·Akirin1 基因对MyoG 启动子活性的影响研究 | 第37-39页 |
·实验材料 | 第37-38页 |
·实验方法 | 第38-39页 |
3 结果 | 第39-55页 |
·荷斯坦牛akirin1 基因的扩增 | 第39-41页 |
·牛akirin1 基因真核表达载体的构建与鉴定 | 第41-43页 |
·成肌细胞的培养与诱导分化 | 第43-44页 |
·Akirin1 表达载体瞬时转染牛成肌细胞 | 第44-46页 |
·Real-time PCR 检测akirin1 以及肌肉分化相关基因的表达变化 | 第46-50页 |
·Akirin1 mRNA 表达量检测 | 第46-48页 |
·myogenin mRNA 表达量检测 | 第48-49页 |
·MCK mRNA 表达量检测 | 第49-50页 |
·Western blot 检测MyoG 蛋白水平的变化 | 第50页 |
·牛Akirin1 基因的生物信息学分析 | 第50-53页 |
·基因产物与已知蛋白质的序列比对 | 第50-52页 |
·牛akirin1 保守结构域的预测 | 第52-53页 |
·牛myogenin 启动子区域转录因子结合位点的分析 | 第53页 |
·牛Akirin1 对myogenin 启动子活性的影响研究 | 第53-55页 |
4 讨论 | 第55-59页 |
·转染试剂的选择 | 第55页 |
·成肌细胞转染和诱导分化的细节 | 第55-56页 |
·Akirin1 基因对成肌细胞分化的影响 | 第56-57页 |
·Akirin1 基因的生物信息学分析 | 第57-58页 |
·Akirin1 基因同源性的分析 | 第57页 |
·Akirin1 保守结构域的分析 | 第57页 |
·myogenin 基因启动子转录因子结合位点的分析 | 第57-58页 |
·Akirin1 对myogenin 启动子活性的影响研究 | 第58页 |
·对后续工作的展望 | 第58-59页 |
5 结论 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-64页 |
附录 Akirin1 的测序结果 | 第64-66页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第66页 |