| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 本文缩写符号 | 第10-14页 |
| 一、引言 | 第14-27页 |
| ·植物NAC转录因子的研究进展 | 第14-21页 |
| ·植物NAC转录因子的分类和结构 | 第14-16页 |
| ·植物NAC转录因子的生物学功能 | 第16-20页 |
| ·植物NAC转录因子的表达调控 | 第20-21页 |
| ·植物次生细胞壁的研究进展 | 第21-25页 |
| ·高等植物次生细胞壁的组成及其应用价值 | 第22-23页 |
| ·高等植物次生细胞壁的发育机制研究进展 | 第23-25页 |
| ·立题依据及研究意义 | 第25-27页 |
| 二、材料与方法 | 第27-45页 |
| ·实验材料 | 第27-29页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·菌种和质粒 | 第27页 |
| ·化学试剂 | 第27页 |
| ·工具酶 | 第27页 |
| ·常用储存液 | 第27页 |
| ·常用缓冲液 | 第27-28页 |
| ·培养基 | 第28页 |
| ·棉花总RNA的提取试剂 | 第28页 |
| ·酵母双杂交所用试剂 | 第28-29页 |
| ·PCR分析扩增试剂 | 第29页 |
| ·仪器设备 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-45页 |
| ·拟南芥的栽培以及农杆菌介导的遗传转化 | 第29-30页 |
| ·拟南芥gDNA的提取 | 第30-31页 |
| ·拟南芥总RNA的提取、纯化以及逆转录 | 第31-32页 |
| ·棉花各组织材料的收取 | 第32页 |
| ·棉花基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞制备 | 第33页 |
| ·碱裂解法质粒DNA的抽提 | 第33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳中DNA片段的回收 | 第33页 |
| ·棉花cDNA序列的分离及基因结构分析 | 第33-35页 |
| ·棉花的蛋白序列及进化同源性分析 | 第35页 |
| ·棉花基因组织表达以及诱导表达模式分析 | 第35-37页 |
| ·GhNAC1蛋白的转录自激活分析及酵母双杂交筛选棉花10DPA纤维cDNA文库 | 第37-40页 |
| ·GhNAC1-eGFP融合载体的构建以及eGFP观察 | 第40页 |
| ·GhNAC1过量表达载体的构建及转基因拟南芥的表型分析 | 第40-41页 |
| ·次生壁发育相关Marker基因的RT-PCR分析 | 第41-42页 |
| ·proGhNAC8-GUS转基因拟南芥鉴定以及GUS化学染色 | 第42-45页 |
| 三、实验结果 | 第45-65页 |
| ·棉花GhNAC1蛋白的结构与进化分析 | 第45-47页 |
| ·棉花GhNAC蛋白的系统进化分析 | 第45-46页 |
| ·棉花GhNAC1同源性分析 | 第46-47页 |
| ·棉花GhNAC1基因结构分析 | 第47页 |
| ·棉花GhNAC1转录自激活分析 | 第47-50页 |
| ·pGBKT7-GhNAC1分段验证自激活载体的构建 | 第47-48页 |
| ·阳性酵母转化子的鉴定 | 第48-49页 |
| ·GhNAC1自激活的检测 | 第49-50页 |
| ·棉花GhNAC1亚细胞定位分析 | 第50-51页 |
| ·GhNAC1-eGFP融合载体的构建和拟南芥转化 | 第50-51页 |
| ·GhNAC1-eGFP融合蛋白的荧光定位观察 | 第51页 |
| ·GhNAC1过量表达转基因拟南芥的表型分析 | 第51-55页 |
| ·GhNAC1过量表达载体的构建 | 第51-52页 |
| ·GhNAC1过量表达转基因拟南芥的鉴定 | 第52-53页 |
| ·GhNAC1过量转基因拟南芥诱导次生壁异位积累 | 第53-54页 |
| ·与次生壁发育相关基因在转基因拟南芥中的表达分析 | 第54-55页 |
| ·棉花GhNAC1相互作用蛋白的筛选 | 第55-57页 |
| ·诱饵蛋白GhNAC1对宿主毒性的检测 | 第55-56页 |
| ·文库筛选及阳性克隆的筛选鉴定 | 第56页 |
| ·阳性克隆的测序结果分析 | 第56-57页 |
| ·其它GhNAC基因表达初步分析 | 第57-65页 |
| ·GhNAC蛋白的系统进化分析 | 第57-58页 |
| ·GhNAC基因组织表达模式分析 | 第58-59页 |
| ·GhNAC基因胁迫诱导表达模式分析 | 第59-60页 |
| ·GhNAC8的基因结构及转录自激活分析 | 第60-62页 |
| ·GhNAC8的启动子序列及表达活性分析 | 第62-65页 |
| 四、讨论 | 第65-70页 |
| ·GhNAC1转录因子参与了棉花纤维次生壁发育 | 第65-68页 |
| ·GhNAC1属于典型的植物NAC转录因子家族 | 第65-66页 |
| ·GhNAC1可能调节棉纤维细胞次生壁合成 | 第66页 |
| ·GhNAC1调节棉纤维细胞次生壁合成的可能调控网络 | 第66-67页 |
| ·GhNAC1蛋白在细胞内形成二聚体且可能受泛素化调节 | 第67-68页 |
| ·其它GhNAC基因的表达及可能的功能分析 | 第68-70页 |
| ·其它GhNAC基因的表达模式分析 | 第68-69页 |
| ·GhNAC8的结构特征及功能分析 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-77页 |
| 在校期间发表的论文及参加的学术会议 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
