| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-27页 |
| ·青蒿与青蒿素 | 第12-19页 |
| ·青蒿简介 | 第12页 |
| ·青蒿素简介 | 第12-13页 |
| ·青蒿素及其衍生物与疟疾 | 第13-15页 |
| ·青蒿素及其衍生物与癌症 | 第15-17页 |
| ·青蒿素及其衍生物与其他疾病 | 第17页 |
| ·青蒿素含量的决定因素 | 第17-19页 |
| ·提高青蒿中青蒿素含量的意义与方法 | 第19-26页 |
| ·非基因工程方法 | 第19-20页 |
| ·基因工程方法 | 第20-26页 |
| ·本研究的目的及技术路线 | 第26-27页 |
| 第二章 过量表达 DXR 基因、DBR2 基因、ALDH1 基因提高青蒿素含量 | 第27-58页 |
| ·引言 | 第27-28页 |
| ·材料与试剂 | 第28-32页 |
| ·植物材料 | 第28-29页 |
| ·菌株 | 第29页 |
| ·载体、试剂、试剂盒及耗材 | 第29-30页 |
| ·常用试剂、母液及培养基的配制 | 第30-31页 |
| ·引物序列 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-47页 |
| ·青蒿叶片总 RNA 的提取 | 第32-34页 |
| ·青蒿叶片 cDNA 的制备 | 第34-35页 |
| ·PCR 扩增目的基因的编码区 | 第35-36页 |
| ·目的基因编码区片段的回收 | 第36页 |
| ·目的基因表达的亚细胞定位 | 第36-39页 |
| ·目的基因编码区片段与 pMD18-T 载体连接 | 第39-40页 |
| ·大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备 | 第40页 |
| ·目的基因片段与 pMD18-T simple 载体连接后转化大肠杆菌 | 第40-41页 |
| ·大肠杆菌菌落 PCR 鉴定阳性克隆 | 第41-42页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第42-43页 |
| ·根癌农杆菌 EHA105 感受态细胞的制备 | 第43-44页 |
| ·植物表达载体转化根癌农杆菌 EHA105 | 第44页 |
| ·菌落 PCR 鉴定阳性克隆 | 第44-45页 |
| ·青蒿无菌苗的培养 | 第45页 |
| ·根癌农杆菌 EHA105 转化青蒿叶片 | 第45页 |
| ·青蒿再生植株的 PCR 检测鉴定 | 第45-47页 |
| ·转基因青蒿青蒿素含量的检测 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-57页 |
| ·DXR、DBR2、ALDH1 的克隆 | 第47-48页 |
| ·DBR2、ALDH1 的亚细胞定位 | 第48页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第48-50页 |
| ·青蒿的遗传转化及再生 | 第50页 |
| ·青蒿抗性植株的 PCR 检测 | 第50-52页 |
| ·转基因青蒿中青蒿素含量的测定 | 第52-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| 第三章 过量表达 CYP71AV1、CPR、FPS 基因组合提高青蒿素含量 | 第58-82页 |
| ·引言 | 第58-59页 |
| ·材料与试剂 | 第59-61页 |
| ·植物材料 | 第59页 |
| ·菌株 | 第59页 |
| ·载体、试剂、试剂盒及耗材 | 第59-60页 |
| ·常用试剂、母液及培养基的配制 | 第60页 |
| ·引物序列 | 第60-61页 |
| ·方法 | 第61-71页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第61-63页 |
| ·植物表达载体转化青蒿 | 第63-64页 |
| ·Southern blot 检测转基因青蒿基因组水平整合情况 | 第64-69页 |
| ·Real-time PCR 检测过表达基因表达情况 | 第69-71页 |
| ·转基因青蒿青蒿素含量的检测 | 第71页 |
| ·结果 | 第71-78页 |
| ·青蒿素生物合成途径关键酶基因的克隆 | 第71页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第71-72页 |
| ·青蒿的遗传转化及再生 | 第72页 |
| ·青蒿抗性植株的 PCR 检测 | 第72-73页 |
| ·转基因青蒿的 Southern blot 分析 | 第73-76页 |
| ·转基因青蒿的 Real-time PCR 检测 | 第76-77页 |
| ·转基因青蒿中青蒿素含量的测定 | 第77-78页 |
| ·讨论 | 第78-82页 |
| 第四章 总结与展望 | 第82-84页 |
| ·总结 | 第82-83页 |
| ·展望 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第95-96页 |
| 攻读学位期间申请的发明专利 | 第96-99页 |
| 附件 | 第99页 |
