摘要 | 第1-9页 |
引言 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-18页 |
1 CART的研究进展 | 第10-13页 |
·CART的由来 | 第10页 |
·CART的结构和分布 | 第10-11页 |
·CART的结构 | 第10页 |
·CART的分布 | 第10-11页 |
·CART的生物学机制 | 第11-13页 |
·CART与药物成瘾的关系 | 第11页 |
·CART与Ⅱ型糖尿病的关联 | 第11-12页 |
·CART与食欲的关系 | 第12页 |
·CART对激素的调节 | 第12-13页 |
·CART在繁殖中的研究 | 第13页 |
2 禽类卵泡的生长发育 | 第13-18页 |
·禽类卵泡的发育特点 | 第13-14页 |
·卵子的发生及卵泡发育 | 第14-15页 |
·卵子发生 | 第14页 |
·卵泡发育 | 第14-15页 |
·禽类卵泡发育的调控 | 第15-18页 |
·卵泡发育的内分泌调控 | 第15-17页 |
·促性腺激素的调控 | 第15-16页 |
·类固醇激素的调控 | 第16-17页 |
·卵泡发育的局部调控 | 第17-18页 |
·胰岛素样生长因子-Ⅰ对禽类卵泡发育的调控 | 第17页 |
·表皮生长因子(EGF)对禽类卵泡发育的调控 | 第17-18页 |
第二章 蛋鸡卵巢内CART基因的克隆及序列分析 | 第18-29页 |
1 材料与方法 | 第18-19页 |
·试验动物 | 第18页 |
·试验主要试剂及配制 | 第18-19页 |
·主要试剂 | 第18页 |
·试验所需主要试剂的配制 | 第18-19页 |
·试验所需主要仪器 | 第19页 |
2 试验方法 | 第19-24页 |
·蛋鸡小白卵泡总RNA的提取与检测 | 第19-21页 |
·小白卵泡组织总RNA的提取 | 第19-20页 |
·总RNA完整性及浓度的鉴定 | 第20-21页 |
·总RNA电泳检测 | 第20页 |
·RNA浓度的测定 | 第20-21页 |
·反转录反应 | 第21页 |
·去除RNA中基因组DNA | 第21页 |
·合成cDNA第一条链 | 第21页 |
·引物设计与PCR反应 | 第21-22页 |
·引物的设计 | 第21页 |
·PCR反应 | 第21-22页 |
·凝胶电泳检测 | 第22页 |
·PCR产物回收、纯化与检测 | 第22-23页 |
·DNA回收 | 第22页 |
·回收DNA的检测 | 第22-23页 |
·基因克隆与测序 | 第23-24页 |
·目的片段与载体的连接转化 | 第23-24页 |
·测序 | 第24页 |
·鸡CART基因cDNA序列分析 | 第24页 |
3 结果与分析 | 第24-27页 |
·蛋鸡卵巢小白卵泡总RNA的提取结果 | 第24-25页 |
·PCR扩增电泳结果 | 第25-26页 |
·DNA回收纯化结果 | 第26页 |
·CART基因克隆产物测序结果 | 第26页 |
·同源性比对结果 | 第26-27页 |
4 讨论 | 第27-28页 |
5 小结 | 第28-29页 |
第三章 CART在蛋鸡卵巢卵泡中的定位研究 | 第29-33页 |
1 材料与方法 | 第29-30页 |
·试验动物及其组织 | 第29页 |
·试验主要试剂及配制 | 第29-30页 |
·主要试剂 | 第29页 |
·试验所需主要试剂的配制 | 第29-30页 |
·试验所需主要仪器 | 第30页 |
2 试验方法 | 第30-31页 |
·切片的制备 | 第30页 |
·免疫组织化学 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-32页 |
4 讨论 | 第32页 |
5 小结 | 第32-33页 |
第四章 CART基因在不同大小卵泡中的表达 | 第33-40页 |
1 材料与方法 | 第33页 |
·试验动物及其组织 | 第33页 |
·试验用卵泡的分离 | 第33页 |
·颗粒细胞和膜细胞的分离 | 第33页 |
·试验主要试剂及仪器 | 第33页 |
2 试验方法 | 第33-35页 |
·颗粒细胞与膜细胞总RNA的提取与检测分析 | 第33-34页 |
·设计与合成引物 | 第34页 |
·目的基因CART荧光定量PCR反应 | 第34-35页 |
·统计学分析 | 第35页 |
3 结果与分析 | 第35-38页 |
·颗粒细胞荧光定量结果 | 第35-36页 |
·扩增曲线结果 | 第35页 |
·熔解曲线结果 | 第35-36页 |
·不同大小卵泡颗粒细胞内CART mRNA的表达差异 | 第36页 |
·膜细胞荧光定量结果 | 第36-38页 |
·扩增曲线结果 | 第36-37页 |
·熔解曲线结果 | 第37页 |
·不同大小卵泡膜细胞内CART mRNA的表达差异 | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38-39页 |
5 小结 | 第39-40页 |
全文结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
Abstract | 第45-47页 |
致谢 | 第47页 |