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禽源H9N2 AIV对哺乳动物的感染及其引起肺部细胞因子与蛋白组变化的研究

符号说明第1-12页
中文摘要第12-15页
Abstract第15-19页
1 引言第19-40页
   ·流感病毒概述第19-27页
     ·禽流感病毒病原学基础第19-24页
     ·禽流感流行与现状第24-25页
     ·禽流感病毒的变异第25-27页
   ·禽流感病毒感染哺乳动物及人致病机制的研究进展第27-31页
     ·禽流感病毒感染哺乳动物和人的概况第27-28页
     ·禽流感感染哺乳动物的分子机制第28-31页
   ·天然免疫反应与病毒感染关系的研究进展第31-36页
     ·机体抗病毒天然免疫应答第31-32页
     ·细胞因子及趋化因子与流感病毒的致病作用第32-33页
     ·主要的细胞因子及其作用第33-36页
   ·蛋白组学及其在流感病毒研究中的应用第36-39页
     ·蛋白组学的概念和研究内容第36页
     ·蛋白组学的技术方法第36-38页
     ·蛋白组学在流感病毒研究中的应用第38-39页
   ·研究目的和意义第39-40页
2 材料与方法第40-69页
   ·材料第40-44页
     ·病毒株第40页
     ·实验动物、细胞及抗体第40页
     ·主要试剂及试剂盒第40-41页
     ·主要实验溶液的配置第41-43页
     ·主要仪器第43-44页
   ·方法第44-69页
     ·H9N2 禽流感病毒血清学调查第44-46页
     ·H9N2 亚型 AIV 山东分离株基因序列特征分析及对哺乳动物的感染第46-59页
       ·病毒株第46页
       ·鸡胚增殖及纯化第46-47页
       ·病毒的 TCID50第47-48页
       ·透射电镜下观察病毒形态第48页
       ·病毒 RNA 的提取、RT-PCR、克隆及序列测定第48-53页
       ·序列分析第53-54页
       ·H9N2 AIV 山东分离株在小鼠体内的复制第54页
       ·H9N2 AIV 感染小鼠各组织病理切片第54-55页
       ·H9N2 AIV 感染小鼠肺脏组织免疫组化第55-57页
       ·H9N2 AIV 山东分离株在豚鼠体内的复制第57页
       ·H9N2 AIV 在豚鼠间传播实验第57-59页
     ·H9N2 AIV 感染小鼠肺脏细胞因子的表达第59-65页
       ·荧光定量 PCR 方法的建立第59-62页
       ·动物实验设计第62页
       ·小鼠细胞因子实时定量 PCR 检测病毒感染小鼠肺脏组织中细胞因子含量第62-63页
       ·ELISA 检测细胞因子的蛋白水平第63-64页
       ·Western Blot 验证细胞因子第64-65页
     ·H9N2 亚型 AIV 感染小鼠肺脏差异蛋白组研究第65-69页
       ·小鼠的攻毒实验第65页
       ·肺脏蛋白样品处理第65页
       ·蛋白浓度测定第65-66页
       ·蛋白的浓缩(丙酮沉淀法)第66页
       ·IPG 胶条的水化和电泳第66页
       ·胶条平衡第66页
       ·二向电泳第66-67页
       ·凝胶分析第67页
       ·质谱鉴定第67-69页
3 结果第69-93页
   ·H9N2 禽流感病毒血清学调查第69页
     ·研究对象第69页
     ·血清标本检测结果第69页
   ·H9N2 AIV 山东分离株基因序列分析及对哺乳动物的感染第69-81页
     ·H9N2 AIV 在鸡胚和细胞的复制能力第69-70页
     ·透射电镜下观察病毒形态第70-71页
     ·分离株 RT-PCR 扩增及测序结果第71页
     ·分离株 8 基因片段的进化分析第71-75页
     ·关键氨基酸位点分析第75-78页
     ·H9N2 AIV 山东分离株在小鼠体内的复制第78-79页
     ·H9N2 AIV 感染小鼠病理组织学结果第79页
     ·H9N2 AIV 感染小鼠肺脏组织免疫组化结果第79-80页
     ·H9N2 AIV 山东分离株在豚鼠体内的复制结果第80页
     ·H9N2 AIV 在豚鼠间传播实验结果第80-81页
   ·H9N2 AIV 感染小鼠肺脏内细胞因子的表达第81-88页
     ·小鼠细胞因子荧光定量方法的建立第81-85页
     ·荧光定量 PCR 对小鼠肺脏细胞因子 mRNA 的检测第85-86页
     ·小鼠肺脏细胞因子蛋白水平的验证第86-88页
   ·H9N2 AIV 感染小鼠肺脏差异蛋白组学分析第88-93页
     ·H9N2 感染组和对照组小鼠肺脏组织双向电泳结果第88-89页
     ·差异表达蛋白分析结果第89-90页
     ·差异蛋白的质谱鉴定结果第90-91页
     ·差异蛋白的功能注解第91-93页
4 讨论第93-101页
   ·H9N2 禽流感血清学调查第93-94页
   ·H9N2 AIV 山东分离株基因序列分析及对哺乳动物的感染第94-97页
     ·H9N2 AIV 山东分离株基因序列分析第94-95页
     ·H9N2 AIV 对哺乳动物的感染第95-97页
   ·H9N2 AIV 感染小鼠肺脏内细胞因子的表达第97-98页
   ·H9N2 AIV 感染小鼠肺脏的差异蛋白质组研究第98-101页
5 结论第101-102页
参考文献第102-119页
附录第119-125页
致谢第125-126页
博士在读期间发表论文第126页

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