| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-23页 |
| ·蜘蛛丝的介绍 | 第10-13页 |
| ·蜘蛛丝的表达及研究现状 | 第13-17页 |
| ·蛛丝基因的克隆与解析 | 第14-15页 |
| ·表达现状及各类表达系统的选择 | 第15-17页 |
| ·各类方法的尝试 | 第17页 |
| ·蛋白质内含子(intein)的介绍 | 第17-20页 |
| ·蛋白质内含子(inein)结构及分类 | 第17-18页 |
| ·蛋白质内含子(inein)剪接机制 | 第18-20页 |
| ·研究介绍和现阶段实验进程 | 第20-21页 |
| ·研究意义和技术路线 | 第21-23页 |
| 第2章 材料和试剂 | 第23-31页 |
| ·菌种和质粒 | 第23页 |
| ·分子生物学试剂及器材 | 第23-26页 |
| ·培养基及各试剂配制 | 第26-30页 |
| ·表达A. ventrcosus MiSp序列 | 第30-31页 |
| 第3章 方法 | 第31-55页 |
| ·克隆的常规方法 | 第31-36页 |
| ·酵母Pichia pastoris表达体系的构建及表达 | 第36-50页 |
| ·PIC3.5-P1-SXN,PIC3.5-P1-TE3N,PIC3.5-P2-SXC,PIC3.5-P2-TE3C表达载体的构建 | 第36-46页 |
| ·PIC3.5-P1-SXN,PIC3.5-P1-TE3N,PIC3.5-P2-SXC,PIC3.5-P2-TE3C的转化及KM71/GS115阳性克隆鉴定 | 第46-49页 |
| ·GS115：PIC3.5-P1-SXN,GS115：PIC3.5-P2-SXC的表达及优化 | 第49页 |
| ·GS115：PIC3.5-P1-SXN,GS115：PIC3.5-P2-SXC的表达产物的鉴定 | 第49-50页 |
| ·GS115：PIC3.5-P1-SXN,GS115：PIC3.5-P2-SXC的表达产物的纯化 | 第50页 |
| ·对照组大肠杆菌表达体系的构建及表达 | 第50-55页 |
| ·BL21(DE3)：P1-SXN-PET32,P1-SXN-PKT重组子构建及鉴定 | 第50-53页 |
| ·BL21(DE3)：P1-SXN-PET32,P1-SXN-PKT重组表达及纯化 | 第53-55页 |
| 第4章 结果与讨论 | 第55-70页 |
| ·P.pastoris表达系统及E.coil对照组的构建 | 第56-63页 |
| ·P.pastoris表达系统的构建 | 第56-61页 |
| ·E.coil对照组的构建 | 第61-63页 |
| ·P.pastoris表达系统、E.coil对照组的表达与纯化 | 第63-70页 |
| ·P1序列在Ppastoris表达系统、E.coil对照组的表达,优化及纯化 | 第63-68页 |
| ·P2序列在Ppastoris表达系统的优化,表达 | 第68-70页 |
| 第5章 结论 | 第70-73页 |
| 参考文献 | 第73-76页 |
| 硕士期间发表论文和参加科研情况说明 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
