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猫E3复合体在原核系统中的表达与纯化

中文摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第1章 引言第12-22页
   ·猫免疫缺陷病毒(FIV)及其研究现状第12-14页
     ·猫免疫缺陷病毒简介第12-13页
     ·FIV 的研究意义第13-14页
   ·蛋白的共表达与蛋白质的结晶研究第14-15页
   ·猫 E3 复合体及 Vif 蛋白研究现状第15-19页
     ·E3 复合体简介第15-16页
     ·HIV-1 Vif 蛋白的研究第16-17页
     ·FIV Vif 蛋白的研究第17-18页
     ·猫 E3 复合体的 ElonginB、ElonginC 蛋白第18-19页
   ·CBF-β的发现及研究进展第19-20页
   ·立题依据和实验设计第20-22页
第2章 实验材料与方法第22-34页
   ·材料及实验试剂第22-28页
     ·基因,质粒及相关重组质粒的构建第22-25页
     ·相关抗体及蛋白纯化柱第25-26页
     ·主要试剂及配方第26-28页
   ·主要仪器及设备第28-29页
   ·实验方法第29-34页
     ·细胞培养及转染第29页
     ·免疫印迹(Western blotting)分析第29-30页
     ·免疫沉淀第30-31页
     ·原核细胞蛋白表达第31页
     ·原核细胞蛋白纯化第31-34页
第3章 结果与讨论第34-63页
   ·FIV Vif 介导的 E3 复合体研究第34-41页
     ·原核表达载体及 FIV Vif 单独表达与纯化研究第34-36页
     ·猫 E3 复合物在原核系统中的构建与表达第36-39页
     ·讨论第39-40页
     ·小结第40-41页
   ·猫 E3 复合物中 FIV Vif 截短体的设计与构建第41-47页
     ·针对 FIV Vif 的截短体设计依据第41-43页
     ·FIV Vif 的截短体融合蛋白的构建第43-45页
     ·讨论第45-46页
     ·小结第46-47页
   ·FIV Vif 截短体、ElonginB、ElonginC 融合蛋白的表达纯化第47-57页
     ·pST39-FVifdN24-EC-EB 的表达与纯化第47-49页
     ·pST39-FVifdN149-EC-EB 的表达与纯化第49-52页
     ·FVifdN115/dN183-EC-EB 的表达与纯化第52-53页
     ·dN8/dC241,dN8/dC226,dN30/dC241,dN60/dC241 表达与纯化第53-56页
     ·讨论第56-57页
     ·小结第57页
   ·原核系统中 FIV Vif 与 CBF-β的相互作用研究第57-62页
     ·FVif-EB-EC-CBF-β融合蛋白原核载体构建第58-59页
     ·FVif-EB-EC-CBF-β融合蛋白表达与纯化第59-61页
     ·讨论第61-62页
   ·真核系统中 FIV Vif 与 CBF-β的相互作用研究第62-63页
讨论第63-66页
结论第66-67页
参考文献第67-71页
作者简介第71-72页
致谢第72页

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