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丙型肝炎病毒血清学分型方法的建立及初步临床评价

目录第1-6页
缩略词表第6-7页
摘要第7-10页
Abstract第10-13页
前言第13-16页
第一章 丙型肝炎病毒型别特异性抗原的克隆表达及纯化第16-39页
 1 材料和方法第16-24页
   ·实验材料第16-19页
     ·菌株及质粒第16页
     ·工具酶与试剂盒第16页
     ·试剂第16页
     ·主要仪器设备第16-17页
     ·主要配制试剂第17-19页
   ·实验方法第19-24页
     ·抗原表位分析第19页
     ·原核表达载体的构建第19-22页
       ·退火延伸PCR法合成HCV血清I、Ⅱ型抗原基因第19-20页
       ·PCR产物的回收第20页
       ·PGEX-4T-2 质粒抽取第20-21页
       ·酶切第21页
       ·连接第21页
       ·连接产物的转化及阳性克隆的鉴定第21-22页
       ·产物序列测定第22页
     ·工程菌的诱导第22-23页
     ·蛋白的纯化第23页
     ·抗原纯度测定第23页
     ·抗原活性鉴定第23-24页
     ·抗原交叉反应性鉴定第24页
     ·统计分析第24页
 2 实验结果第24-36页
   ·HCV 型别特异性抗原表位的确定第24-27页
   ·HCV血清I、Ⅱ型基因片段的获得第27-28页
   ·表达载体的构建及鉴定第28-30页
   ·目的蛋白的纯化及纯度分子量鉴定第30-32页
   ·抗原活性鉴定第32-34页
   ·抗原交叉反应性鉴定第34-36页
 3 讨论第36-39页
第二章 丙型肝炎病毒血清学分型方法的建立及优化第39-55页
 1 材料与方法第39-44页
   ·材料第39-40页
     ·仪器设备第39页
     ·试剂配制第39-40页
   ·实验方法第40-44页
     ·封闭液的确定第40-41页
     ·酶结合物的确定第41页
     ·竞争抗原浓度的确定第41页
     ·竞争抗原稀释液的确定第41-42页
     ·不中和孔cut-off值的确定第42页
     ·抗原的组合配对第42-44页
 2 实验结果第44-52页
   ·封闭液的确定第44页
   ·酶结合物的确定第44-45页
   ·竞争抗原浓度的确定第45-46页
   ·竞争抗原稀释液的确定第46页
   ·不中和孔cut-off值的确定第46-47页
   ·抗原的组合配对第47-52页
 3 讨论第52-55页
第三章 丙型肝炎病毒血清学分型方法的初步临床评价第55-66页
 1 材料与方法第55-58页
   ·材料第55-56页
     ·标本来源第55页
     ·仪器设备第55页
     ·试剂配制第55-56页
   ·实验方法第56-58页
     ·血清处理第56页
     ·HCV RNA 检测第56页
     ·HCV基因分型第56页
     ·抗HCV 检测第56-57页
     ·HCV 血清分型检测第57-58页
     ·统计分析第58页
     ·与其他肝病患者血清的交叉反应第58页
 2 实验结果第58-64页
   ·抗HCV抗体及HCV RNA 检测第58页
   ·HCV 基因分型第58页
   ·HCV 血清分型第58-63页
   ·HCV血清型与基因型的符合率第63页
   ·年龄、抗体S/Co 、HCV RNA与分型间的关系第63-64页
   ·与其他肝病患者血清的交叉反应第64页
 3 讨论第64-66页
结论第66-68页
参考文献第68-71页
致谢第71-72页
个人简历第72-74页
文献综述第74-83页
 参考文献第78-83页
附 发表论文第83-93页

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