原核表达大肠杆菌硝基还原酶及其多克隆抗体的制备
| 内容提要 | 第1-9页 |
| 第一章:绪论 | 第9-19页 |
| ·基因治疗 | 第9-12页 |
| ·基因治疗的分类方法 | 第9-12页 |
| ·基因转移的方法 | 第12-16页 |
| ·基因转移方法 | 第12-15页 |
| ·选择靶细胞的原则 | 第15-16页 |
| ·自杀基因和自杀基因疗法 | 第16-17页 |
| ·自杀基因疗法药物系统类型 | 第17页 |
| ·本文研究的背景和意义 | 第17-18页 |
| ·本论文研究的内容 | 第18-19页 |
| 第二章 硝基还原酶(NTR)基因的提取及其鉴定 | 第19-30页 |
| ·实验材料 | 第19-21页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·常用试剂配制 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-24页 |
| ·PCR 过程 | 第21-22页 |
| ·从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段 | 第22页 |
| ·限制性内切酶的酶切作用 | 第22页 |
| ·目的基因与载体的连接反应 | 第22页 |
| ·E.coli 感受态的制备 | 第22-23页 |
| ·连接产物转化到E.coli 细胞 | 第23页 |
| ·质粒的小提 | 第23-24页 |
| ·实验结果 | 第24-28页 |
| ·pRSET B 高效表达载体的选择 | 第24-25页 |
| ·目的基因的克隆构建 | 第25-27页 |
| ·重组质粒的构建及酶切鉴定 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 NTR 基因表达及其抗体的制备 | 第30-41页 |
| ·仪器和试剂 | 第30-32页 |
| ·实验仪器 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-38页 |
| ·质粒转化方法 | 第32-33页 |
| ·大肠杆菌TOP10 表达蛋白的预实验 | 第33页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法 | 第33-35页 |
| ·Western Blot 实验方法 | 第35页 |
| ·重组质粒的大量表达 | 第35页 |
| ·样品纯化前处理 | 第35-36页 |
| ·His Trap 柱亲和层析 | 第36页 |
| ·Lowary 法测蛋白浓度 | 第36-37页 |
| ·免疫前抗原的处理 | 第37页 |
| ·免疫家兔 | 第37-38页 |
| ·实验结果与讨论 | 第38-40页 |
| ·蛋白表达及纯化 | 第38-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第四章 论文总结与展望 | 第41-42页 |
| ·全文总结 | 第41页 |
| ·下一步工作计划 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 中文摘要 | 第46-47页 |
| Abstract | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48页 |