| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 一、引言 | 第13-22页 |
| ·NAC转录因子研究进展 | 第14-17页 |
| ·NAC转录因子的分类 | 第14页 |
| ·NAC基因和蛋白的分子结构 | 第14-15页 |
| ·NAC转录因子的作用机制 | 第15-17页 |
| ·NAC转录因子生物学功能 | 第17-20页 |
| ·NAC转录因子在植物逆境胁迫应答过程中的作用 | 第17-18页 |
| ·NAC转录因子在病原胁迫下的应答 | 第18-19页 |
| ·NAC转录因子参与调控次生壁增厚 | 第19页 |
| ·NAC转录因子在分生组织及花器官发育中的作用 | 第19-20页 |
| ·NAC转录因子在侧根形成中的作用 | 第20页 |
| ·本文立题依据及研究的目的意义 | 第20-22页 |
| 二、材料与方法 | 第22-39页 |
| ·实验材料 | 第22-26页 |
| ·菌种和载体 | 第22页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·化学试剂及其它材料 | 第22-23页 |
| ·工具酶 | 第23页 |
| ·常用储存液 | 第23页 |
| ·常用缓冲液 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第24-25页 |
| ·PCR分析扩增试剂 | 第25页 |
| ·DNA测序 | 第25-26页 |
| ·仪器设备 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-39页 |
| ·油菜无菌苗的培养及材料的收取 | 第26页 |
| ·油菜总RNA提取、纯化、逆转录反应 | 第26-28页 |
| ·基因的分离 | 第28-29页 |
| ·菌液测序及基因结构分析 | 第29页 |
| ·基因序列分析 | 第29-30页 |
| ·实时定量RT-PCR分析 | 第30-31页 |
| ·拟南芥gDNA的提取 | 第31页 |
| ·BnNAC2/5基因DNA全长序列的分离克隆 | 第31-33页 |
| ·拟南芥的培养以及农杆菌介导的遗传转化 | 第33-34页 |
| ·Genome Walker PCR方法调取BnNAC2启动子 | 第34页 |
| ·proBnNAC2-GUS融合载体的构建及拟南芥的转化 | 第34-35页 |
| ·proBnNAC2-GUS的转基因拟南芥的GUS染色分析 | 第35页 |
| ·BnNAC2/5蛋白的转录激活检测 | 第35-37页 |
| ·裂殖酵母转化试验 | 第37-39页 |
| 三、实验结果 | 第39-59页 |
| ·油菜BnNAC基因表达分析与克隆鉴定 | 第39-41页 |
| ·油菜BnNAC2和BnNAC5与其他植物NAC蛋白的系统进化分析 | 第41-42页 |
| ·油菜BnNAC与其他植物NAC蛋白的蛋白质序列分析 | 第42-44页 |
| ·油菜BnNAC2和BnNAC5基因的结构分析 | 第44-45页 |
| ·油菜BnNAC2和BnNAC5基因的组织表达分析 | 第45-46页 |
| ·提取油菜不同组织的RNA | 第45-46页 |
| ·两个BnNAC基因在油菜不同组织中的差异表达 | 第46页 |
| ·BnNAC2基因启动子的分离及其表达模式 | 第46-49页 |
| ·BnNAC2启动子序列分析 | 第46-47页 |
| ·BnNAC2启动子活性检测 | 第47-49页 |
| ·油菜BnNAC2和BnNAC5蛋白的转录激活功能分析 | 第49-53页 |
| ·BD-BnNAC2/5的载体构建及酵母转化 | 第49-50页 |
| ·BnNAC2和BnNAC5的转录激活功能检测 | 第50-51页 |
| ·BnNAC5与同源基因AtNAC5(AtNAC83)氨基酸序列比对 | 第51页 |
| ·拟南芥AtNAC5基因的调取及载体构建 | 第51-52页 |
| ·拟南芥AtNAC5蛋白的转录激活分析 | 第52-53页 |
| ·过量表达BnNAC2和BnNAC5基因增强酵母对盐和干旱的敏感性 | 第53-56页 |
| ·酵母过量表达载体pREP5N-BnNAC2/5的构建 | 第53页 |
| ·酵母转化以及阳性转化子的鉴定 | 第53-54页 |
| ·转基因酵母转化在NaCl和mannitol处理下的生长状态分析 | 第54-56页 |
| ·拟南芥AtNAC5突变体鉴定 | 第56-57页 |
| ·拟南芥AtNAC5表型分析 | 第57-59页 |
| 四、讨论 | 第59-63页 |
| ·油菜BnNAC2和BnNAC5基因及其编码蛋白的结构特点 | 第59-60页 |
| ·油菜BnNAC2和BnNAC5基因的组织差异表达 | 第60页 |
| ·油菜BnNAC2和BnNAC5基因受NaC1,Mannitol和ABA的诱导表达 | 第60-61页 |
| ·油菜BnNAC2和BnNAC5蛋白的转录激活分析 | 第61页 |
| ·油菜BnNAC2和BnNAC5基因在裂殖酵母中过量表达分析 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 在校期间发表的论文 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
