目录 | 第1-6页 |
缩略词表 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
前言 | 第13-16页 |
第一章 丙型肝炎病毒型别特异性抗原的克隆表达及纯化 | 第16-39页 |
1 材料和方法 | 第16-24页 |
·实验材料 | 第16-19页 |
·菌株及质粒 | 第16页 |
·工具酶与试剂盒 | 第16页 |
·试剂 | 第16页 |
·主要仪器设备 | 第16-17页 |
·主要配制试剂 | 第17-19页 |
·实验方法 | 第19-24页 |
·抗原表位分析 | 第19页 |
·原核表达载体的构建 | 第19-22页 |
·退火延伸PCR法合成HCV血清I、Ⅱ型抗原基因 | 第19-20页 |
·PCR产物的回收 | 第20页 |
·PGEX-4T-2 质粒抽取 | 第20-21页 |
·酶切 | 第21页 |
·连接 | 第21页 |
·连接产物的转化及阳性克隆的鉴定 | 第21-22页 |
·产物序列测定 | 第22页 |
·工程菌的诱导 | 第22-23页 |
·蛋白的纯化 | 第23页 |
·抗原纯度测定 | 第23页 |
·抗原活性鉴定 | 第23-24页 |
·抗原交叉反应性鉴定 | 第24页 |
·统计分析 | 第24页 |
2 实验结果 | 第24-36页 |
·HCV 型别特异性抗原表位的确定 | 第24-27页 |
·HCV血清I、Ⅱ型基因片段的获得 | 第27-28页 |
·表达载体的构建及鉴定 | 第28-30页 |
·目的蛋白的纯化及纯度分子量鉴定 | 第30-32页 |
·抗原活性鉴定 | 第32-34页 |
·抗原交叉反应性鉴定 | 第34-36页 |
3 讨论 | 第36-39页 |
第二章 丙型肝炎病毒血清学分型方法的建立及优化 | 第39-55页 |
1 材料与方法 | 第39-44页 |
·材料 | 第39-40页 |
·仪器设备 | 第39页 |
·试剂配制 | 第39-40页 |
·实验方法 | 第40-44页 |
·封闭液的确定 | 第40-41页 |
·酶结合物的确定 | 第41页 |
·竞争抗原浓度的确定 | 第41页 |
·竞争抗原稀释液的确定 | 第41-42页 |
·不中和孔cut-off值的确定 | 第42页 |
·抗原的组合配对 | 第42-44页 |
2 实验结果 | 第44-52页 |
·封闭液的确定 | 第44页 |
·酶结合物的确定 | 第44-45页 |
·竞争抗原浓度的确定 | 第45-46页 |
·竞争抗原稀释液的确定 | 第46页 |
·不中和孔cut-off值的确定 | 第46-47页 |
·抗原的组合配对 | 第47-52页 |
3 讨论 | 第52-55页 |
第三章 丙型肝炎病毒血清学分型方法的初步临床评价 | 第55-66页 |
1 材料与方法 | 第55-58页 |
·材料 | 第55-56页 |
·标本来源 | 第55页 |
·仪器设备 | 第55页 |
·试剂配制 | 第55-56页 |
·实验方法 | 第56-58页 |
·血清处理 | 第56页 |
·HCV RNA 检测 | 第56页 |
·HCV基因分型 | 第56页 |
·抗HCV 检测 | 第56-57页 |
·HCV 血清分型检测 | 第57-58页 |
·统计分析 | 第58页 |
·与其他肝病患者血清的交叉反应 | 第58页 |
2 实验结果 | 第58-64页 |
·抗HCV抗体及HCV RNA 检测 | 第58页 |
·HCV 基因分型 | 第58页 |
·HCV 血清分型 | 第58-63页 |
·HCV血清型与基因型的符合率 | 第63页 |
·年龄、抗体S/Co 、HCV RNA与分型间的关系 | 第63-64页 |
·与其他肝病患者血清的交叉反应 | 第64页 |
3 讨论 | 第64-66页 |
结论 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
个人简历 | 第72-74页 |
文献综述 | 第74-83页 |
参考文献 | 第78-83页 |
附 发表论文 | 第83-93页 |