布鲁氏菌的分型鉴定及其SOD蛋白的原核表达和多抗制备
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-17页 |
| 1. 布鲁氏菌简介 | 第11页 |
| 2. 布鲁氏菌的发现及其分类 | 第11-12页 |
| 3. 布鲁氏菌病流行病学 | 第12-13页 |
| ·世界范围布鲁氏菌病流行情况 | 第12页 |
| ·我国布鲁氏菌病流行情况 | 第12页 |
| ·布鲁氏菌的传播途径 | 第12-13页 |
| 4. 布鲁氏菌病病原学 | 第13-15页 |
| ·布鲁氏菌的毒力因子 | 第13-14页 |
| ·布鲁氏菌的感染机制 | 第14-15页 |
| 5. 布鲁氏菌病检测诊断方法 | 第15-16页 |
| ·免疫胶体金层析技术 | 第15页 |
| ·酶联免疫吸附试验（ELISA） | 第15页 |
| ·聚合酶链式反应（PCR） | 第15-16页 |
| 6. 研究目的和意义 | 第16-17页 |
| 第二部分 研究内容 | 第17-45页 |
| 第一章 布鲁氏菌的分型鉴定 | 第17-26页 |
| 1. 材料 | 第17页 |
| ·主要试验菌种 | 第17页 |
| ·主要试验试剂 | 第17页 |
| ·主要试验仪器与设备 | 第17页 |
| 2. 方法 | 第17-22页 |
| ·样品的处理及保存菌株的复苏 | 第17页 |
| ·目的基因的扩增 | 第17-21页 |
| ·目的基因 PCR 产物的纯化 | 第21页 |
| ·重组载体的构建 | 第21-22页 |
| ·序列测序及分析 | 第22页 |
| 3. 结果 | 第22-24页 |
| ·细菌的分离培养 | 第22-23页 |
| ·PCR 检测结果 | 第23-24页 |
| ·测序结果及序列比对分析 | 第24页 |
| 4. 讨论 | 第24-26页 |
| 第二章 布鲁氏菌相关蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化 | 第26-38页 |
| 1 材料 | 第26页 |
| ·载体及菌株 | 第26页 |
| ·酶与试剂 | 第26页 |
| ·抗血清与抗体 | 第26页 |
| 2 方法 | 第26-33页 |
| ·引物设计与合成 | 第26-27页 |
| ·Cu/Zn-SOD 与 OMP28 基因的扩增 | 第27页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第27-29页 |
| ·重组蛋白在不同原核表达系统中的表达 | 第29-30页 |
| ·重组蛋白的纯化与定量 | 第30-32页 |
| ·重组蛋白的免疫学活性鉴定 | 第32-33页 |
| 3. 结果 | 第33-36页 |
| ·Cu/Zn-SOD、OMP28 基因的扩增 | 第33-34页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第34页 |
| ·重组蛋白在不同原核系统中的表达 | 第34-35页 |
| ·重组蛋白的纯化及免疫学活性分析 | 第35-36页 |
| 4. 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 多克隆抗体的制备 | 第38-45页 |
| 1 材料 | 第38页 |
| ·细胞与实验动物 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·主要仪器设备 | 第38页 |
| 2 方法 | 第38-43页 |
| ·抗原制备 | 第38页 |
| ·小鼠免疫 | 第38页 |
| ·免疫后小鼠血清效价检测（间接 ELISA 法） | 第38-39页 |
| ·多克隆抗体的纯化 | 第39-40页 |
| ·多克隆抗体的抗原结合能力与特异性分析 | 第40-43页 |
| 3. 结果 | 第43-45页 |
| ·小鼠免疫及其血清抗体检测 | 第43页 |
| ·鼠抗 Cu/Zn-SOD 多克隆抗体的纯化 | 第43-44页 |
| ·多克隆抗体的抗原结合能力与特异性 | 第44-45页 |
| 4. 讨论 | 第45页 |
| 全文总结 | 第45-46页 |
| 附录 常用缓冲液及培养基配方 | 第46-50页 |
| 附录 缩略词 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 个人简介 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
