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羊种布氏杆菌单克隆抗体的制备及其对临床分离株的检测

中文摘要第1-6页
Abstract第6-14页
第1章 前言第14-26页
   ·布氏杆菌病的概况第14-15页
     ·布氏杆菌病原学特性第14-15页
     ·布氏杆菌的致病性第15页
   ·布病流行病学研究第15-16页
     ·布病流行现状第15-16页
     ·布病流行特征第16页
   ·布病的危害第16-17页
   ·布病的诊断第17-19页
     ·布病实验室诊断方法第17-19页
   ·布病的防治第19-21页
     ·布病的预防控制第20-21页
     ·布病的治疗第21页
   ·单克隆抗体的研究及制备现状第21-23页
     ·单克隆抗体研究现状第21-22页
     ·单克隆抗体的制备第22-23页
   ·单克隆抗体应用前景第23-24页
     ·单克隆抗体用于疾病的诊断和治疗第23-24页
     ·单克隆抗体用于动物疾病第24页
   ·布氏杆菌单克隆抗体的研究及应用现状第24-25页
     ·布氏杆菌单克隆抗体的研究现状第24-25页
     ·布氏杆菌单克隆抗体的应用第25页
   ·本研究的目的意义第25-26页
第2章 材料方法第26-38页
   ·材料第26-28页
     ·菌株第26页
     ·实验动物第26页
     ·细胞第26页
     ·主要试剂第26-27页
     ·主要仪器第27-28页
   ·实验方法第28-38页
     ·间接 ELISA 方法的建立第28-30页
     ·羊种布氏杆菌 16M、 M5 的培养第30页
     ·动物免疫第30-31页
     ·免疫小鼠血清效价的检测第31页
     ·杂交瘤细胞株的建立第31-34页
     ·单克隆抗体的提纯第34-36页
     ·单克隆抗体的鉴定与检测第36-37页
     ·单克隆抗体的应用第37-38页
第3章 结果第38-49页
   ·间接 ELISA 方法的建立第38-40页
     ·包被抗原处理方式的选择第38页
     ·酶标二抗特异性鉴定第38-39页
     ·包被抗原最佳浓度的选择第39页
     ·酶标二抗最佳工作浓度的确定第39-40页
   ·动物免疫第40-41页
     ·免疫抗原羊种布氏杆菌 M5 全菌悬液的制备第40页
     ·免疫小鼠血清抗体效价测定第40-41页
   ·杂交瘤细胞株的建立第41-42页
     ·细胞融合第41-42页
     ·杂交瘤细胞株的筛选及亚克隆第42页
   ·单克隆抗体的纯化第42-44页
     ·单克隆抗体不同方法的纯化第42-43页
     ·单克隆抗体的 SDS-PAGE 电泳第43-44页
     ·纯化前后单克隆抗体效价的测定第44页
   ·单克隆抗体鉴定与检测第44-46页
     ·单克隆抗体特异性鉴定第44-45页
     ·单克隆抗体亚类鉴定第45-46页
     ·杂交瘤细胞 6D3 稳定性检测第46页
   ·单克隆抗体在检测分离株中的应用第46-49页
     ·22 例患者背景资料第46-47页
     ·单克隆抗体应用于分离株的检测第47页
     ·单克隆抗体应用于检测分离株的验证第47-49页
第4章 讨论第49-57页
   ·ELISA 方法的建立第49页
   ·关于动物免疫第49-50页
     ·抗原的制备及动物免疫第49-50页
     ·关于动物免疫小结第50页
   ·杂交瘤细胞的建立第50-54页
     ·饲养细胞的制备第50-51页
     ·细胞融合第51-52页
     ·阳性杂交瘤细胞的筛选及亚克隆第52-53页
     ·单克隆细胞的扩大培养及冻存、复苏第53页
     ·关于建立杂交瘤细胞株小结第53-54页
   ·单克隆抗体的纯化和鉴定第54-55页
     ·单克隆抗体的纯化第54页
     ·单克隆抗体特异性及亚类鉴定第54-55页
     ·单克隆抗体稳定性检测第55页
     ·单抗的纯化与鉴定小结第55页
   ·单克隆抗体的应用第55-57页
第5章 结论第57-58页
参考文献第58-66页
攻读学位期间发表的学术论文及科研成果第66-67页
致谢第67页

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