摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
英文缩略表 | 第10-11页 |
第一部分 综述 | 第11-26页 |
·光遗传技术及应用 | 第11-12页 |
·光遗传学中的光敏蛋白 | 第12-13页 |
·光氧电压蛋白 | 第12-13页 |
·异源二聚系统:CRY2-CIB | 第13页 |
·荧光显微成像技术 | 第13-19页 |
·荧光探针的发光基础 | 第15-16页 |
·荧光显微镜的基本组成 | 第16-17页 |
·荧光显微镜的分辨率 | 第17-19页 |
·钙离子诱导的钙离子的释放(Ca~(2+)-release-activated Ca~(2+),CRAC) | 第19-26页 |
·CRAC通道的发现 | 第19-20页 |
·CRAC通道活化的分子机制 | 第20-22页 |
·STIM1蛋白和Orail蛋白 | 第22-26页 |
第二部分 材料与方法 | 第26-33页 |
·材料 | 第26-27页 |
·哺乳动物细胞 | 第26页 |
·主要药品与试剂 | 第26页 |
·主要溶液的配制 | 第26-27页 |
·仪器 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-33页 |
·细胞培养 | 第27页 |
·细胞冻存 | 第27页 |
·细胞复苏 | 第27-28页 |
·同源重组法PCR程序 | 第28-29页 |
·VVD异源二聚体检测系统 | 第29-30页 |
·质粒构建及突变 | 第30页 |
·突变质粒转化及单克隆测序 | 第30-31页 |
·质粒酶切及酶连 | 第31页 |
·成像细胞处理 | 第31-32页 |
·细胞滴片 | 第32页 |
·Luciferase 酶活测定 | 第32-33页 |
第三部分 结果与分析 | 第33-44页 |
·光控粒子通道 | 第33-35页 |
·质粒构建 | 第33页 |
·蓝光诱导的STIM1寡聚的细胞实验 | 第33-35页 |
·VVD的改造 | 第35-44页 |
·突变位点的设计 | 第35-36页 |
·VVD 异源二聚突变筛选 | 第36-44页 |
第四部分 讨论、总结与展望 | 第44-47页 |
·讨论 | 第44-45页 |
·展望 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
致谢 | 第52页 |