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光遗传工具VVD的改造和CRY2的应用

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
英文缩略表第10-11页
第一部分 综述第11-26页
   ·光遗传技术及应用第11-12页
   ·光遗传学中的光敏蛋白第12-13页
     ·光氧电压蛋白第12-13页
     ·异源二聚系统:CRY2-CIB第13页
   ·荧光显微成像技术第13-19页
     ·荧光探针的发光基础第15-16页
     ·荧光显微镜的基本组成第16-17页
     ·荧光显微镜的分辨率第17-19页
   ·钙离子诱导的钙离子的释放(Ca~(2+)-release-activated Ca~(2+),CRAC)第19-26页
     ·CRAC通道的发现第19-20页
     ·CRAC通道活化的分子机制第20-22页
     ·STIM1蛋白和Orail蛋白第22-26页
第二部分 材料与方法第26-33页
   ·材料第26-27页
     ·哺乳动物细胞第26页
     ·主要药品与试剂第26页
     ·主要溶液的配制第26-27页
     ·仪器第27页
   ·实验方法第27-33页
     ·细胞培养第27页
     ·细胞冻存第27页
     ·细胞复苏第27-28页
     ·同源重组法PCR程序第28-29页
     ·VVD异源二聚体检测系统第29-30页
     ·质粒构建及突变第30页
     ·突变质粒转化及单克隆测序第30-31页
     ·质粒酶切及酶连第31页
     ·成像细胞处理第31-32页
     ·细胞滴片第32页
     ·Luciferase 酶活测定第32-33页
第三部分 结果与分析第33-44页
   ·光控粒子通道第33-35页
     ·质粒构建第33页
     ·蓝光诱导的STIM1寡聚的细胞实验第33-35页
   ·VVD的改造第35-44页
     ·突变位点的设计第35-36页
     ·VVD 异源二聚突变筛选第36-44页
第四部分 讨论、总结与展望第44-47页
   ·讨论第44-45页
   ·展望第45-47页
参考文献第47-52页
致谢第52页

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