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GbKCS14响应温度调控棉纤维发育的分子机理

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
1.文献综述第10-21页
    1.1 棉纤维发育的研究进展第10-11页
        1.1.1 棉花的资源现状第10页
        1.1.2 棉纤维细胞发育过程第10-11页
    1.2 温度对棉纤维发育的影响第11-13页
        1.2.1 温度是棉纤维发育过程中最重要的环境因子第11-12页
        1.2.2 低温冷害的类型第12-13页
        1.2.3 低温对棉纤维发育影响第13页
    1.3 棉纤维发育与植物激素第13-15页
        1.3.1 生长素第13-14页
        1.3.2 赤霉素第14-15页
        1.3.3 油菜素内酯第15页
        1.3.4 脱落酸与细胞分裂素第15页
    1.4 超长链脂肪酸及KCS家族在纤维伸长过程中的作用第15-18页
        1.4.1 植物脂肪酸的分类第15-16页
        1.4.2 超长链脂肪酸的合成第16页
        1.4.3 超长链脂肪酸在拟南芥等植物中的作用第16-17页
        1.4.4 超长链脂肪酸在棉纤维发育过程中的作用第17页
        1.4.5 KCS家族概述第17页
        1.4.6 KCS家族在拟南芥等植物中的作用第17页
        1.4.7 KCS在棉纤维发育过程中的作用第17-18页
    1.5 DNA甲基化、组蛋白甲基化与基因表达调控第18页
    1.6 立题依据与研究意义第18-19页
    1.7 研究内容与技术路线第19-21页
        1.7.1 研究内容第19-20页
        1.7.2 技术路线第20-21页
2.温度对棉纤维发育的影响第21-27页
    2.1 引言第21页
    2.2 材料与方法第21页
        2.2.1 实验材料第21页
        2.2.2 实验方法第21页
    2.3 结果分析第21-26页
        2.3.1 温度影响海岛棉NLD52的棉绒密度第21-22页
        2.3.2 高温促进纤维伸长,低温抑制纤维伸长第22-23页
        2.3.3 RNA-Seq差异基因筛选第23-25页
        2.3.4 棉纤维发育期GbKCS14的表达受低温诱导第25-26页
    2.4 讨论与小结第26-27页
3.KCS家族生物信息学分析第27-37页
    3.1 引言第27页
    3.2 材料与方法第27-28页
        3.2.1 海岛棉KCS家族成员的鉴定第27页
        3.2.2 海岛棉KCS家族系统进化树的构建第27页
        3.2.3 海岛棉KCS家族成员的特性分析第27-28页
        3.2.4 海岛棉KCS家族基因结构分析及蛋白基序分析第28页
        3.2.5 海岛棉KCS家族表达分析第28页
    3.3 结果与分析第28-36页
        3.3.1 海岛棉KCS基因家族的鉴定第28页
        3.3.2 海岛棉KCS家族的系统发育与基因结构分析第28-30页
        3.3.3 海岛棉KCS家族成员的特性分析第30-33页
        3.3.4 海岛棉KCS家族的蛋白基序分析第33-34页
        3.3.5 海岛棉KCS家族表达分析第34-36页
    3.4 小结与讨论第36-37页
4.GbKCS14的组织特异性表达与亚细胞定位第37-49页
    4.1 引言第37页
    4.2 材料与方法第37-45页
        4.2.1 植物材料第37页
        4.2.2 荧光定量RT-qPCR第37-39页
        4.2.3 基因克隆与载体构建第39-43页
        4.2.4 烟草瞬时转化与电镜观察第43-44页
        4.2.5 生物信息学分析第44-45页
    4.3 结果与分析第45-48页
        4.3.1 GbKCS14克隆结果分析第45页
        4.3.2 GbKCS14序列分析与启动子顺式作用元件分析第45-46页
        4.3.3 GbKCS14的组织特异性表达分析第46-47页
        4.3.4 GbKCS14的亚细胞定位分析第47-48页
    4.4 讨论与小结第48-49页
5.研究GbKCS14与低温的关系第49-68页
    5.1 引言第49页
    5.2 材料与方法第49-61页
        5.2.1 荧光定量RT-qPCR第49页
        5.2.2 McrBC-qPCR第49-51页
        5.2.3 重亚硫酸盐测序第51-53页
        5.2.4 组蛋白甲基化第53-55页
        5.2.5 酵母单杂实验第55-61页
    5.3 结果与分析第61-67页
        5.3.1 GbKCS14在低温下的表达模式第61-62页
        5.3.2 温度影响GbKCS14启动子甲基化水平及组蛋白甲基化水平第62-64页
        5.3.3 REF6 可能是GbKCS14 上游调控因子第64-67页
    5.4 小结与讨论第67-68页
6.GbKCS14遗传材料的获得与表型分析第68-78页
    6.1 引言第68页
    6.2 材料与方法第68-71页
        6.2.1 载体构建与转基因阳性苗的鉴定第68页
        6.2.2 GbKCS14 基因突变体atnhx4 的鉴定第68-69页
        6.2.3 超表达株系及突变体中GbKCS14表达量测定第69页
        6.2.4 超长链脂肪酸含量的测定第69-70页
        6.2.5 IAA含量的测定第70-71页
    6.3 结果与分析第71-77页
        6.3.1 GbKCS14超表达株系的鉴定分析第71-72页
        6.3.2 GbKCS14 基因突变体atnx4 的鉴定分析第72-74页
        6.3.3 GbKCS14 基因突变体atnx4,超表达株系中的表型分析第74-77页
    6.4 小结与讨论第77-78页
7.GbKCS14在棉花中的功能分析第78-88页
    7.1 引言第78页
    7.2 材料与方法第78-80页
        7.2.1 试验材料第78页
        7.2.2 胚珠培养第78-80页
    7.3 结果与分析第80-87页
        7.3.1 不同离体培养环境对纤维发育的影响第80-82页
        7.3.2 不同基因型陆地棉的离体培养第82-84页
        7.3.3 海岛棉离体培养条件的摸索第84-87页
    7.4 小结与讨论第87-88页
8.总结与展望第88-90页
    8.1 总结第88-89页
    8.2 展望第89-90页
参考文献第90-98页
附录1第98-103页
附录2第103-106页
个人简介第106-107页
致谢第107页

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