| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第一章 综述 | 第10-26页 |
| 1.1 引言 | 第10页 |
| 1.2 细胞黏着 | 第10-12页 |
| 1.3 整合素 | 第12-17页 |
| 1.3.1 整合素主要类型 | 第14页 |
| 1.3.2 整合素的结构 | 第14-15页 |
| 1.3.3 整合素的激活 | 第15-17页 |
| 1.4 Talin | 第17-25页 |
| 1.4.1 Talin全长结构域分布及低分辨率电镜模型 | 第17-19页 |
| 1.4.2 Talin对整合素的激活作用 | 第19-20页 |
| 1.4.3 Talin自抑制/活化 | 第20-25页 |
| 1.4.4 全长Talin对自抑制研究的重要性 | 第25页 |
| 1.5 研究意义 | 第25-26页 |
| 第二章 原核表达Talin蛋白实验材料和方法 | 第26-43页 |
| 2.1 材料和仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.2 表达质粒的构建 | 第27-30页 |
| 2.2.1 原核表达重组质粒的构建 | 第27-30页 |
| 2.3 蛋白表达与纯化 | 第30-36页 |
| 2.3.1 蛋白的生物信息学分析 | 第30页 |
| 2.3.2 蛋白表达与纯化 | 第30-33页 |
| 2.3.3 蛋白纯化 | 第33-36页 |
| 2.4 电镜观察 | 第36-43页 |
| 2.4.1 电镜基本构造 | 第37-39页 |
| 2.4.2 载网及支持膜 | 第39页 |
| 2.4.3 负染色技术 | 第39-41页 |
| 2.4.4 冷冻电镜技术 | 第41-43页 |
| 第三章 原核表达Talin蛋白实验结果和讨论 | 第43-53页 |
| 3.1 重组表达质粒的构建和蛋白试表达 | 第43-44页 |
| 3.1.1 主要溶液及其配制 | 第43页 |
| 3.1.2 全长野生型Talin蛋白表达与纯化 | 第43-44页 |
| 3.2 Talin蛋白、突变体蛋白的纯化 | 第44-50页 |
| 3.2.1 全长野生型Talin蛋白表达与纯化 | 第44-47页 |
| 3.2.2 全长突变体Talin蛋白表达与纯化 | 第47-50页 |
| 3.3 电镜观察 | 第50-51页 |
| 3.3.1 全长野生型Talin蛋白电镜观察结果 | 第50-51页 |
| 3.4 本章小结 | 第51-53页 |
| 第四章 天然组织提取Talin蛋白实验材料和方法 | 第53-58页 |
| 4.1 材料和仪器 | 第53页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第53页 |
| 4.1.2 仪器设备 | 第53页 |
| 4.2 蛋白的生物信息学分析 | 第53-54页 |
| 4.2.1 蛋白序列信息 | 第53-54页 |
| 4.3 蛋白纯化 | 第54-57页 |
| 4.3.1 材料的选择和预处理 | 第54页 |
| 4.3.2 细胞的破碎 | 第54-55页 |
| 4.3.3 蛋白提取 | 第55页 |
| 4.3.4 蛋白的纯化 | 第55-56页 |
| 4.3.5 浓缩及保存 | 第56页 |
| 4.3.6 免疫印迹检测Talin的存在 | 第56-57页 |
| 4.4 电镜观察 | 第57-58页 |
| 4.4.1 负染色技术 | 第57-58页 |
| 第五章 天然组织提取Talin蛋白实验结果和讨论 | 第58-69页 |
| 5.1 蛋白的纯化 | 第58-66页 |
| 5.1.1 阴离子交换柱层析 | 第60-63页 |
| 5.1.2 分子筛排阻层析 | 第63-64页 |
| 5.1.3 疏水柱层析 | 第64页 |
| 5.1.4 阳离子交换柱层析 | 第64-66页 |
| 5.2 电镜观察 | 第66-67页 |
| 5.2.1 负染 | 第66-67页 |
| 5.3 本章小结 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-71页 |
| 附录一 | 第71-75页 |
| 附录二 | 第75-77页 |
| 附录三 | 第77-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |