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青蒿AaGL2基因的克隆及转基因青蒿遗传分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-11页
目录第11-14页
缩略词表第14-17页
第一章 前言第17-35页
   ·引言第17-19页
   ·青蒿简介第19-20页
   ·青蒿素生物合成第20-23页
   ·青蒿素代谢调控研究进展第23-27页
     ·过表达关键酶第23-24页
     ·抑制竞争支路酶第24-25页
     ·通过转录因子调控多个基因第25-27页
   ·青蒿腺毛发育研究进展第27-32页
     ·青蒿素在分泌型腺毛中合成第27-28页
     ·青蒿分泌型腺毛形态发育过程第28-29页
     ·HD-ZIP IV 类基因在植物表皮细胞发育中的作用第29-32页
   ·转基因植物的遗传稳定性第32-35页
     ·外源基因的遗传多样性第32-33页
     ·外源基因的表达与沉默第33-35页
第二章 AaGL2 基因的克隆及分析第35-59页
   ·实验材料第35-38页
     ·植物材料第35页
     ·菌株和制粒第35页
     ·酶、试剂、试剂盒和引物第35-37页
     ·试剂的配制第37-38页
   ·实验方法第38-48页
     ·青蒿 RNA 的提取第38-39页
     ·青蒿 5’及 3’RACE cDNA 文库的构建第39-40页
     ·青蒿 AaGL2 全长 cDNA 的获得第40-41页
     ·AaGL2 生物信息学分析第41-42页
     ·AaGL2 表达分析第42-43页
     ·AaGL2 蛋白的亚细胞定位第43-44页
     ·AaGL2 转录自激活活性验证第44-45页
     ·AaGL2 拷贝数检测第45-48页
   ·结果与分析第48-58页
     ·AaGL2 基因序列特征第48-49页
     ·AaGL2 是一个 HD-ZIP IV 类转录因子第49-52页
     ·AaGL2 在茎、初期花蕾中特异表达第52-53页
     ·AaGL2 对甲基茉莉酸敏感第53-54页
     ·AaGL2 蛋白定位于细胞核第54-55页
     ·AaGL2 无转录自激活活性第55-57页
     ·AaGL2 在青蒿中有两个拷贝第57-58页
   ·小结和讨论第58-59页
第三章 转基因青蒿 GYR32 的遗传分析第59-71页
   ·实验材料第59页
     ·植物材料第59页
     ·酶、试剂盒和引物第59页
   ·实验方法第59-63页
     ·CTAB 法小提植物 DNA第59-60页
     ·转基因植株的 PCR 检测第60-61页
     ·Southern blot 杂交分析第61页
     ·青蒿 RNA 的提取第61页
     ·目标基因 Quantitative Real-time PCR 分析第61-63页
     ·HPLC-ELSD 测定青蒿素含量第63页
     ·青蒿植株生物量测定第63页
   ·结果分析第63-69页
     ·PCR 阳性检测结果第63-64页
     ·Southern 杂交结果分析第64-65页
     ·转基因青蒿后代中目标基因 CYP71AV1 和 CPR 的表达分析第65-67页
     ·转基因青蒿后代青蒿素含量 HPLC 测定分析第67-68页
     ·青蒿植株生物量测定结果第68-69页
   ·小结和讨论第69-71页
第四章 总结与展望第71-73页
   ·研究总结第71-72页
   ·后续工作展望第72-73页
参考文献第73-83页
致谢第83-84页
攻读学位期间发表的学位论文第84-85页
攻读硕士期间申请的专利第85页

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