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中国对虾整合素β亚基与对虾白斑症病毒(WSSV)感染的相互关系研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 文献综述第13-31页
   ·对虾白斑症病毒病(WSSV)的研究进展第13-24页
     ·WSSV的病原学和流行病学第13-14页
     ·WSSV形态与超微结构第14页
     ·WSSV的主要囊膜蛋白第14-16页
     ·WSSV的主要核衣壳蛋白第16-17页
     ·WSSV基因组第17-22页
     ·WSSV的组织嗜性第22-23页
     ·WSSV的传播,寄主范围和潜在的携带者第23-24页
   ·整合素的研究进展第24-29页
     ·整合素家族的基因结构与进化历史第24-25页
     ·整合素的结构特征第25-26页
     ·整合素的分布和功能第26-27页
     ·内信号调节整合素的亲和力第27-28页
     ·细胞内外信号转导第28页
     ·整合素作为病毒受体的研究第28-29页
   ·本论文的研究目的和意义第29-31页
第二章 中国对虾β-integrin VWA结构域的原核表达第31-41页
   ·实验材料第31-32页
   ·实验方法第32-36页
     ·中国对虾血细胞mRNA的抽提第32-33页
     ·cDNA 模板的合成第33页
     ·FcβInt-VWA表达基因的扩增及纯化第33-34页
     ·表达载体pET32a-FcβInt-VWA的构建第34-35页
     ·表达载体pET32a-FcβInt-VWA的诱导表达第35-36页
     ·重组表达蛋白rFcβInt-VWA及标签蛋白rHis的纯化第36页
   ·实验结果第36-39页
     ·中国对虾血细胞总RNA的提取第36-37页
     ·pET32a-FcβInt-VWA的基因克隆第37-38页
     ·rFcβInt-VWA的诱导表达及纯化第38-39页
   ·讨论第39-40页
 小结第40-41页
第三章 抗中国对虾β-integrin单克隆抗体的生产第41-55页
   ·实验材料第41-42页
   ·实验方法第42-47页
     ·抗中国对虾β-integrin单克隆抗体类型的鉴定第42-44页
     ·抗中国对虾β-integrin单克隆抗体的腹水生产第44-45页
     ·抗中国对虾β-integrin单克隆抗体的特性分析第45-47页
   ·实验结果第47-52页
     ·抗中国对虾β-integrin单克隆抗体的类型第47-48页
     ·腹水的纯化第48-49页
     ·单抗的腹水蛋白浓度及效价测定第49-50页
     ·Dot blotting检测单抗与免疫原的结合特异性第50页
     ·间接免疫荧光法(IFAT)检测单抗与血细胞的结合特异性第50页
     ·Western blotting检测单抗与血细胞膜的结合特异性第50-52页
   ·讨论第52-54页
     ·单抗类型的鉴定第52页
     ·腹水的生产第52-54页
     ·腹水的纯化第54页
     ·单抗的特性分析第54页
 小结第54-55页
第四章 中国对虾β-integrin对白斑症病毒感染的应答研究第55-65页
   ·实验材料第55页
   ·实验方法第55-58页
     ·WSSV的精提第55-56页
     ·WSSV感染及取样第56页
     ·流式细胞免疫荧光分析(FCIFA) 检测FcβInt第56页
     ·间接ELISA检测FcβInt第56-57页
     ·实时荧光定量PCR相对定量检测FcβInt mRNA转录水平第57-58页
     ·实时定量PCR检测病毒粒子拷贝数第58页
   ·结果第58-63页
     ·WSSV感染后对虾血细胞上FcβInt表达动态变化第58-60页
     ·WSSV感染后对虾血细胞中FcβInt蛋白浓度的动态变化第60-61页
     ·WSSV感染后对虾血细胞中FcβInt转录水平的动态变化第61-62页
     ·WSSV感染后对虾血细胞中病毒粒子拷贝数的变化第62-63页
   ·讨论第63-64页
 小结第64-65页
第五章 中国对虾β-integrin与WSSV相互关系研究第65-73页
   ·实验材料第65页
   ·实验方法第65-68页
     ·WSSV囊膜蛋白的诱导表达及纯化第65-66页
     ·VOPBA鉴定具β-integrin 结合活性的WSSV囊膜蛋白第66页
     ·Dot blotting检测FcβInt与重组囊膜蛋白的结合活性第66-67页
     ·WSSV颗粒的地高辛(DIG)标记第67页
     ·ELISA检测β-integrin单抗对WSSV阻断效果第67-68页
     ·Dot blotting检测β-integrin单抗对WSSV阻断效果第68页
   ·实验结果第68-72页
     ·WSSV及其重组囊膜蛋白与β-integrin 的结合活性检测第68-69页
     ·Dot blotting检测FcβInt与重组囊膜蛋白的结合活性第69页
     ·WSSV的DIG标记第69-70页
     ·ELISA检测β-integrin单抗对WSSV阻断效果第70-71页
     ·Dot blotting检测β-integrin单抗对WSSV阻断效果第71-72页
   ·讨论第72页
 小结第72-73页
总结第73-75页
参考文献第75-83页
致谢第83-84页
个人简历第84页
在学期间发表的学术论文与研究成果第84-85页

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