黄瓜离体再生和遗传转化体系的建立
| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-27页 |
| ·黄瓜离体培养研究进展 | 第11-16页 |
| ·植物离体再生途径 | 第11-12页 |
| ·黄瓜离体培养的影响因素 | 第12-16页 |
| ·基因型 | 第12-13页 |
| ·苗龄 | 第13页 |
| ·外植体 | 第13-14页 |
| ·激素 | 第14-16页 |
| ·硝酸银 | 第16页 |
| ·黄瓜遗传转化研究进展 | 第16-24页 |
| ·遗传转化的方法 | 第16-21页 |
| ·农杆菌介导法 | 第16-20页 |
| ·根癌农杆菌介导的原理 | 第17-18页 |
| ·影响农杆菌T-DNA转移的因素 | 第18-20页 |
| ·脂质体转化法 | 第20页 |
| ·基因枪法 | 第20页 |
| ·花粉管通道法 | 第20页 |
| ·Floral dip法 | 第20页 |
| ·超声波法 | 第20-21页 |
| ·黄瓜遗传转化应用现状 | 第21-24页 |
| ·黄瓜抗病虫遗传转化研究 | 第21-22页 |
| ·黄瓜抗逆遗传转化研究 | 第22-23页 |
| ·其它 | 第23-24页 |
| ·Bi基因研究概况 | 第24-25页 |
| ·研究目的与意义 | 第25-27页 |
| 第二章 黄瓜再生体系的优化 | 第27-35页 |
| ·材料与方法 | 第27页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·无菌苗的培养 | 第27页 |
| ·种子催芽 | 第27页 |
| ·外植体的选择与处理 | 第27页 |
| ·芽诱导培养 | 第27-29页 |
| ·芽伸长培养 | 第29页 |
| ·生根培养 | 第29页 |
| ·结果和分析 | 第29-33页 |
| ·激素对黄瓜子叶块离体再生的影响 | 第32页 |
| ·基因型对子叶块离体再生的影响 | 第32-33页 |
| ·6-BA和GA_3对不定芽伸长的影响比较 | 第33页 |
| ·再生植株的生根 | 第33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 BI基因表达载体的构建 | 第35-41页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·菌株与载体 | 第35页 |
| ·培养基及生化试剂 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-38页 |
| ·总RNA的提取 | 第36页 |
| ·总RNA定量与完整性检测 | 第36页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第36页 |
| ·Bi基因的获得 | 第36-37页 |
| ·Bi表达载体的构建 | 第37页 |
| ·农杆菌的转化 | 第37-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-41页 |
| ·pCMBIA1300-Bi表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·pCAMBIA1300-Bi的农杆菌转化 | 第39-41页 |
| 第四章 BI基因的遗传转化 | 第41-53页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·植物材料 | 第41页 |
| ·培养基及其它生化试剂 | 第41页 |
| ·农杆菌菌液的制备 | 第41-42页 |
| ·Bi转化黄瓜G8 | 第42-43页 |
| ·潮霉素(Hyg)选择压的确定 | 第42页 |
| ·外植体预培养 | 第42页 |
| ·农杆菌侵染及共培养 | 第42页 |
| ·再生植株的抗性筛选 | 第42-43页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第43页 |
| ·抗性植株总DNA的提取 | 第43页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第43页 |
| ·Bi差异表达分析 | 第43-44页 |
| ·总RNA的提取 | 第43-44页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第44页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第44页 |
| ·结果和分析 | 第44-50页 |
| ·潮霉素(Hyg)对外植体分化的影响 | 第44-45页 |
| ·侵染时间对抗性芽再生的影响 | 第45-46页 |
| ·共培养基中附加AS对抗性芽再生的影响 | 第46-47页 |
| ·转Bi基因黄瓜植株的获得与分子鉴定 | 第47-50页 |
| ·转基因黄瓜植株的获得 | 第47页 |
| ·转基因黄瓜植株的PCR检测 | 第47-48页 |
| ·转基因黄瓜植株BimRNA的表达分析 | 第48页 |
| ·转Bi基因黄瓜植株叶子中萌声素C液相色谱测分析 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-53页 |
| 全文结论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 附录 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
