摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
目录 | 第11-14页 |
缩略词表 | 第14-17页 |
第一章 前言 | 第17-35页 |
·引言 | 第17-19页 |
·青蒿简介 | 第19-20页 |
·青蒿素生物合成 | 第20-23页 |
·青蒿素代谢调控研究进展 | 第23-27页 |
·过表达关键酶 | 第23-24页 |
·抑制竞争支路酶 | 第24-25页 |
·通过转录因子调控多个基因 | 第25-27页 |
·青蒿腺毛发育研究进展 | 第27-32页 |
·青蒿素在分泌型腺毛中合成 | 第27-28页 |
·青蒿分泌型腺毛形态发育过程 | 第28-29页 |
·HD-ZIP IV 类基因在植物表皮细胞发育中的作用 | 第29-32页 |
·转基因植物的遗传稳定性 | 第32-35页 |
·外源基因的遗传多样性 | 第32-33页 |
·外源基因的表达与沉默 | 第33-35页 |
第二章 AaGL2 基因的克隆及分析 | 第35-59页 |
·实验材料 | 第35-38页 |
·植物材料 | 第35页 |
·菌株和制粒 | 第35页 |
·酶、试剂、试剂盒和引物 | 第35-37页 |
·试剂的配制 | 第37-38页 |
·实验方法 | 第38-48页 |
·青蒿 RNA 的提取 | 第38-39页 |
·青蒿 5’及 3’RACE cDNA 文库的构建 | 第39-40页 |
·青蒿 AaGL2 全长 cDNA 的获得 | 第40-41页 |
·AaGL2 生物信息学分析 | 第41-42页 |
·AaGL2 表达分析 | 第42-43页 |
·AaGL2 蛋白的亚细胞定位 | 第43-44页 |
·AaGL2 转录自激活活性验证 | 第44-45页 |
·AaGL2 拷贝数检测 | 第45-48页 |
·结果与分析 | 第48-58页 |
·AaGL2 基因序列特征 | 第48-49页 |
·AaGL2 是一个 HD-ZIP IV 类转录因子 | 第49-52页 |
·AaGL2 在茎、初期花蕾中特异表达 | 第52-53页 |
·AaGL2 对甲基茉莉酸敏感 | 第53-54页 |
·AaGL2 蛋白定位于细胞核 | 第54-55页 |
·AaGL2 无转录自激活活性 | 第55-57页 |
·AaGL2 在青蒿中有两个拷贝 | 第57-58页 |
·小结和讨论 | 第58-59页 |
第三章 转基因青蒿 GYR32 的遗传分析 | 第59-71页 |
·实验材料 | 第59页 |
·植物材料 | 第59页 |
·酶、试剂盒和引物 | 第59页 |
·实验方法 | 第59-63页 |
·CTAB 法小提植物 DNA | 第59-60页 |
·转基因植株的 PCR 检测 | 第60-61页 |
·Southern blot 杂交分析 | 第61页 |
·青蒿 RNA 的提取 | 第61页 |
·目标基因 Quantitative Real-time PCR 分析 | 第61-63页 |
·HPLC-ELSD 测定青蒿素含量 | 第63页 |
·青蒿植株生物量测定 | 第63页 |
·结果分析 | 第63-69页 |
·PCR 阳性检测结果 | 第63-64页 |
·Southern 杂交结果分析 | 第64-65页 |
·转基因青蒿后代中目标基因 CYP71AV1 和 CPR 的表达分析 | 第65-67页 |
·转基因青蒿后代青蒿素含量 HPLC 测定分析 | 第67-68页 |
·青蒿植株生物量测定结果 | 第68-69页 |
·小结和讨论 | 第69-71页 |
第四章 总结与展望 | 第71-73页 |
·研究总结 | 第71-72页 |
·后续工作展望 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
攻读学位期间发表的学位论文 | 第84-85页 |
攻读硕士期间申请的专利 | 第85页 |