| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-26页 |
| ·立题背景与意义 | 第11-13页 |
| ·大肠杆菌O157：H7的简介 | 第13-16页 |
| ·大肠杆菌O157：H7的基本特征 | 第13-14页 |
| ·大肠杆菌O157：H7的抵抗力 | 第14-15页 |
| ·大肠杆菌的主要毒力因子和其致病性 | 第15-16页 |
| ·大肠杆菌O157：H7的历史流行情况 | 第16页 |
| ·大肠杆菌O157：H7的检测鉴定方法 | 第16-20页 |
| ·传统分离鉴定方法 | 第16-18页 |
| ·免疫学检测方法 | 第18-19页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第19-20页 |
| ·环介导等温扩增(LAMP)方法 | 第20-24页 |
| ·LAMP方法的简单概述 | 第20页 |
| ·LAMP方法的特点 | 第20-21页 |
| ·LAMP引物的设计 | 第21-22页 |
| ·LAMP的反应体系 | 第22页 |
| ·LAMP反应产物的检测方法 | 第22-23页 |
| ·环介导等温技术在检测病原微生物上的应用 | 第23-24页 |
| ·研究内容 | 第24-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-34页 |
| ·试验材料 | 第26-27页 |
| ·试验菌株 | 第26页 |
| ·仪器与设备 | 第26页 |
| ·主要培养基 | 第26-27页 |
| ·生化试剂 | 第27页 |
| ·试验方法 | 第27-29页 |
| ·大肠杆菌O157：H7的培养 | 第27页 |
| ·大肠杆菌O157：H7基因组DNA模板的制备 | 第27-29页 |
| ·细菌平板计数 | 第29页 |
| ·LAMP引物设计,反应体系以及操作程序 | 第29-31页 |
| ·LAMP引物设计 | 第29-30页 |
| ·LAMP和PCR反应体系 | 第30页 |
| ·LAMP和PCR反应操作程序 | 第30-31页 |
| ·LAMP反应条件优化 | 第31-32页 |
| ·引物对LAMP反应的影响 | 第31页 |
| ·最佳反应温度的优化 | 第31页 |
| ·反应时间的优化 | 第31页 |
| ·dNTP浓度的优化 | 第31-32页 |
| ·Mg~(2+)浓度的优化 | 第32页 |
| ·BST酶的优化 | 第32页 |
| ·LAMP引物特异性实验 | 第32页 |
| ·LAMP扩增产物的分析 | 第32-33页 |
| ·LAMP产物的可视结果分析 | 第32页 |
| ·LAMP产物的电泳分析 | 第32-33页 |
| ·LAMP酶切结果分析 | 第33页 |
| ·大肠杆菌O157：H7灵敏度的探索 | 第33页 |
| ·LAMP的敏感性 | 第33页 |
| ·PCR的敏感性 | 第33页 |
| ·临床样品的诊断 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-46页 |
| ·LAMP方法反应条件优化 | 第34-40页 |
| ·温度对LAMP反应的影响 | 第34页 |
| ·LAMP反应时间的优化 | 第34-36页 |
| ·LAMP反应引物浓度的优化 | 第36-38页 |
| ·dNTP浓度的优化 | 第38-39页 |
| ·最适Mg~(2+)浓度的选择 | 第39-40页 |
| ·BST酶的优化 | 第40页 |
| ·引物特异性实验 | 第40-41页 |
| ·LAMP引物特异性实验 | 第40-41页 |
| ·LAMP反应扩增产物的分析 | 第41-43页 |
| ·LAMP产物的结果的分析 | 第41-43页 |
| ·LAMP反应产物酶切结果分析 | 第43页 |
| ·大肠杆菌O157：H7灵敏性的分析 | 第43-46页 |
| ·LAMP检测大肠杆菌O157：H7的灵敏性 | 第43-44页 |
| ·PCR方法检测大肠杆菌O157：H7的灵敏性 | 第44-46页 |
| 4 临床样品的诊断 | 第46-47页 |
| 5 讨论 | 第47-51页 |
| ·LAMP检测大肠杆菌O157：H7的意义与可行性 | 第47-48页 |
| ·靶基因的选择 | 第48页 |
| ·LAMP反应程序优化 | 第48-50页 |
| ·镁离子浓度的影响 | 第48-49页 |
| ·温度对LAMP的影响 | 第49页 |
| ·引物对LAMP反应的影响 | 第49页 |
| ·链置换DNA聚合酶 | 第49-50页 |
| ·LAMP污染防治措施 | 第50-51页 |
| 6 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 附录一 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61页 |