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番茄果实颜色与质地调控基因SlSGR1和nsLTP的功能鉴定

摘要第1-11页
Abstract第11-13页
縮略词表第13-14页
第一章 引言第14-20页
   ·番茄色泽调控研究进展第14-16页
   ·番茄果实质地调控研究进展第16-17页
   ·本研究的目的与意义第17-19页
   ·本试验技术路线图第19-20页
第二章 番茄滞绿基因SGR1参与果实类胡萝卜素积累的机理第20-60页
   ·前言第20-28页
     ·植物滞绿突变体的研究现状第20-25页
       ·滞绿的定义第20-21页
       ·滞绿突变体的类型划分第21-22页
       ·植物滞绿突变体的成因第22-24页
       ·植物滞绿突变体的研究意义第24-25页
     ·类胡萝卜素合成途径的调控第25-26页
     ·本研究的目的和意义第26-28页
   ·材料与方法第28-35页
     ·植物材料第28页
     ·试验所用菌株和载体第28页
     ·SlSGR1的表达分析及载体构建第28-29页
     ·番茄的遗传转化第29页
     ·DNA抽提及Southern杂交第29-30页
       ·DNA抽提第29-30页
       ·Southern杂交第30页
     ·酵母双杂交第30-31页
     ·过氧化氢含量分析第31页
     ·BiFC分析互作蛋白第31-32页
     ·番茄果实类胡萝卜素成分分析第32-33页
       ·类胡萝卜素的提取及总量测定第32页
       ·类胡萝卜素皂化和HPLC检测条件第32-33页
     ·番茄红素合成工程菌试验第33-35页
       ·菌株、质粒和载体第33页
       ·原核表达载体pEASY-El-5/5G?i的构建第33页
       ·pEASY-El-SlSGRl表达产物功能分析第33-35页
   ·结果与分析第35-53页
     ·SlSGR1的蛋白结构和进化分析第35-37页
       ·番茄滞绿蛋白SlSGR1结构分析第35页
       ·番茄滞绿基因SlSGR1的进化分析第35-37页
     ·转番茄SlSGR1基因干涉材料的获得及鉴定第37-40页
       ·转SlSGR1-RNAi番茄材料的获得第37-38页
       ·转SlSGR1干涉株系番茄的滞绿性鉴定第38-40页
     ·转基因番茄果实成色原因初探第40-53页
       ·转SlSGR1基因番茄果实表型观察第40-41页
       ·番茄果实主要成色色素的检测第41-42页
       ·番茄质体转换过程的显微观察第42-43页
       ·SlSGR1在番茄果实中的互作蛋白筛选第43-44页
       ·番茄滞绿蛋白SGR1参与八氢番茄红素合成酶PSY1的调控第44-48页
       ·抑制SlSGR1表达可降低番茄果实中过氧化氢含量第48页
       ·抑制SlSGR1对番茄果实成熟特性的影响第48-53页
   ·讨论第53-58页
     ·SlSGR1基因参与番茄果实中的色素积累第53-55页
     ·SlSGR1参与调节番茄果实体内活性氧物质的含量第55-57页
     ·SlSGR1基因与番茄果实耐贮性的关系第57-58页
   ·本章小结第58-60页
第三章 非特异性脂转移蛋白nsLTP参与番茄果实质地形成的机理解析第60-92页
   ·前言第60-71页
     ·nsLTP蛋白介绍第60-61页
     ·番茄果实软化调控第61-64页
       ·PG酶介导的果实软化第62-64页
       ·nsLTP参与果实软化的研究进展第64页
     ·番茄果实表皮蜡质合成的调控第64-69页
       ·蜡质的合成第64-66页
       ·蜡质的分泌第66-67页
       ·nsLTP与果实蜡质之间的关系第67-68页
       ·HD-Zip类转录因子参与果实蜡质运输第68-69页
     ·本研究的意义和内容第69-71页
   ·材料与方法第71-76页
     ·植物材料第71页
     ·试验所用菌株和载体第71页
     ·番茄nsLTP基因的表达分析及载体构建第71页
     ·番茄的遗传转化第71页
     ·DNA抽提及Southern杂交第71页
     ·酵母双杂交第71页
     ·BiFC分析互作蛋白第71-72页
     ·番茄果实PG酶活性的测定第72-73页
     ·番茄果实外蜡组分的GC-MS分析第73-74页
       ·番茄果实外蜡的提取第73页
       ·番茄果实外蜡的GC-MS样品制备第73页
       ·GC-MS法测定番茄果实外蜡组分第73-74页
       ·番茄果实外蜡成分含量的计算方法第74页
     ·番茄果实的灰霉病接种试验第74-76页
       ·PDA培养基的配制第74页
       ·灰霉病接种实验第74-76页
   ·结果与分析第76-88页
     ·番茄转nsLTP基因干涉材料的获得第76页
     ·番茄非特异性脂转移蛋白nsLTP与PG酶之间的关系第76-80页
       ·转nsLTP基因干涉株系番茄果实细胞壁形态观察第76-78页
       ·番茄nsLTP蛋白与PG2A酶的互作研究第78-80页
     ·转nsLTP基因干涉株系番茄果实外蜡积累分析第80-82页
       ·转基因番茄果实表层的蜡质堆积第80-81页
       ·番茄果实外蜡的GC-MS成分分析第81-82页
     ·蜡质合成途径相关基因表达模式分析第82-83页
     ·番茄nsLTP基因的互作蛋白筛选第83-84页
     ·转nsLTP基因干涉株系番茄果实的其它成熟特性第84-88页
       ·转基因番茄果实抗衰老特性第84-85页
       ·转基因番茄果实的抗病性第85-88页
   ·讨论第88-90页
     ·番茄nsLTP蛋白与果实软化第88-89页
     ·番茄nsLTP参与果实外蜡的合成与运输第89-90页
   ·本章小结第90-92页
第四章 全文总结第92-94页
参考文献第94-104页
附录第104-107页
 附表1 SlSGR1基因功能鉴定所涉及引物第104-105页
 附表2 番茄nsLTP功能鉴定所涉及引物第105-106页
 附表3 本研究所涉及载体第106-107页
作者简介第107-108页
致谢第108页

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