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紫花苜蓿中MsERD15基因的载体构建与表达分析

致谢第4-9页
摘要第9-11页
1 文献综述第11-24页
    1.1 ABA的生物合成第11-12页
    1.2 外源ABA对植物生长发育的影响第12-17页
        1.2.1 外源ABA对种子萌发的影响以及应用第12-14页
            1.2.1.1 外源ABA促进种子的休眠及应用第12-13页
            1.2.1.2 外源ABA促进种子萌发第13-14页
        1.2.2 外源ABA对幼苗的生长发育的影响以及应用第14页
        1.2.3 外源ABA对植物根系发育的影响以及应用第14-15页
        1.2.4 外源ABA与植物生殖发育的影响第15-17页
            1.2.4.1 外源ABA对花芽的影响第15页
            1.2.4.2 外源ABA对果实成熟的影响第15-16页
            1.2.4.3 外源ABA与花果品质的关系第16-17页
    1.3 ABA在植物胁迫过程中的作用第17-18页
        1.3.1 外源ABA在生物胁迫中的作用第17页
        1.3.2 ABA对渗透性胁迫的响应第17-18页
            1.3.2.1 外源ABA对低温胁迫的作用第17页
            1.3.2.2 外源ABA对干旱、高温和高盐胁迫的作用第17-18页
    1.4 外源ABA的其他应用第18页
    1.5 外源ABA响应胁迫的主要生理作用第18-19页
    1.6 植物胁迫中ABA的信号转导第19-21页
        1.6.1 ABA的信号转导途径重要的受体与蛋白酶第20页
        1.6.2 与ABA相关的顺式作用元件与响应蛋白第20-21页
    1.7 ABA与紫花苜蓿第21-22页
    1.8 早期脱水响应基因第22-24页
2 引言第24-25页
3 试验一MsERD15在胁迫中的表达分析第25-37页
    3.1 试验材料第25-27页
        3.1.1 植物材料第25页
        3.1.2 质粒和菌株第25页
        3.1.3 主要的试剂和试剂盒第25-26页
        3.1.4 主要的仪器设备第26-27页
    3.2 试验方法第27-30页
        3.2.1 胁迫样处理以及样品采集第27页
        3.2.2 引物的设计与合成第27页
        3.2.3 RNA提取第27-28页
        3.2.4 RNA浓度和质量检测第28页
        3.2.5 cDNA合成第28-29页
        3.2.6 荧光定量PCR第29-30页
    3.3 结果与分析第30-35页
        3.3.1 RNA质量和浓度检测第30页
        3.3.2 引物的验证与分析第30-31页
        3.3.3 MsERD15基因的表达分析第31-35页
    3.4 讨论第35-37页
4 试验二自然条件下MsERD15的表达分析及其与环境的相关性分析第37-44页
    4.1 试验材料第37-38页
        4.1.1 植物材料第37页
        4.1.2 质粒和菌株第37页
        4.1.3 主要试剂和试剂盒第37-38页
        4.1.4 主要仪器设备第38页
    4.2 试验方法第38-41页
        4.2.1 样品采集及处理第38页
        4.2.2 引物的设计与合成第38页
        4.2.3 RNA的提取第38-39页
        4.2.4 RNA浓度和质量检测第39页
        4.2.5 cDNA合成第39-40页
        4.2.6 荧光定量PCR第40-41页
    4.3 结果与分析第41-42页
        4.3.1 RNA质量和浓度检测第41页
        4.3.2 MsERD15的表达分析第41-42页
        4.3.3 不同秋眠级紫花苜蓿中MsERD15表达量与环境的相关性分析第42页
    4.4 讨论第42-44页
5 试验三MsRD15的表达载体的构建以及过表达植株的培育与鉴定第44-56页
    5.1 试验材料第44-46页
        5.1.1 植物材料第44页
        5.1.2 质粒与菌株第44页
        5.1.3 主要试剂和试剂盒第44-45页
        5.1.4 培养基配方第45-46页
        5.1.5 主要仪器设备第46页
    5.2 试验方法第46-52页
        5.2.1 MsERD15基因过表达载体的构建第46-52页
            5.2.1.1 引物设计第46页
            5.2.1.2 MsERD15基因CDS区克隆和测序第46-49页
            5.2.1.3 pMD19-ERD15质粒和pCAMBIA3301空载体双酶切第49-50页
            5.2.1.4 连接转化及鉴定第50页
            5.2.1.5 重组质粒转化农杆菌LBA4404第50-51页
            5.2.1.6 紫花苜蓿的遗传转化第51页
            5.2.1.7 转基因苜蓿的鉴定第51-52页
    5.3 结果与分析第52-55页
        5.3.1 PCR克隆MsERD15基因CDS区第52-53页
        5.3.2 目的基因与pMD19-T载体连接第53页
        5.3.3 pMD19-ERD15和pCAMBIA3301空载体双酶切第53-54页
        5.3.4 重组质粒PCR检测和双酶切鉴定第54页
        5.3.5 转基因苜蓿的分子鉴定第54-55页
    5.4 讨论第55-56页
6 总结与展望第56-57页
参考文献第57-71页
英文摘要第71-72页

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